Universal DNA Purification Kit

通用型 DNA 純化回收試劑盒

通用型DNA純化回收試劑盒 核酸提取

目錄號:43013

產(chǎn)品內(nèi)容：

自備試劑：

無水乙chun

保存條件：

室溫（15 ~ 25℃）

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

產(chǎn)品簡介：

本試劑盒既能從TAE 或TBE 瓊脂糖凝膠中回收 DNA 片段,，又能用于直接純化 PCR 產(chǎn)物，還適用于mei切產(chǎn)物 DNA 片段的純化回收,、探針標(biāo)記后的純化回收,、DNA 樣本濃縮。使用本產(chǎn)品可回收 100bp-10kb 大小的DNA 片段,，回收率可達(dá) 85%-95%,。該試劑盒操作簡便，得到的 DNA 片段可用于mei切,、連接,、測序等實驗,。

注意事項：

1.   Buffer BL 的加入能夠改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和穩(wěn)定性,，消除高溫潮濕或其他不良環(huán)境因素對吸附柱造成的影響。收到貨后 2 個月內(nèi),，不用做柱平衡,。

2.   使用前請先檢查Buffer BL、Buffer DB 是否出現(xiàn)渾濁,，如有混濁現(xiàn)象,，可在 37℃水浴中加熱幾分鐘，即可恢復(fù)澄清,。

3.    切膠時,，紫外照射時間應(yīng)盡量短，以免對 DNA 造成損傷,。

4.    回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關(guān),，初始量越少、洗脫體積越小,，回收率越低,。

操作步驟：

第一次使用前，請先在 Buffer WB 中加入無水乙chun,，并打?qū)礃?biāo)記,，加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽。

一,、從瓊脂糖凝膠中回收DNA 片段

1.   柱平衡：向吸附柱中（吸附柱放入收集管中）加入 100 ul Buffer BL,，12,000 rpm 離心 1 min,，棄濾液，將吸附柱重新放回收集管中,。（請使用當(dāng)天處理過的柱子）

2.    切膠：在長波紫外燈下,，用干凈刀片將目的 DNA 條帶切下，盡量切除不含 DNA 的凝膠,。

3.    稱重：將切下的含有目的 DNA 條帶的凝膠,，放入 1.5 ml 離心管中，稱取凝膠重量（去除空管重量）,。如果凝膠重量為 100mg,，其體積可視為 100ul。

4.    溶膠：加入 3 倍體積 Buffer DB,，56℃水浴,，直到凝膠wan全溶解，期間顛倒混勻 2 次加速溶膠,。

（如果凝膠濃度大于 2%,，應(yīng)加入 6 倍體積 Buffer DB。對于回收<100 bp 的小片段,，可在凝膠wan全溶解后,，再加入 1.5 倍膠塊體積的異丙chun以提高回收率。）

5.   吸附：待溶液冷卻至室溫后加入吸附柱中,，室溫靜置 1 min,，然后 12,000 rpm 離心 1 min，棄濾液,。

（如果總體積超過 750 ul,，可分 2 次將溶液加入同一離心吸附柱中）

6.    漂洗：加入 600 ul 漂洗液Buffer WB，12,000 rpm 離心 1 min,，棄濾液,。

7.    二次漂洗：重復(fù)操作步驟 6。

8.    干燥：將吸附柱放回收集管中,， 12,000 rpm 離心 2 min,，甩干膜上殘留的乙chun，防止其抑制下游反應(yīng),。

9.   回收：將離心吸附柱置于一個新的 1.5 ml 離心管中,，在吸附柱中央加入 30 ~ 50 ul 洗脫液 Buffer EB，室溫放置 2 min,，12,000 rpm 離心 1 min 收集 DNA 片段,。

（注意：為增加回收效率，可將洗脫液在 65℃預(yù)熱，也可將得到的溶液重新加入到離心管中,，室溫放置 2 min,，再次離心收集。）

二,、 從 PCR 反應(yīng)液或mei切反應(yīng)液中回收 DNA 片段

1.   柱平衡：向吸附柱中（吸附柱放入收集管中）加入 100 ul 平衡液Buffer BL,，12,000 rpm 離心 1 min，棄濾液,，將吸附柱重新放回收集管中,。（請使用當(dāng)天處理過的柱子）

2.   加結(jié)合液：估計PCR 反應(yīng)液或mei切反應(yīng)液的體積，向其中加入 5 倍體積溶液 Buffer DB,，充分混勻,。

（如果樣本體積小于 100ul,用滅菌水補齊 100ul,以提高回收效率。）

3.   吸附：將上一步所得溶液加入一套吸附柱中,，室溫放置 1 min,，12,000 rpm 離心 1 min，棄濾液,。

（ 注意：吸附柱容積為 750ul,，若樣品體積大于 750ul 可分批加入）

4.    漂洗：加入 600ul Buffer WB，12,000 rpm 離心 1 min,，棄濾液,。

5.    二次漂洗：重復(fù)操作步驟 4。

6.   干燥：將吸附柱放回收集管中,， 12,000 rpm 離心 2 min,，甩干膜上殘留的乙chun,，防止其抑制下游反應(yīng),。

7.   洗脫：將離心吸附柱置于一個新的 1.5 ml 離心管中，在吸附柱中央加入 30 ~ 50 ul 洗脫液Buffer EB,，室溫放置 2 min,。12,000 rpm 離心 1 min 收集 DNA 片段。

（注意：為增加回收效率,，可將洗脫液在 60℃預(yù)熱,，也可將得到的溶液重新加入到離心管中，室溫放置 2 min,，再次離心收集,。）

通用型DNA純化回收試劑盒 核酸提取