Gel DNA Purification Kit

瓊脂糖凝膠純化回收試劑盒

瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 核酸提取

目錄號:43011

產品內容：

自備試劑：

無水乙chun

保存條件：

室溫（15 ~ 25℃）

具體產品的參數以收到產品說明書的參數為準

產品簡介：

本試劑盒適用于從 TAE 或 TBE 瓊脂糖凝膠中回收 DNA 片段,，使用本產品可回收 100bp-10kb 大小的DNA 片段,，回收率可達 85%-95%。該試劑盒操作簡便,，得到的 DNA 片段可用于mei切,、連接、測序等實驗,。

產品特點：

1.         快速：步驟少,，操作簡便，整個操作僅需 15 分鐘,。

2.          高效：每個離心吸附柱可吸附 10 ug 以上的 DNA 片段,，回收效率在 85%以上。

注意事項：

1.   Buffer BL 的加入能夠改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和穩(wěn)定性,，消除高溫潮濕或其他不良環(huán)境因素對吸附柱造成的影響,。收到貨后 2 個月內，不用做柱平衡,。

2.   使用前請先檢查Buffer BL,、Buffer DB 是否出現渾濁，如有混濁現象,，可在 37℃水浴中加熱幾分鐘,，即可恢復澄清。

3.   切膠時,，紫外照射時間應盡量短,，以免對 DNA 造成損傷。

4.   回收率與初始 DNA 量和洗脫體積有關,，初始量越少,、洗脫體積越小，回收率越低,。

操作步驟

第一次使用前,，請先在 Buffer WB 中加入無水乙chun，并打對勾標記,，加入體積請參照瓶上的標簽,。

從瓊脂糖凝膠中回收 DNA 片段

1. 柱平衡：向吸附柱中（吸附柱放入收集管中）加入 100 ul Buffer BL，12,000 rpm 離心 1 min，棄濾液,，將吸附柱重新放回收集管中,。（請使用當天處理過的柱子）

2.  切膠：在長波紫外燈下，用干凈刀片將目的 DNA 條帶切下,，盡量切除不含 DNA 的凝膠,。

3.     稱重：將切下的含有目的 DNA 條帶的凝膠，放入 1.5 ml 離心管中,，稱取凝膠重量（去除空管重量）,。如果凝膠重量為 100mg，其體積可視為 100ul,。

4.  溶膠：加入 3 倍體積 Buffer DB,，56℃水浴，直到凝膠wan全溶解,，期間顛倒混勻 2 次加速溶膠,。

（如果凝膠濃度大于 2%，應加入 6 倍體積 Buffer DB,。對于回收<100 bp 的小片段,，可在凝膠完quan溶解后，再加入 1.5 倍膠塊體積的異丙chun以提高回收率,。）

5.  吸附：待溶液冷卻至室溫后加入吸附柱中,，室溫靜置 1 min，然后 12,000 rpm 離心 1 min,，棄濾液,。

（如果總體積超過 750 ul，可分 2 次將溶液加入同一離心吸附柱中）

6.  漂洗：加入 600 ul 漂洗液Buffer WB,，12,000 rpm 離心 1 min,，棄濾液。

7.  二次漂洗：重復操作步驟 6,。

8.  干燥：將吸附柱放回收集管中,， 12,000 rpm 離心 2 min,，甩干膜上殘留的乙chun,，防止其抑制下游反應。

9.     回收：將離心吸附柱置于一個新的 1.5 ml 離心管中,，在吸附柱中央加入 30 ~ 50 ul 洗脫液 Buffer EB,，室溫放置 2 min，12,000 rpm 離心 1 min 收集 DNA 片段,。

（注意：為增加回收效率,，可將洗脫液在 65℃預熱，也可將得到的溶液重新加入到離心管中，室溫放置 2 min,，再次離心收集,。）

瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 核酸提取