超速血液總 RNA 提取試劑盒

FlashPure Blood Total RNA Kit

超速全血（液體樣本）總RNA提取試劑盒 

目錄號：91213

產(chǎn)品內(nèi)容

自備試劑

無水乙chun

保存條件

室溫（15 ~ 25℃）

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

產(chǎn)品簡介

采用 RNAzol LS Reagent 與吸附柱相結(jié)合提取總 RNA 的方法,，簡化了RNA 提取的流程，與經(jīng)典的異丙chun沉淀法相比,，柱式純化方法簡便,，去除雜質(zhì)能力更強(qiáng)，大大提高了 RNA 的純度,。該試劑盒可從各種血液,、血漿、血清中快速提取總 RNA,，每個(gè)吸附柱每次可處理 0.25ml 液體樣本或 5~10×10⁶細(xì)胞,。提取的總 RNA 沒有 DNA 和蛋白的污染,，可用于Northern Blot、Dot Blot,、PolyA 篩選,、體外翻譯、RNase 保護(hù)分析和分子克隆,。

產(chǎn)品特點(diǎn)

1. RNA 純度更高,；

2. 應(yīng)用廣泛：可提取多種不同的樣本材料。

注意事項(xiàng)

1. 血液 RNA 的常溫保存/運(yùn)輸/提取的簡易方案：

臨床取樣：在臨床上,，使用抗凝管采血后,，取 250 μl 新鮮血液，加入 750μl的裂解液RLS( RNAzol LS Reagent,，Cat#91012-100),，用移液槍反復(fù)抽打并振蕩混勻，在室溫裂解5~10min,，直至血細(xì)胞充分發(fā)生裂解,。

保存：經(jīng)裂解后的血液可在-20℃下保存 1-2 個(gè)月，在-70℃保存半年,。

運(yùn)輸：可冰袋 4℃運(yùn)輸 1 天,，干冰-20℃運(yùn)輸一周。

提?。?/span>后續(xù) RNA 提取按 R213（或 R012）的說明書進(jìn)行,。

2. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會影響 RNA 的提取得率和質(zhì)量,。

操作步驟（所有離心步驟均可在室溫下進(jìn)行,，不影響提取效果！）

操作前,，請先在漂洗液 RW,、70%乙chun中加入無水乙chun，詳見瓶身的標(biāo)簽,。

1. 每 250 μl 液體樣品 (血清,、血漿、腦脊液,、凍存血等),，加入 750 μl裂解液 RLS，用移液器反復(fù)抽打幾次,，然后劇烈渦旋震蕩,，充分混勻。

（液體樣品和裂解液 RLS 的終體積比總是 1：3）

2. 將勻漿樣品在室溫下放置 5 min,，使得核酸蛋白復(fù)合物wan全分離,。

3. 加入 200μl lv仿,，劇烈振蕩 15 秒，并在室溫下放置 2-3 分鐘,。

4. 12,000 rpm 離心 10 min,。樣品會分成三層：下層有機(jī)相，中間層和上層無色的水相,，RNA 存在于水相中,。水相層的容量大約為所加 RLS體積的 70%，轉(zhuǎn)移上清至一個(gè)新的離心管中,，進(jìn)行下一步操作,。

5. 向上清中加入等體積 70％乙chun（檢查是否已加入乙chun），顛倒混勻,。

6. 每次轉(zhuǎn)移≤750 μl 上清混合液（包括沉淀）至 RNA 吸附柱中,，12,000rpm 離心 1 min，倒棄濾液,。重復(fù)此過程,，直到溶液全部上柱。

7. 加入 500μl 去蛋白液 RE,，12,000 rpm 離心 1 min,，倒棄濾液。

8. 加入 500 μl 漂洗液 RW,，12,000 rpm 離心 1 min,，倒棄濾液,。

（注意：漂洗液 RW 中按要求加入無水乙chun,，用后立即蓋緊瓶蓋，以防乙chun揮發(fā)）

9. 可選步驟：重復(fù)步驟 8 一次,。

10. 將RNA吸附柱放回空收集管中,，12,000 rpm 離心2min，去除乙chun,。

11. 取出RNA吸附柱，放入一個(gè)新的 RNase-Free 1.5 ml 離心管中，向吸附膜的中央加入 30~50 μl 的RNase-Free ddH2O,，室溫放置 2 min,，12,000 rpm 離心 1 min。

（注意：如要要提高 RNA 濃度,，可將得到的溶液重新加到吸附柱中,，室溫放置2 min，再次離心收集）

12. 提取的 RNA,，可直接用于下游實(shí)驗(yàn),，或于-70℃保存,，以免降解。

相關(guān)產(chǎn)品：

71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）

71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）

71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有qPCR儀)

超速全血（液體樣本）總RNA提取試劑盒