植物總 RNA 提取試劑盒

FlashPure Plant Total RNA Mini Kit

植物總RNA提取試劑盒

目錄號：91019

產(chǎn)品內(nèi)容

保存溫度

室溫（15 ~ 25℃）保存,，有效期 12 個月。

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

產(chǎn)品簡介

適用于提取絕大多數(shù)植物根,、莖,、葉、花的總RNA,，RNA可直接用于RT,， RT-PCR，RT-qPCR,，RACE,，普通轉(zhuǎn)錄組測序等。

本試劑盒是同類產(chǎn)品中適應(yīng)性zui廣泛,，不但可以提取小麥,、玉米、水稻,、大豆,、番茄、煙草,、擬南芥等簡單植物,，也可以提取茶樹葉片,、棉花葉片,、葡萄葉片、楊樹葉片,、番薯葉片,、花生葉片、香蕉葉片、荔枝葉片,、白松葉片等多糖多酚含量一般的植物,。

如果遇到果實、種子,、中草藥,，例如：多糖多酚巨高的作物種子（小麥/玉米/大豆/水稻）、葡萄果實,、藍莓果實,、百合鱗莖、土豆塊莖,；或者次級代謝產(chǎn)物巨豐富的葛根,、虎杖、雪蓮等藥用植物,，請選擇R513-果實種子總RNA提取試劑盒,。

產(chǎn)品特點

1. 無毒：免lv仿、免β-巰基乙chun,！

2. 高質(zhì)：28s/18s=2:1,，OD260/280=2.0～2.2！

3. 高效：提取全過程僅需 20 分鐘,！

注意事項

a. 自備試劑：無水乙chun,。

b. 提取過程使用 RNase-Free 的吸頭；研缽用水che底洗凈,，烘箱烘干即可,；

c. 樣品加入裂解液 PRL 勻漿后，可在–80℃保存一個月以上,。

d. 取 RNA 樣本時,，把新鮮組織樣本浸入 RNAsafe ( RNA 樣品保存液， 91115-100 ) 中,，可在 37℃保存一天,，在 25℃保存一周，在 4℃保存一個月,，在-20℃或者–80℃長期保存,。

操作步驟

提示：所有離心步驟必須在室溫（15 ~37℃）下進行。

第一次使用前,，請先在漂洗液 RW 中加入無水乙chun,，加入體積詳見標簽

1. 材料處理：

a．取 500 μl 裂解液 PRL，轉(zhuǎn)入 1.5 ml 離心管中,，再加入 50 μl 糖酚去除劑 PAD,，混勻備用,。

注意：對于幼嫩的農(nóng)作物葉片等簡單樣本，不加糖酚去除劑 PAD,，RNA

的產(chǎn)量可能會提高一些,。

b．液氮中研磨適量植物組織成細粉，取≤50 mg 細粉轉(zhuǎn)入上述裝有裂解

液 PRL 的 1.5 ml 離心管中,劇烈渦旋震蕩 30 sec,，充分混勻,。

（冬天氣溫低，37℃搖床振蕩 3 min,，可增強裂解效果,，提高產(chǎn)量）

c． 將裂解物 13,000 rpm 離心 5-10 分鐘，沉淀不能裂解的碎片,。

注意：使用 1 ml 的裂解液 PRL 和 100 μl 糖酚去除劑去裂解 100 mg 樣品,，RNA 產(chǎn)量會翻倍。

2. 小心吸取上清（一般 480 μl,，注意不要吸到沉淀）轉(zhuǎn)入一個新的離心管中,，加入 0.5 倍上清體積的無水乙chun（例如：480 μl 上清，加入 240 μl無水乙chun）,，此時可能出來沉淀,，用移液器吹打混勻，不需要離心,。

3. 轉(zhuǎn)移上清混合液至 RNA 吸附柱中,，13,000 rpm 離心 2 min，倒棄濾液,。

注：吸附柱的容積為 750 μl,，如果混合液超過此體積，請分兩次上柱,。

4. 加入700 μl 去蛋白液RW1,，室溫放置1min , 13,000 rpm離心30 sec，倒棄濾液,。

5. 加入 500 μl 漂洗液 RW, 13,000 rpm 離心 30 sec,，倒棄濾液。

6. 重復步驟 5,。

7. 將 RNA 吸附柱放回空收集管中,，13,000 rpm 離心 2 min，除去吸附膜上殘留的乙chun,。

8. 取出 RNA 吸附柱,，放入 1.5 ml RNase-free 離心管中，向 RNA 吸附膜的中央懸空滴加 30~50 μl 的 RNase-free H2O,，室溫放置 1 min,，13,000 rpm 離心 1 min。

9. 提取的 RNA 可直接用于下游實驗,，或于-70℃保存,，避免 RNA 降解。

附錄：

一,、免液氮直接研磨（自動研磨儀）——適用于新鮮樣本

a. 在2.0ml 液氮研磨管中加入4 mm兩粒,，加600μl裂解液 ARL，

放進20 mg左右的樣本,，設(shè)置65個頻率,，震蕩2 min。

b. 將裂解物13,000 rpm 離心3 min,，沉淀不能裂解的碎片,。

二、液氮研磨（自動研磨儀）:

a. 把研磨模塊丟到液氮中預冷,，直到?jīng)]有氣泡冒出視為預冷完畢,。

b. 在2.0 ml液氮研磨管中放入3mm 鋼珠3粒，放進20-30mg樣本,，投入液氮中預冷,。

c. 把預冷好的離心管插入研磨模塊中，放進研磨儀,，設(shè)置 55 個頻率,， 震蕩 30~60 sec。（以北京赫得研磨儀——京 N9548 為例）

d. 研磨完成后,，馬上加600μl裂解液ARL,，劇烈渦旋振蕩,充分混勻。

e. 將裂解物 13,000 rpm 離心 3 min,，沉淀不能裂解的碎片,。

相關(guān)產(chǎn)品：

71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）

71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）

71600-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有qPCR儀)

植物總RNA提取試劑盒