諾博萊德 Universal Total RNA Kit通用型總 RNA 提取試劑盒

通用型總RNA快速提取試劑盒

目錄號：91013

產(chǎn)品內(nèi)容

自備試劑

無水乙醇

保存條件

室溫（15 ~ 25℃）

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

產(chǎn)品簡介

采用 Trizol 試劑與離心吸附柱結(jié)合提取總RNA的方法,，簡化了RNA提取的流程，與經(jīng)典的異丙醇沉淀法相比,，柱式純化方法簡便,，去除雜質(zhì)能力更強，大大提高了 RNA 的純度,。該試劑盒可從各種細胞或組織（動物,、植物、血液）中快速提取總 RNA,，每個吸附柱每次可處理 50-100 mg 組織或 5×10⁶ 細胞,，可同時處理大量不同樣品,。一個小時內(nèi)即可完成反應(yīng),，提取的總RNA沒有 DNA 和蛋白的污染，可用于 Northern Blot,、Dot Blot,、PolyA 篩選、體外翻譯,、RNase 保護分析和分子克隆,。

產(chǎn)品特點

1. RNA 純度更高；

2. 應(yīng)用廣泛：可提取多種不同的樣本材料,。

3. 本公司生產(chǎn)的 Universal Total RNA Kit 質(zhì)量優(yōu)異,，可以wan美替代 Thermo的 TRIzol Plus RNA Purfication Kit。

4. 可在常溫下提取 RNA,，不需要 4℃離心機,；亦可以兼容 4℃離心機。

注意事項

1. RNA 在裂解液 RL 中時不會被 RNase 降解,，但后續(xù)處理過程中應(yīng)使用不含RNase的吸頭和玻璃器皿,，璃器皿可在150℃烘烤4 h，塑料器皿可在 0.5 M NaOH 中浸泡 10 min,，然后用水che底洗凈,，再高壓滅菌。

2. 樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,，否則會影響 RNA 的提取得率和質(zhì)量,。

3. 樣品加入裂解液 RL（RNAzol）勻漿后，加氯仿前,，樣品可在–80℃保存一個月以上,。

4. 取 RNA 樣本時，把新鮮組織樣本浸入 RNAsafe (RNA 樣品保存液,，91115-100)中,，可在 37℃保存一天,，在 25℃保存一周，在 4℃保存一個月,，在-20℃或者–80℃長期保存,。

操作步驟

第一次使用前，請先在漂洗液 RW 中加入zhi定量無水乙chun,，詳見瓶上的標(biāo)簽,。

提示：所有離心步驟均可在室溫（15~37℃）下進行，提取效果更佳,！

1. 材料處理：

a．組織（動物,、植物、真菌）：將組織在液氮中磨成細粉,。每 30~50 mg 動物組織加 1ml 裂解液RL,，每50~100 mg植物/真菌組織加 1ml 裂解液RL，渦旋 15sec,。樣品體積不應(yīng)超過裂解液RL體積的10%,。

b．單層貼壁培養(yǎng)細胞：吸去培養(yǎng)液，加入適量裂解液RL,，每 10cm2 加1ml裂解液RL,，用移液器抽打幾次。

c． 細胞懸液：離心收集細胞,，棄上清,，每 5×10⁶ 個細胞加1ml裂解液RL。加裂解液 RL 前不要洗滌細胞,，以免降解mRNA,。

d．血液：取新鮮血液，加入5倍體積裂解液RL,，（推薦0.2ml血液+1 ml 裂解液 RL ）,，充分振蕩混勻。

2. 將勻漿樣品在室溫下放置 5 min,，使得核酸蛋白復(fù)合物wan全分離,。

3. 可選步驟：12,000 rpm 離心 5 min，轉(zhuǎn)移上清至一新的離心管中,。

（注意：如果樣品中含有較多蛋白,、脂肪、多糖或肌肉,、植物結(jié)節(jié)部位等可加此步驟離心去除,，離心得到的沉淀中含有細胞外膜、多糖,、高分子 DNA 等,，RNA 存在于上清液中）

4. 向上清（或裂解液混合液）中加入等體積的無水乙醇,，混勻，此時可能會出現(xiàn)沉淀,，每次將≤750 ul 溶液和沉淀一起轉(zhuǎn)入RNA吸附柱中,，12,000rpm離心1 min，倒棄濾液,，若一次不能轉(zhuǎn)移wan全,，可分次轉(zhuǎn)移。

5. 向吸附柱內(nèi)加入500 ul 去蛋白液 RE,，12,000 rpm 離心 1 min,，倒棄

濾液。

6. 向吸附柱內(nèi)加入500ul漂洗液RW,，12,000rpm離心1 min,，棄濾液。

（注意：請檢查漂洗液 RW 中是否已按要求加入無水乙醇?。?

7. 重復(fù)步驟 6 一次,。

8. 將RNA吸附柱放回空收集管中,，12,000 rpm 離心 2min,，甩干膜上殘

留的乙醇。

9. 取出RNA吸附柱,，放入一個新的RNase-Free 1.5 ml 離心管中,，向吸附膜的中央部位懸空滴加50~100ul RNase-Free ddH₂O，室溫放置2min,，12,000 rpm離心1 min,，管底即RNA 溶液。

10. 提取的RNA可直接用于下游實驗,，或于-70℃保存,，以防降解。

相關(guān)產(chǎn)品：

71118-100 Script III 1st Strand cDNA Synthesis Kit（for PCR or qPCR）

71710-100 Script III All-in-one RT Mix with dsDNase（for qPCR）

71711-500 2x Universal SYBR Green qPCR Mix (適用于所有 qPCR 儀)

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