諾博萊德 吲哚乙酸氧化酶活性檢測(cè)試劑盒 Indoleacetic acid oxidase Activity Assay Kit

吲哚乙酸氧化酶活性檢測(cè)試劑盒 光合作用

產(chǎn)品貨號(hào)：BC2983

產(chǎn)品名稱：吲哚乙酸氧化酶活性檢測(cè)試劑盒 Indoleacetic acid oxidase Activity Assay Kit

產(chǎn)品規(guī)格：100T/48S

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

自備試劑：該試劑盒實(shí)驗(yàn)過程中需自備試劑,，詳情見網(wǎng)站說明書

中文名稱：吲哚乙酸氧化酶活性檢測(cè)試劑盒

英文名稱：Indoleacetic acid oxidase Activity Assay Kit

規(guī)格：100T/48S

檢測(cè)方法：微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader

儲(chǔ)存條件：Store at -20℃,，6 months

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

產(chǎn)品說明：

吲哚乙酸(IAA)在吲哚乙酸氧化酶的作用下，被氧化破壞失去活性,。IAA氧化酶能調(diào)節(jié)植物體內(nèi)吲哚乙酸的的水平,，從而影響植物的生長(zhǎng)。

IAA在無機(jī)酸條件下與FeCl3作用生成紅色產(chǎn)物,，在530nm下有最大吸收峰,。酶活力的大小可用消耗IAA的速率表示。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、低溫離心機(jī),、水浴鍋、可調(diào)式移液器,、微量玻璃比色皿/96孔板,、研缽/勻漿器/超聲破碎儀、乙醇(>98%,，AR),、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)樣本量)

1,、組織：稱取約0.1g組織,，加入ImL提取液進(jìn)行冰浴勻漿。12000g4℃離心15min,，取上清,，置冰上待測(cè)。

2,、細(xì)胞或細(xì)菌樣本的制備：先收集細(xì)胞或細(xì)菌樣本到離心管內(nèi),，棄上清，按照每500萬細(xì)胞或細(xì)菌加入1mL提取液,，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率200W,，超聲3s，間隔10s,，重復(fù)30次),。12000g，4℃離心15min,，取上清,，置冰上待測(cè)。

二,、測(cè)定步驟

1,、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，波長(zhǎng)調(diào)至530nm,，分光光度計(jì)蒸餾水調(diào)零,。

2、標(biāo)準(zhǔn)液的稀釋：將標(biāo)準(zhǔn)溶液用蒸餾水稀釋為0.4,、0.2,、0.1、0.05,、0.025,、0.0125μmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)液。

三,、吲哚乙酸氧化酶酶活計(jì)算

1,、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：

以標(biāo)準(zhǔn)液的濃度(μmol/mL)為x軸，對(duì)應(yīng)的△A標(biāo)準(zhǔn)為y軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,，得到標(biāo)準(zhǔn)方程y=kx+b,，將ΔA測(cè)定帶入方程中計(jì)算得到樣本濃度(x，μmol/mL)

2,、吲哚乙酸氧化酶活力計(jì)算：

Solarbio

(1)按蛋白濃度計(jì)算：

單位的定義：每mg組織蛋白在反應(yīng)體系中每分鐘消耗1nmolIAA的酶量定義為一個(gè)酶活性單位,。

IAA氧化酶酶活(U/mg prot)=xxV酶促x1000+(V樣xCpr)+T=333xx+Cpr

(2)按樣本質(zhì)量計(jì)算：

單位的定義：每g組織在反應(yīng)體系中每分鐘消耗1nmolIAA的酶量定義為一個(gè)酶活性單位,。

IAA氧化酶酶活(U/g質(zhì)量)=xxV酶促x1000+(W+V提取xV樣)+T=333xx÷W

(3)按細(xì)胞或細(xì)菌數(shù)量計(jì)算：

單位的定義：每104個(gè)細(xì)胞或細(xì)菌在反應(yīng)體系中每分鐘消耗lnmolIAA的酶量定義為一個(gè)酶活性單位。

IAA氧化酶酶活(U/104cell)=xxV酶促x1000+(N÷V提取xV樣)+T=333×x÷N

V酶促酶促反應(yīng)總體積,，0.08mL：1000：?jiǎn)挝粨Q算系數(shù),，1μmol=1000nmol;V樣加入的樣本體積，0.008mL：Cpr：樣本蛋白濃度,，mg/mL;W：樣本質(zhì)量,，g;V提取：提取液體積,，1mL;N：細(xì)胞數(shù)量,，以萬計(jì);T：反應(yīng)時(shí)間，30min,。

吲哚乙酸氧化酶活性檢測(cè)試劑盒 光合作用

產(chǎn)品訂購信息：

BC2983吲哚乙酸氧化酶活性檢測(cè)試劑盒 Indoleacetic acid oxidase Activity Assay Kit 100T/48S