諾博萊德 ECL Plus超敏發(fā)光液,ECL超敏發(fā)光液,ECL發(fā)光液,ECL Western Blotting Substrate

ECL Plus超敏發(fā)光液 顯色與信號(hào)檢測(cè)

產(chǎn)品貨號(hào)：PE8898

產(chǎn)品名稱：ECL Plus超敏發(fā)光液,ECL超敏發(fā)光液,ECL發(fā)光液,ECL Western Blotting Substrate

產(chǎn)品規(guī)格：2*12.5ml / 2*50ml / 250ml*2

產(chǎn)品簡介：

別名：ECL超敏發(fā)光液 ECL發(fā)光液

英文名稱：ECL Western Blotting Substrate

中文名稱：ECL Plus超敏發(fā)光液

規(guī)格：2*12.5ml / 2*50ml / 250ml*2

儲(chǔ)存條件：2-8℃,，avoid light，1 year

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)

產(chǎn)品介紹

NobleRyder  PE8898  ECL Plus超敏發(fā)光液,ECL超敏發(fā)光液,ECL發(fā)光液,ECL Western Blotting Substrate直接或間接檢測(cè)與辣根過氧化物酶HRP關(guān)聯(lián)的蛋白或核酸底物,。這一du特的發(fā)光底物系統(tǒng)是目前zui靈敏的商業(yè)化熒光ECL檢測(cè)試劑,，具有ji高靈敏度和高信噪比，發(fā)光迅速,，熒光可使X感光膠片感光達(dá)12小時(shí)以上,，特別適用于痕量蛋白或核酸檢測(cè)。同時(shí)該試劑允許使用更高的抗體稀釋倍數(shù)（1：2000-1：10000）,，極其節(jié)省抗體,。

ECL Plus級(jí)發(fā)光液，是一種可廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)的化學(xué)發(fā)光試劑,。實(shí)驗(yàn)效果優(yōu)于市面上某zhiming品牌的超敏級(jí)發(fā)光液,。

ECL Plus超敏發(fā)光液與辣根過氧化物酶進(jìn)行反應(yīng)，產(chǎn)生熒光,，可以通過膠片和相對(duì)應(yīng)的儀器進(jìn)行信號(hào)收集,。

ECL Plus靈敏度ji高，是市面上普通DAB的1000倍以上,，在western實(shí)驗(yàn)中,，HRP標(biāo)記的抗體（1mg/ml）能達(dá)到10萬級(jí)稀釋，是某品牌的2-5倍左右,。ji高的靈敏度可以讓及大幅度的節(jié)省抗體成為可能,，在這種情況下需要降低一抗或者二抗的稀釋度，避免得到的是過暗的條帶,，難以比較,。

ECL Plus超敏發(fā)光液發(fā)光時(shí)間長，將兔的IgG制備成蛋白上樣樣品,，進(jìn)行正常的免疫印跡實(shí)驗(yàn)（上面提到的都是這種情況情況下的稀釋度，斑點(diǎn)試驗(yàn)的稀釋度會(huì)更高）,，在化學(xué)發(fā)光拍照儀器上進(jìn)行信號(hào)收集,，在20分鐘后，熒光強(qiáng)度與初始的熒光強(qiáng)度基本無變化，30分鐘后二抗?jié)舛雀叩臒晒馍杂兴p,，其他的基本沒有變化,。

用途：用于HRP標(biāo)記抗體的Western Blot和HRP標(biāo)記探針的核酸雜交。

安全性：無特殊毒性,，按普通化學(xué)品處理,。

使用方法（僅供參考）：

1. 常規(guī)電泳、轉(zhuǎn)膜,、HRP 標(biāo)記抗體或核酸探針孵育,、洗膜。注意用 HRP 標(biāo)記 IgG 或用一抗-鏈親 和素-生wu素-HRP 夾心法,。核酸雜交膜用 HRP 標(biāo)記探針雜交,，洗膜。

2. 在洗滌膜上的 HRP 標(biāo)記二抗的同時(shí),，新鮮配制發(fā)光工作液：分別取等體積的溶液 A 和 B 混合,， 放置使之恢復(fù)室溫否則會(huì)減弱熒光強(qiáng)度。建議立即使用工作液,，室溫放置數(shù)小時(shí)后仍可使用但 靈敏度略有減低,。

3. 用鑷子取出膜，搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜wan全干燥,。將膜wan全浸入并與發(fā)光工作液充分接觸（約 0.125mL 發(fā)光工作液/cm2膜）,。室溫孵育 3 分鐘后立即壓片曝光。孵育時(shí)間過長不會(huì)增加靈敏度,，有時(shí)還會(huì)導(dǎo)致曝光條帶異常,。發(fā)光過程的本質(zhì)是酶促反應(yīng)，使用過少的發(fā)光工作液不利于反應(yīng)進(jìn)行,，也會(huì)導(dǎo)致膜上條帶曝光不均勻和靈敏度明顯降低,。為達(dá)節(jié)約目的可將膜剪小但勿降低發(fā)光液用量。

4. 用鑷子夾起膜,，搭在濾紙上瀝干發(fā)光工作液,。但勿洗去發(fā)光液。

5. 在 X 光膠片暗盒內(nèi)面鋪一張面積大于膜的保鮮膜,。將雜交膜貼在保鮮膜上,，將保鮮膜折起來wan全包裹雜交膜，去除氣泡和皺褶,，可剪去邊緣部多余的保鮮膜,。用濾紙吸去多余的發(fā)光工作液。 用膠帶將覆蓋雜交膜的保鮮膜固定在暗盒內(nèi),，最好蛋白帶面向上,。

6. 在黑暗中放入 X 感光膠片,，分別曝光不同的時(shí)間如數(shù)秒到數(shù)分鐘。顯影沖洗,。

注意事項(xiàng)：

1. 步驟 1-5 可在日光燈下操作,；但發(fā)光液暴露于強(qiáng)光下時(shí)間過久靈敏度可能略有降低，移到暗房操作可避免,。戴手套可以避免在膜上留下手印,，保持膜的潔凈。

2. 長時(shí)間曝光或蛋白質(zhì)過量,，將加深背景并使條帶強(qiáng)弱變化失去線性關(guān)系,。曝光不足則條帶模糊。

3. 發(fā)光工作液孵育約 3 分鐘后膜上的條帶發(fā)光,。強(qiáng)條帶發(fā)光在暗房中肉眼可見,，低豐度蛋白條帶 發(fā)光較弱，肉眼雖不可見但能使 X 膠片曝光,。不能單憑肉眼觀察判斷條帶發(fā)光時(shí)間,。肉眼不可見的熒光實(shí)際上可持續(xù)數(shù)小時(shí)并使 X 膠片感光，因而弱帶可曝光 1-10 小時(shí),。如果曝光后條帶不 佳,，可用洗膜緩沖液洗膜，重新孵育二抗,，然后重新用 ECL 發(fā)光和曝光,。

4. 由于超敏發(fā)光液的高靈敏度，強(qiáng)烈推薦大多數(shù)進(jìn)口抗體起始濃度為一抗 1：1000-1：4000,，二抗 1：2000-1：5000,。抗體濃度過高將造成高背景或沒有條帶,，導(dǎo)致失?。?

5. 某些市售保鮮膜包裹印跡膜時(shí)會(huì)淬滅熒光,，應(yīng)選擇高質(zhì)量保鮮膜,，例如“克林萊"牌保鮮膜。

6. 使用肉眼可見的預(yù)染色蛋白 Marker 和熒光-放射自顯影曝光標(biāo)簽可幫助確定膠片上條帶的準(zhǔn)確 位置和大小,。

7. NaN3 能抑制 HRP 活性,，回收二抗時(shí)應(yīng)避免使用 NaN3，如必需使用勿超過 0.01%,。

ECL Plus超敏發(fā)光液 顯色與信號(hào)檢測(cè)

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NobleRyder  PE8898  ECL Plus超敏發(fā)光液,ECL超敏發(fā)光液,ECL發(fā)光液,ECL Western Blotting Substrate 2*12.5ml / 2*50ml / 250ml*2