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參考價: | 面議 |
- BH1383 產(chǎn)品型號
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):40更新時間:2025-05-07 12:52:17
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10^6 |
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貨號 | BH1383 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號:BH1383
產(chǎn)品規(guī)格:1×10^6
本產(chǎn)品僅供科學研究或進一步生產(chǎn)使用,,不可用于臨床診斷或治療,。
AsPC-1+LUC 人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細胞
細胞鑒定: STR 鑒定已通過
細胞來源 :國家資源庫
細胞背景: Chen 等人于 1982 年用一名患有胰腺癌的 62 歲女性白種人患者腹水中的細胞移植到裸鼠后建
立??梢员磉_ CEA,,人胰腺相關抗原、人胰腺特異性抗原和黏蛋白,。
細胞特性 形態(tài):上皮細胞樣,,貼壁生長
用途:僅供科研使用。
培養(yǎng)條件 1) 準備 RPMI-1640培養(yǎng)基,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%;雙抗,,1%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37 攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為 70%-80%,。注意事項 該細胞為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 Luc 的細胞,隨細胞傳代次數(shù)的增加,,其 Luc 熒光強度會逐漸減弱,。若實驗要求需要維持熒光強度,可以加入嘌呤霉素進行再次篩選,。
建議收到細胞后至少傳 3 代,,凍存留種后再進行篩選。
初次進行細胞篩選時,,建議加入終濃度為 1ug/ml 嘌呤霉素的專用培養(yǎng)基維持培養(yǎng),,若無細胞漂 浮或者漂浮較少,即可更換為含 2ug/ml 嘌呤霉素的專用培養(yǎng)基繼續(xù)篩選,,以此類推,,至最高藥 物濃度為 5ug/ml,。若篩選過程中,漂浮細胞大于 60%,,則停止篩選,,換成正常培養(yǎng)基培養(yǎng),至細胞密度約 80%,,可繼續(xù)加入同濃度嘌呤霉素進行篩選,。當加入 5ug/ml 嘌呤霉素時細胞正常增殖,可停止篩選,,用不含藥專用培養(yǎng)基正常培養(yǎng)。
常溫發(fā)貨:收到后 T25 瓶消毒再放置培養(yǎng)箱靜置 2-3 小時后觀察密度和狀態(tài)拍照 2-3 張反饋給銷
售,,密度達標就可以傳代,。前期傳代比例 1:2,等再次長滿后傳代時建議凍存其中一整瓶成 1 個 1ml 凍存管,,另外一瓶繼續(xù)傳代,,反復凍存 2-3 只后才擴增做實驗,以防突發(fā)情況引起斷種,。
干冰發(fā)貨:常規(guī)細胞發(fā)貨凍存管 2 只,,復蘇 1 只,另外一只備用,,第一個復蘇不成功時嚴格按照 廠家要求復蘇第二個,,均沒有復蘇成功的情況即時留存復蘇照片通知銷售。
貼壁細胞參考:1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次,。
2. 加入 0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA 于培養(yǎng)瓶中(T25 瓶 1-2mL,,T75 瓶 2-3mL),置 于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入 3-4ml 含 10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化,。
3.輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 3-5min,,棄去上清液,,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
將細胞懸液按 1:2 的比例分到新 T25 瓶/6cm 培養(yǎng)皿中,,添加 6-8ml 按照說明書要求配置的新的 專用培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按 1:2~1:5 的比例進行,。
3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前 3 代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。
4)運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配
制的專用培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。
懸浮細胞參考:
懸浮狀態(tài)下生長的細胞,可以通過向培養(yǎng)瓶中添加專用培養(yǎng)基來維持細胞的生長狀態(tài),,一般情況 下細胞密度維持在 1×105~1×106 個/mL(不同細胞對密度要求不同,,)可以維持細胞的正常生長。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中 1000rpm,,離心 5min,,棄去上清,補加 1-2mL 培養(yǎng)液 后重懸混勻后將細胞懸液按 1:2 的比例分到新 T25 瓶中,,添加 6-8ml 按照說明書要求配置的新的專用培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按 1:2~1:4 的比例進行。
運輸形式 低溫:(1)1mL 凍存管包裝干冰運輸,,收到后-80 度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇,,若發(fā) 現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細胞有污染,,請立即與我們聯(lián)系。
常溫: (2) T25 瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,,收到后按照細胞接收后的處理方法操作,。
生物安全 1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,,并請注意防護,, 所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套,、衣服和戴上防護面罩,。注意:凍存管浸沒在液氮 中會泄漏,并會慢慢充滿液氮,。解凍時,,液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋 子,從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害,。
AsPC-1+LUC 人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細胞