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- CM1956 產(chǎn)品型號
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):53更新時間:2025-05-06 10:54:22
- 聯(lián)系人:
- 語純生物
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- 15316728970
- 地址:
- 遠(yuǎn)著大廈 八樓 1087
- 網(wǎng)址:
- www.ycswcell.com/
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10^6 |
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貨號 | CM1956 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號:CM1956
產(chǎn)品規(guī)格:1×10^6
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用,不可用于臨床診斷或治療,。
EL4 小鼠淋巴瘤細(xì)胞 (種屬鑒定)
細(xì)胞介紹
EL4是從用9,10-二甲基-1,2-苯并蒽在C57BL小鼠中誘導(dǎo)的淋巴瘤中建立的。能抗0.1 mM 氫化可的松,,對20 mcg/ml PHA敏感。 還有一個亞株(EL4.IL-2, ATCC TIB-181)可以生成高水平的IL-2,。檢測表明肢骨發(fā)育畸形病毒(鼠痘)陰性,。
細(xì)胞特性
1) 來源:T 淋巴細(xì)胞,;淋巴瘤
2) 形態(tài):淋巴母細(xì)胞 懸浮培養(yǎng)
3) 含量:>1x106 細(xì)胞數(shù)
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途:僅供科研使用。
運輸和保存
干冰運輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細(xì)胞有污染,,請立即與我們聯(lián)系。
(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
細(xì)胞接收后的處理
1) 收到細(xì)胞后,,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,,請拍照后及時聯(lián)系我們,。
2)請在4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,,作為售后時收到時細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3) 懸浮細(xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的專用培養(yǎng)基)。
4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的專用培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞,。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備
1) 準(zhǔn)備DMEM添加NaHCO3 1.5g/L培養(yǎng)基,;馬血清 10%,;雙抗,1%,。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3) 凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二. 細(xì)胞處理:
1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入到含4-6mL專用培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,,專用培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml專用培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度,。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
懸浮狀態(tài)下生長的細(xì)胞,,可以通過向培養(yǎng)瓶中添加專用培養(yǎng)基來維持細(xì)胞的生長狀態(tài),一般情況下細(xì)胞密度維持在1×105~1×106個/mL(不同細(xì)胞對密度要求不同,,)可以維持細(xì)胞的正常生長,。如需分瓶可以將細(xì)胞懸液收集到離心管中1000rpm,離心5min,,棄去上清,,補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的專用培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行,。
3) 細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實驗使用。
下面T25瓶為例,;
1. 細(xì)胞凍存時按照細(xì)胞傳代的過程收集消化好的細(xì)胞到離心管中,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細(xì)胞的凍存密度,。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細(xì)胞/ml.
2. 1000rpm離心3-5min,,去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ,,按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細(xì)胞/ml分配到一個凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中,,標(biāo)注好名稱、代數(shù),、日期等信息,。
將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存,。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。
EL4 小鼠淋巴瘤細(xì)胞 (種屬鑒定)