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上海語(yǔ)純生物科技有限公司
初級(jí)會(huì)員·1年BH0282HFF-1人皮膚成纖維細(xì)胞
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- BH0282 產(chǎn)品型號(hào)
- 語(yǔ)純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：57更新時(shí)間：2025-05-06 09:54:09
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10^5 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | BH0282 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號(hào)：BH0282
產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用，不可用于臨床診斷或治療,。
產(chǎn)品介紹
HFF-1人皮膚成纖維細(xì)胞
細(xì)胞詳情 | |
細(xì)胞名稱 | 人皮膚成纖維細(xì)胞HFF-1 |
貨 號(hào) | SAc0154 |
組織來(lái)源 | 新生男孩,，皮膚，包皮 |
細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞 |
生長(zhǎng)方式 | 貼壁生長(zhǎng) |
描 述 | 飼養(yǎng)層細(xì)胞,， 供H1,、H9、HN4,、HN1等hES使用,。 |
培養(yǎng)條件 | DMEM，15%FBS,，丙酮酸鈉,；空氣95%，二氧化碳5%,；37℃培養(yǎng) |
換液頻率 | 2-3天 |
傳代周期 | 3-4天 |
傳代比例 | 1:3-1:6 |
凍存液配方 | 基礎(chǔ)培養(yǎng)液,，40%FBS，DMSO 10% |
安全性 | BSL-1 |
供應(yīng)限制 | 僅供研究之用,。 |
細(xì)胞操作詳細(xì)步驟----貼壁細(xì)胞
1.細(xì)胞復(fù)蘇
1.1離心法
1.1.1準(zhǔn)備一個(gè)T25的細(xì)胞培養(yǎng)瓶并做好標(biāo)記，預(yù)熱好的細(xì)胞專用培養(yǎng)基,，一支15ml離心管,，離心管中加入4-5ml細(xì)胞專用培養(yǎng)基。
1.1.2取出細(xì)胞凍存管,，在37度水浴中快速解凍,，將管子擦干并消毒后迅速拿回生物安全柜。
1.1.3將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到加有培養(yǎng)基的離心管中,，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘,。
1.1.4倒掉上清，加入培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞亦可先將細(xì)胞團(tuán)彈散后加入培養(yǎng)基混勻。
1.1.5將重懸好的細(xì)胞轉(zhuǎn)移到T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，補(bǔ)充培養(yǎng)基到8ml左右,，十字搖晃，將細(xì)胞鋪勻后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng),。
1.2不離心法
1.2.1準(zhǔn)備一個(gè)T25的細(xì)胞培養(yǎng)瓶并做好標(biāo)記,，預(yù)熱好的細(xì)胞專用培養(yǎng)基，培養(yǎng)瓶中加入8ml左右培養(yǎng)基,。
1.2.2取出細(xì)胞凍存管,，在37度水浴中快速解凍，將管子擦干并消毒后迅速拿回生物安全柜,。
1.2.3將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到加有培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中,，十字搖晃，將細(xì)胞鋪勻后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng),，接種16小時(shí)后更換培養(yǎng)基,。
2.細(xì)胞傳代
2.1準(zhǔn)備細(xì)胞專用培養(yǎng)基，細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，胰酶（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）,，DPBS。
2.2棄上清,，并加2-3mlDPBS輕柔沖洗培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)細(xì)胞1-2次,。
2.3加入1ml胰酶，室溫或者37度消化,，直到細(xì)胞成片脫落,，加入3-4ml專用培養(yǎng)基終止消化，如果有成團(tuán)塊脫落的細(xì)胞可輕輕吹打分散細(xì)胞后再終止消化,。（注意：消化時(shí)間與所用胰酶效價(jià),，消化時(shí)候細(xì)胞密度以及溫度等因素有關(guān)，建議第一次消化時(shí)候,，多在顯微鏡下觀察,，以找到優(yōu)良消化時(shí)間）
2.4收集細(xì)胞懸液，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘,，棄上清,，加入培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞亦可先將細(xì)胞團(tuán)彈散后加入培養(yǎng)基混勻。
2.5將重懸好的細(xì)胞按比例分裝至T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，補(bǔ)充培養(yǎng)基到8ml左右,，十字搖晃，將細(xì)胞鋪勻后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng),。
3.細(xì)胞凍存
3.1準(zhǔn)備細(xì)胞凍存液,，細(xì)胞凍存管,，胰酶（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA），DPBS,。
3.2棄上清,，并加2-3mlDPBS輕柔沖洗培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)細(xì)胞1-2次。
3.3加入1ml胰酶,，室溫或者37度消化,，直到細(xì)胞成片脫落，加入專用培養(yǎng)基終止消化,，如果有成團(tuán)塊脫落的細(xì)胞可輕輕吹打分散細(xì)胞后再終止消化,。
3.4收集細(xì)胞懸液，1000轉(zhuǎn)離心5分鐘,，棄上清,。
3.5加入凍存液，重懸細(xì)胞,，并分裝到凍存管,，凍存密度0.8-1.5×106細(xì)胞/ml。
3.6將凍存管放入程序降溫盒,，并放到-80℃冰箱,，過(guò)夜后將凍存管轉(zhuǎn)移到液氮保存。
4.注意事項(xiàng)
4.1建議收到細(xì)胞后先用我們配套的培養(yǎng)基和血清,。收到活細(xì)胞的客戶培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基可回收使用,，保存在4度可使用一周。
4.2不同實(shí)驗(yàn)室操作上會(huì)有些許差異,，為了避免細(xì)胞不適應(yīng),，請(qǐng)先按照說(shuō)明書(shū)推薦的方法和操作步驟培養(yǎng)，待細(xì)胞凍存后可根據(jù)自己的習(xí)慣操作看細(xì)胞是否能夠適應(yīng),。
4.3建議收到細(xì)胞后,，前幾代及時(shí)凍存一些細(xì)胞，并最好是可以多凍存幾個(gè)批次,。
HFF-1人皮膚成纖維細(xì)胞
