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上海語純生物科技有限公司
初級會員·1年BH0288CCD841 CON 人正常結腸上皮細胞（STR鑒定）
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準- BH0288 產(chǎn)品型號
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：63更新時間：2025-05-06 09:51:12
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10^6 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BH0288 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號：BH0288
產(chǎn)品規(guī)格：1×10^6
本產(chǎn)品僅供科學研究或進一步生產(chǎn)使用,，不可用于臨床診斷或治療。
產(chǎn)品介紹
CCD841 CON 人正常結腸上皮細胞（STR鑒定）
細胞介紹
CCD 841 CoN (ATCC CRL-1790) 細胞是拉伸的上皮樣細胞,，在培養(yǎng)中生長為扁平且雜亂無章的層,。可以觀察到一些圓形細胞堆積在附著的群體上,，碎片中等至重,。CRL-1790 是一種正常的人類二倍體細胞系，因此它最終會衰老。人口倍增水平 (PDL) 信息可在特定批次的分析證書上找到,，并可在 ATCC 網(wǎng)站上找到,。
細胞特性
1） 來源：女性 大腸
2） 形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長(貼壁弱,，消化時間短,，時間過長會導致細胞不長)
3） 含量：>1x106 細胞數(shù)
4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
5） 用途：僅供科研使用。
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運輸,，收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細胞有污染,，請立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,，收到后按照細胞接收后的處理方法操作,。
細胞接收后的處理
1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們,。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù),。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況,。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收,，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的專用培養(yǎng)基6-8mL,，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,，可以對細胞進行傳代處理,。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收,。
4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞,，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的專用培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 ,。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備DMEM 基礎培養(yǎng)基 ),，特級胎牛血清10 % P/S 1%
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。換液頻率：隔天換液,。
3） 凍存液：90%FBS，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。
注意：
1.細胞經(jīng)過運輸后，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞破碎形成碎片,，是正?，F(xiàn)象。貼壁細胞可以消化,，懸浮細胞直接混勻收集細胞,，1000rpm(約150g)離心3-5min，棄上清,。加5ml PBS重懸細胞,，再1000rpm(約150g)離心3-5min，用新鮮的專用培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)瓶,。第二次PBS重懸是為了去除碎片,，如果平時碎片比較少，傳代時可以省略PBS重懸的步驟,；如果碎片很多，建議PBS多洗幾次,。
2.細胞生長不均時,，可以將細胞消化吹散后加入新的培養(yǎng)基重新接種或傳代,。
細胞生長緩慢時,，可以選擇更換優(yōu)質(zhì)胎牛血清或者提高血清濃度（最高不超過20%）培養(yǎng)，也可以根據(jù)細胞生長狀態(tài),，選擇傳代細胞到新的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),。
二． 細胞處理：
1） 凍存細胞的復蘇：
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL專用培養(yǎng)基的離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心3-5min,，棄去上清液，專用培養(yǎng)基重懸細胞,。然后將細胞懸液加入含6-8ml專用培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜,。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度,。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，具體以細胞消化到相互分離但未脫落，輕敲幾下可以下來為準,，嚴禁消化到細胞專用漂浮，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化,。
3. 輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的專用培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用,。
下面T25瓶為例,；
1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù),，來決定細胞的凍存密度,。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.
2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清,。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,，按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱,、代數(shù),、日期等信息,。
3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,，-80度冰箱中過夜,，之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用,。
CCD841 CON 人正常結腸上皮細胞（STR鑒定）
