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參考價: | 面議 |
- BH1940 產(chǎn)品型號
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):53更新時間:2025-05-06 09:14:28
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10^6 |
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貨號 | BH1940 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號:BH1940
產(chǎn)品規(guī)格:1×10^6
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進一步生產(chǎn)使用,,不可用于臨床診斷或治療,。
D341Med 人腦髓母細胞瘤細胞
細胞介紹
該細胞系是1984年由Friedman等建立的,;在裸鼠體內(nèi)可以成瘤,。該細胞系中纖維原蛋白,、谷氨酰胺合成酶、神經(jīng)元有的烯醇酶陽性,,但神經(jīng)膠質(zhì)纖維蛋白,、S-100蛋白陰性;UJ13A單克隆抗體檢測該細胞神經(jīng)外胚層抗原陽性,;c-myc癌基因高表達,。
STR信息:Amelogenin:X,Y,;CSF1PO:10,,11;D13S317:11,,13,;D16S539:12,14;D18S51:12,,17,;D19S433:13;D21S11:30,,31,;D2S1338:17;D3S1358:16,,18,;D5S818:11,12,;D7S820:9,,13;D8S1179:14,;FGA:19,,23;TH01:6,,9.3,;TPOX:8,11,;vWA:17,,18;
細胞特性
1) 來源:人
2) 形態(tài): 圓形 髓母細胞樣 懸浮生長,,
3) 含量:>1x106 細胞數(shù)
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途:僅供科研使用,。
運輸和保存
干冰運輸及復(fù)蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,,請立即與我們聯(lián)系,。
(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作,。
細胞接收后的處理
1) 收到細胞后,,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細胞有污染,,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),,同時給剛收到的細胞拍照(10×,,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3) 懸浮細胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細胞1000rpm離心5分鐘,,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的專用培養(yǎng)基)。
4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的專用培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備MEM培養(yǎng)基,;10--20%優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,1% NEAA,1mM丙酮酸鈉 雙抗,1%,。
維持細胞濃度在 0.4~1×106 cells/ml,,每周換液2~3次。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二. 細胞處理:
1) 凍存細胞的復(fù)蘇:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入到含4-6mL專用培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,,棄去上清液,,專用培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml專用培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜,。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度,。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
懸浮狀態(tài)下生長的細胞,可以通過向培養(yǎng)瓶中添加專用培養(yǎng)基來維持細胞的生長狀態(tài),,一般情況下細胞密度維持在1×105~1×106個/mL(不同細胞對密度要求不同,,)可以維持細胞的正常生長。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm,,離心5min,,棄去上清,補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的專用培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行,。
3) 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。
下面T25瓶為例,;
1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細胞的凍存密度,。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.
2. 1000rpm離心3-5min,,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,,按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,,標注好名稱、代數(shù),、日期等信息,。
3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存,。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用。
D341Med 人腦髓母細胞瘤細胞