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參考價: | 面議 |
- BH1952 產(chǎn)品型號
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):85更新時間:2025-05-06 08:58:03
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10^6 |
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貨號 | BH1952 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號:BH1952
產(chǎn)品規(guī)格:1×10^6
本產(chǎn)品僅供科學研究或進一步生產(chǎn)使用,不可用于臨床診斷或治療,。
SNU-1 人胃癌細胞(STR鑒定正確)
細胞描述
1984年J. Park與同事從在細胞毒性治療前取出的低分化原位胃癌中建立了SNU-1,。 L-多巴脫羧酶(DDC)陰性,。VIP受體陽性,但胃受體缺失,。沒有注意到存在 N-myc, L-myc, myb 和 EGF受體基因的擴增或重排的證據(jù),。細胞表達的c-myc和 c-erb-B-2 RNA水平與其它細胞株相當。以下基因不表達:N-myc, L-myc, c-cis, IGF-2, 及胃泌素釋放肽,。
細胞特性
1) 來源:胃,,胃癌,轉(zhuǎn)移腹水
2) 形態(tài):上皮樣,懸浮生長
3) 含量:>1x106 細胞數(shù)
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途:僅供科研使用,。
運輸和保存
干冰運輸及復蘇好存活細胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系,。
(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理
1) 收到細胞后,,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,,請拍照后及時聯(lián)系我們,。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。
3) 懸浮細胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細胞1000rpm離心5分鐘,,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的專用培養(yǎng)基)。
4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的專用培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞,。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備 1640 基礎培養(yǎng)基435ml ; 特級胎牛血清50 mL;Sodium Pyruvate丙酮酸鈉5 mL;GlutaMAX-1谷氨酰胺5 mL;P/S青霉素-鏈霉素5 mL。
注意:可以通過添加新鮮培養(yǎng)基或更換培養(yǎng)基來維持培養(yǎng),?;蛘撸梢酝ㄟ^將懸浮液離心并隨后重懸于新鮮培養(yǎng)基中來建立培養(yǎng)物,。隨著細胞密度的增加添加培養(yǎng)基,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 凍存細胞的復蘇:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入到含4-6mL專用培養(yǎng)基的離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,,專用培養(yǎng)基重懸細胞,。然后將細胞懸液加入含6-8ml專用培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度,。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
懸浮狀態(tài)下生長的細胞,,可以通過向培養(yǎng)瓶中添加專用培養(yǎng)基來維持細胞的生長狀態(tài),一般情況下細胞密度維持在1×105~1×106個/mL(不同細胞對密度要求不同,,)可以維持細胞的正常生長,。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm,離心5min,,棄去上清,,補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的專用培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行,。
3) 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。
下面T25瓶為例,;
1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.
2. 1000rpm離心3-5min,,去掉上清,。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,,標注好名稱,、代數(shù)、日期等信息,。
3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,,-80度冰箱中過夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存,。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用,。
SNU-1 人胃癌細胞(STR鑒定正確)