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參考價(jià): | 面議 |
- BH0277 產(chǎn)品型號(hào)
- 語(yǔ)純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù):39更新時(shí)間:2025-04-29 16:01:59
- 聯(lián)系人:
- 語(yǔ)純生物
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- 遠(yuǎn)著大廈 八樓 1087
- 網(wǎng)址:
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10^6 |
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貨號(hào) | BH0277 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號(hào):BH0277
產(chǎn)品規(guī)格:1×10^6
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用,不可用于臨床診斷或治療。
WERI-RB-1人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞(STR鑒定)
細(xì)胞介紹
WERI-Rb-I細(xì)胞株是1974年R.M. McFall 和 T.W. Sery建立的兩株人眼癌細(xì)胞系中的一株。 細(xì)胞能在Difco Bacto-Agar中存活但不形成克隆。 掃描電鏡顯示在表面囊泡,板狀偽足和微絨毛在數(shù)量上和頻率上的改變。 細(xì)胞分化研究,,腫瘤治療的動(dòng)物模型和生化評(píng)價(jià)都涉及這株細(xì)胞。
細(xì)胞特性
1) 來(lái)源:視網(wǎng)膜
2) 形態(tài):圓形細(xì)胞聚集成葡萄狀,,懸浮生長(zhǎng)
3) 含量:>1x106細(xì)胞數(shù)
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途:僅供科研使用,。
運(yùn)輸和保存:干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞:(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系,。(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作,。
細(xì)胞接收后的處理:
1) 收到細(xì)胞后,,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細(xì)胞有污染,,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請(qǐng)?jiān)?/span>4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),,同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù),。
3) 懸浮細(xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,,然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細(xì)胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的專用培養(yǎng)基),。
4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,,請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的專用培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 ,。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備IMEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,15%,;GlutaMAX-1谷氨酰胺 1% 雙抗,1%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,5%,。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細(xì)胞處理:
1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇::
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入到含4-6mL專用培養(yǎng)基的離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,,專用培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml專用培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度,。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
懸浮狀態(tài)下生長(zhǎng)的細(xì)胞,,可以通過(guò)向培養(yǎng)瓶中添加專用培養(yǎng)基來(lái)維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài),一般情況下細(xì)胞密度維持在1×105~1×106個(gè)/mL(不同細(xì)胞對(duì)密度要求不同,,)可以維持細(xì)胞的正常生長(zhǎng),。如需分瓶可以將細(xì)胞懸液收集到離心管中1000rpm,離心5min,,棄去上清,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的專用培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力,,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行,。
3) 細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。下面T25瓶為例,;
1. 細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過(guò)程收集消化好的細(xì)胞到離心管中,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),來(lái)決定細(xì)胞的凍存密度,。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個(gè)活細(xì)胞/ml.
2. 1000rpm離心3-5min,,去掉上清。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ,,按每1ml凍存液含1×106~1×107個(gè)活細(xì)胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中,,標(biāo)注好名稱、代數(shù),、日期等信息,。
3. 將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,,-80度冰箱中過(guò)夜,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存,。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用,。
注意事項(xiàng):
1. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,,并請(qǐng)注意防護(hù),,所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
2. 建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套,、衣服和戴上防護(hù)面罩,。注意:凍存管浸沒(méi)在液氮中會(huì)泄漏,并會(huì)慢慢充滿液氮,。解凍時(shí),,液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險(xiǎn)力吹掉其蓋子,從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害,。
WERI-RB-1人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞(STR鑒定)