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參考價(jià): | 面議 |
- BH0177 產(chǎn)品型號(hào)
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):36更新時(shí)間:2025-04-28 09:40:06
- 聯(lián)系人:
- 語純生物
- 電話:
- 手機(jī):
- 15316728970
- 地址:
- 遠(yuǎn)著大廈 八樓 1087
- 網(wǎng)址:
- www.ycswcell.com/
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10^6 |
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貨號(hào) | BH0177 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號(hào):BH0177
產(chǎn)品規(guī)格:1×10^6
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用,,不可用于臨床診斷或治療。
MM.1R人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞(STR鑒定)
細(xì)胞描述
該細(xì)胞系的母細(xì)胞株MM.1是從一位對(duì)類固醇療法產(chǎn)生抗藥性的多發(fā)性骨髓瘤患者的外周血中建立的,。MM.1R對(duì)地塞米松耐藥,。近緣細(xì)胞系MM.1S也是從MM.1中分離出來的,,但對(duì)地塞米松敏感。該細(xì)胞復(fù)蘇后需要兩周左右才能恢復(fù)正常生長(zhǎng),。
細(xì)胞特性
1) 來源:人,、女性、外周血
2) 形態(tài):成淋巴瘤細(xì)胞,,懸浮和輕微的貼壁同時(shí)存在
3) 含量:>1x106細(xì)胞數(shù)
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途:僅供科研使用,。
運(yùn)輸和保存:干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞:(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系,。(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作,。
細(xì)胞接收后的處理:
1)收到細(xì)胞后,,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細(xì)胞有污染,,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請(qǐng)?jiān)?/span>4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),,同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)半貼細(xì)胞和貼壁不牢(懸?。┘?xì)胞:T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱中約2-3h,,顯微鏡下觀察細(xì)胞的情況,若細(xì)胞密度在60%以下,,客戶需收集T25瓶中的懸浮細(xì)胞離心后用專用培養(yǎng)基重懸后打回到原培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng),,若細(xì)胞生長(zhǎng)70%-90%對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代,傳代時(shí)需要收集培養(yǎng)基中懸浮的細(xì)胞離心后回收,。
4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的專用培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 ,。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備1640(培養(yǎng)基,優(yōu)質(zhì)胎牛血清10 %,,P/S青霉素-鏈霉素 1%
2) 注意事項(xiàng):
a.該細(xì)胞同時(shí)存在懸浮生長(zhǎng)和輕微的貼壁狀態(tài)。
b.該細(xì)胞復(fù)蘇后需培養(yǎng)2周左右時(shí)間,,才能恢復(fù)正常生長(zhǎng)狀態(tài),。
c.細(xì)胞密度不可過高,在細(xì)胞匯合前進(jìn)行傳代,,過度融合生長(zhǎng)細(xì)胞容易產(chǎn)生死細(xì)胞團(tuán),。
3) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37攝氏度,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
4) 凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二. 細(xì)胞處理:
1)凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL專用培養(yǎng)基的離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,,專用培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml專用培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度,。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)70%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
該細(xì)胞為懸浮和輕微的貼壁細(xì)胞,,傳代可以參考以下方法:
該細(xì)胞是一種混合生長(zhǎng)的細(xì)胞,;細(xì)胞既可以以輕度附著的單層形式生長(zhǎng),,也可以以懸浮液形式生長(zhǎng)??梢酝ㄟ^添加新鮮培養(yǎng)基來維持培養(yǎng),。或者,,可以通過將貼壁細(xì)胞用細(xì)胞刮鏟刮入含有漂浮細(xì)胞的培養(yǎng)基中,,通過離心收集細(xì)胞,將細(xì)胞沉淀重懸于新鮮培養(yǎng)基中并分配到新的培養(yǎng)瓶中來對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代,。建議收貨后的第一次傳代密度為1:2進(jìn)行,。后續(xù)的傳代可根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:4的比例進(jìn)行。
3) 細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用,。下面T25瓶為例,;
1. 細(xì)胞凍存時(shí)按照細(xì)胞傳代的過程收集細(xì)胞到離心管中,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),,來決定細(xì)胞的凍存密度,。一般細(xì)胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個(gè)活細(xì)胞/ml.
2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清,。用配制好的細(xì)胞凍存液重懸細(xì)胞 ,,按每1ml凍存液含1×106~1×107個(gè)活細(xì)胞/ml分配到一個(gè)凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中,標(biāo)注好名稱,、代數(shù),、日期等信息。
3. 將要凍存的細(xì)胞置于程序降溫盒中,,-80度冰箱中過夜,,之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲(chǔ)存。同時(shí)記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用,。
注意事項(xiàng):
1. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),,所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。
2. 建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩,。注意:凍存管浸沒在液氮中會(huì)泄漏,,并會(huì)慢慢充滿液氮。解凍時(shí),,液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險(xiǎn)力吹掉其蓋子,,從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害。
MM.1R人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞(STR鑒定)