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上海語純生物科技有限公司
初級會員·1年BH0141人T淋巴細胞白血病細胞
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準- BH0141 產(chǎn)品型號
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：31更新時間：2025-04-28 09:35:24
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10^6 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BH0141 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號：BH0141
產(chǎn)品規(guī)格：1×10^6
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進一步生產(chǎn)使用,，不可用于臨床診斷或治療。
產(chǎn)品介紹
Jurkat（clone E6-1）人T淋巴細胞白血病細胞（STR鑒定）
細胞描述
人白血病T淋巴細胞,，Jurkat細胞由Schneider建立,，來源于一個14歲的男孩的外周血,。該克隆是 Jurkat-FHCRC細胞株的一個克隆（Jurkat的一個衍生株）,，經(jīng)佛波酯(phorbol esters)和外源凝集素（lectins）或抗T3單克隆抗體（需要兩種物質(zhì)共同誘導(dǎo)）誘導(dǎo)后可產(chǎn)生大量IL-2,。
細胞特性
1） 來源：T淋巴細胞；急性T細胞白血病
2） 形態(tài)：淋巴母細胞,懸浮生長
3） 含量：>1x106細胞數(shù)
4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途：僅供科研使用,。
運輸和保存：干冰運輸及復(fù)蘇好存活細胞：（1）1mL凍存管包裝干冰運輸,，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系,。（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨，收到后按照細胞接收后的處理方法操作,。
細胞接收后的處理：
1） 收到細胞后,，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細胞有污染,，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),，同時給剛收到的細胞拍照（10×,，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù),。
3） 懸浮細胞：T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，然后抽出瓶中的培養(yǎng)基和細胞1000rpm離心5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中（加入按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的專用培養(yǎng)基）,。
4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞,，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的專用培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 ,。
細胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備 1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基 87%
優(yōu)質(zhì)胎牛血清 10%
GlutaMAX-1谷氨酰胺 1%
Sodium Pyruvate丙酮酸鈉 1%
P/S青霉素-鏈霉素 1%
參考傳代周期：
不超過300萬細胞/ mL,，建議將活細胞密度控制在10萬-100萬/ mL之間參考傳代密度：10萬活細胞/ mL,參考換液頻率：2-3天。
注意：
a）該細胞為懸浮細胞,，根據(jù)培養(yǎng)經(jīng)驗以及客戶的反饋,，傳代時使用【半換液法】對細胞狀態(tài)有利，因此我?guī)旖ㄗh您使用【半換液法】進行傳代,。同時,，您在收到細胞后,，請不要通過離心的方式收集細胞，可以直接向培養(yǎng)瓶中添加等體積的新鮮培養(yǎng)液,，然后將細胞吹打均勻后移入兩個新的T25培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)即可,。
b）該細胞對血清質(zhì)量較為敏感，建議您使用進口品牌優(yōu)質(zhì)血清進行培養(yǎng),，
培養(yǎng),，傳代時請注意保持細胞密度在合適的范圍,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二． 細胞處理：
1） 凍存細胞的復(fù)蘇：：
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL專用培養(yǎng)基的離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心3-5min,，棄去上清液,，專用培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml專用培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜,。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度,。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
懸浮狀態(tài)下生長的細胞,，可以通過向培養(yǎng)瓶中添加專用培養(yǎng)基來維持細胞的生長狀態(tài),，一般情況下細胞密度維持在1×105~1×106個/mL（不同細胞對密度要求不同，）可以維持細胞的正常生長。如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm,，離心5min,，棄去上清，補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中,，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的專用培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3） 細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用,。下面T25瓶為例,；
1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù),，來決定細胞的凍存密度,。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.
2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清,。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,，按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱,、代數(shù),、日期等信息。
3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,，-80度冰箱中過夜,，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用,。
注意事項：
1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,，并請注意防護,，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
2. 建議在復(fù)蘇凍存細胞時始終使用防護手套,、衣服和戴上防護面罩,。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮,。解凍時,，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害,。
Jurkat（clone E6-1）人T淋巴細胞白血病細胞（STR鑒定）
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