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CC96111Rosetta (DE3)pLacl 感受態(tài)
參考價(jià): | 面議 |
- CC96111 產(chǎn)品型號(hào)
- 語(yǔ)純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):30更新時(shí)間:2025-04-23 12:51:38
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- 聯(lián)系人:
- 語(yǔ)純生物
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- 15316728970
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- 遠(yuǎn)著大廈 八樓 1087
- 網(wǎng)址:
- www.ycswcell.com/
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul/100×100ul |
---|---|---|---|
貨號(hào) | CC96111 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號(hào):CC96111
產(chǎn)品規(guī)格:10 ×100ul/100×100ul
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用,,不可用于臨床診斷或治療,。
產(chǎn)品介紹
Rosetta (DE3)pLacl 感受態(tài)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Rosetta(DE3) pLacI 菌株具有氯霉素抗性,,補(bǔ)充大腸桿菌缺乏的 6 種稀有密碼子(AUA, AGG, AGA,
CUA, CCC, GGA)對(duì)應(yīng)的 tRNA,,提高外源基因(特別是真核基因)在原核系統(tǒng)中的表達(dá)水平。該
菌株的染色體上整合了 λ 噬菌體 DE3 區(qū)(DE3 區(qū)含有 T7 噬菌體 RNA 聚合酶),,可同時(shí)表達(dá) T7
RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶,因此可用于 pET 系列,,pGEX,,pMAL 等質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。
此外,,該菌株攜帶了氯霉素抗性質(zhì)粒 pLacIRARE,,能夠額外表達(dá) lac 轉(zhuǎn)錄抑制蛋白,可以抑制目的
基因的本底表達(dá)水平,。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測(cè),,Rosetta(DE3) pLacI感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107
cfu/μg DNA 以上。
產(chǎn)品組成
組分
Rosetta(DE3) pLacI
感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm (DE3) pLacIRARE (CamR)
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存,請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存,。
質(zhì)量控制
除 pLacIRARE 質(zhì)粒外,,無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA,。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,,輕輕彈勻,,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,,不要晃動(dòng),,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min,;
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),,后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,,用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用,;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10,;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,,僅用手指輕彈即可,;
4. 為確保高轉(zhuǎn)化效率,整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫,,并且要盡量輕柔,。
Rosetta (DE3)pLacl 感受態(tài)
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