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CC96146Rosetta-gami B 感受態(tài)
參考價: | 面議 |
- CC96146 產(chǎn)品型號
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):34更新時間:2025-04-23 12:30:55
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產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul/100×100ul |
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貨號 | CC96146 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號:CC96146
產(chǎn)品規(guī)格:10 ×100ul/100×100ul
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進一步生產(chǎn)使用,不可用于臨床診斷或治療,。
產(chǎn)品介紹
Rosetta-gami B 感受態(tài)
產(chǎn)品簡介
Rosetta-gami B 系列菌株來源于 Origami B 系列菌株,,是集合了 BL21 系列,Rosetta 系列菌株和
Origami 系列菌株的優(yōu)點,,極大的增強了細胞內(nèi)二硫鍵的形成和含有在大腸桿菌中稀有密碼子的真
核細胞蛋白的表達能力,。Rosetta-gami B系列菌株是來源于 Origami B系列菌株,攜帶有TrxB和Gor
基因突變,,提高含二硫鍵正確折疊 蛋白的高效表達,。本菌株含有 pRARE 質(zhì)粒,能夠提供原
Rosetta(DE3)宿主菌含有 的 AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六個稀有密碼子的 tRNA 外,,增
加了真核細胞的在大腸桿菌中的蛋白表達水平,。在 thioredoxin reductase (trxB)和 glutathione reductase
(gor)基因上同時含有突變,這使得該菌株能夠更加高效的在細胞質(zhì)內(nèi)生成二硫鍵,,有助于含二硫
鍵蛋白的活性蛋白形成,。TrxB 和 Gor 基因突變使得質(zhì)粒能夠分別具有卡那和四環(huán)素抗性,所以本
菌株無法用于卡那和四環(huán)素抗性質(zhì)粒的蛋白表達,。Rosetta-gami B感受態(tài)細胞來源于含有 BL21系列
菌株中的 lacZY 基因突變,,能夠通過 IPTG 高效控制目的基因的表達。Rosetta-gami B 感受態(tài)細胞能
夠用于氨芐抗性和壯觀霉素抗性質(zhì)粒的原核表達,。Rosetta-gami B 感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作,,
pUC18 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>108 cfu/μg DNA,。
產(chǎn)品組成
組分
Rosetta-gami B
感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm lacY1 ahpC gor522::Tn10 trxB pRARE (CamR , KanR , TetR)
存儲條件
-80 ℃保存,;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留,;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA,。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中,,輕輕彈勻,,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,,不要晃動,,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min,;
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),,然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜,。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細胞體積的 1/10,;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,,不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞,僅用手指輕彈即可,;
4. 為確保高轉(zhuǎn)化效率,,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔,。
Rosetta-gami B 感受態(tài)
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