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上海語(yǔ)純生物科技有限公司
初級(jí)會(huì)員·1年CC96118Rosetta-gami B (DE3)感受態(tài)
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- CC96118 產(chǎn)品型號(hào)
- 語(yǔ)純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
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訪(fǎng)問(wèn)次數(shù)：55更新時(shí)間：2025-04-23 12:29:32
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul/100×100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | CC96118 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號(hào)：CC96118
產(chǎn)品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用，不可用于臨床診斷或治療,。
產(chǎn)品介紹
Rosetta-gami B (DE3)感受態(tài)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
Rosetta-gami B 系列菌株來(lái)源于 Origami B 系列菌株,，是集合了 BL21 系列、Rosetta 系列菌株和
Origami 系列菌株的優(yōu)點(diǎn),，極大的增強(qiáng)了細(xì)胞內(nèi)二硫鍵的形成和含有在大腸桿菌中稀有密碼子的真
核細(xì)胞蛋白的表達(dá)能力,。本菌株含有 pRARE 質(zhì)粒，能夠提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有的 AUA,
AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六個(gè)稀有密碼子的 tRNA,，增加了真核細(xì)胞的在大腸桿菌中的蛋白
表達(dá)水平,。在 thioredoxin reductase (trxB)和 glutathione reductase (gor)基因上同時(shí)含有突變，這使得
該菌株能夠更加高效地在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)生成二硫鍵,，有助于表達(dá)含二硫鍵的活性蛋白,。pRARE 質(zhì)粒帶
有氯霉素抗性，同時(shí)基因 trxB 和 gor 的突變使得該菌株具備了卡那和四環(huán)素抗性，所以本菌株無(wú)法
用于含氯霉素,、卡那和四環(huán)素抗性質(zhì)粒的蛋白表達(dá),。Rosetta-gami B(DE3)系列菌株是來(lái)源于
Origami B 系列菌株，其中 DE3 是溶源性的 λDE3, 所以帶有 T7 RNA 聚合酶的染色體拷貝,。該菌株
適用于 pET 系列載體,，及其他 T7 啟動(dòng)子系列載體。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測(cè),，Rosetta-gami B(DE3)
感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA,。
產(chǎn)品組成
組分
Rosetta-gami B(DE3)
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F– ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522::Tn10 trxB pRARE (CamR, KanR, TetR)
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存；請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存,。
質(zhì)量控制
除 pRARE 質(zhì)粒外,，無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留；
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA,。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,，置于冰浴中融化；
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,，輕輕彈勻,，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,，不要晃動(dòng),，熱激 90s 后，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min,；
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱）,，后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,，用無(wú)菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過(guò)夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用,；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10,；
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,，僅用手指輕彈即可,；
4. 為確保高轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過(guò)程中除熱激外均要保持低溫,，并且要盡量輕柔,。
Rosetta-gami B (DE3)感受態(tài)
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