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上海語純生物科技有限公司
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產品簡介
| 供貨周期 | 現貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul/100×100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號 | CC96119 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥/生物制藥 |
產品貨號：CC96119
產品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul
本產品僅供科學研究或進一步生產使用，不可用于臨床診斷或治療,。
產品介紹
Rosetta-gamim B (DE3)pLacl 感受態(tài)
產品簡介
Rosetta-gami B 系列菌株來源于 Origami B 系列菌株,，是集合了 BL21 系列、Rosetta 系列和 Origami
系列菌株的優(yōu)點,。菌株含有 pLacIRARE 質粒，能夠提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有的 AUA, AGG,
AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六個稀有密碼子的 tRNA，提高了真核細胞蛋白在大腸桿菌中的表達水
平,。在 thioredoxin reductase (trxB)和 glutathione reductase (gor)基因上同時含有突變，這使得該菌株
能夠更加高效地在細胞質內生成二硫鍵,，有助于表達含二硫鍵的活性蛋白,。菌株帶有氯霉素、卡
那和四環(huán)素抗性,，無法用于轉化含這些抗性的質粒,。Rosetta-gami B(DE3)系列菌株含有溶源的
λDE3，可以表達 T7 RNA 聚合酶,，適用于 pET 系列載體及其他 T7 啟動子系列載體,。此外，
pLacIRARE 質粒能夠額外表達 lac 轉錄抑制蛋白,，從而抑制了 lac 啟動子的本底表達水平,。
pLacIRARE 質粒的起始復制位點是 p15 Origin, 這使得該質粒能夠和 pUC-及 pBR322-衍生的質粒互
相共存,。經 pUC18 質粒轉化檢測,，Rosetta-gami B(DE3)感受態(tài)細胞的轉化效率可達 107 cfu/μg DNA
以上。
產品組成
組分
Rosetta-gami B (DE3) pLacI
化學感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：F- ompT hsdSB (rB-mB-) gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522::Tn10 trxB pLacIRARE (CamR, KanR, TetR)
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存,。
質量控制
除 pLacIRARE 質粒外,，無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥107 cfu/μg pUC18 DNA,。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中,，輕輕彈勻,，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,，不要晃動,，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min,；
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預熱）,，后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；
5. 取不同體積的轉化產物,，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰水浴中解凍后應立即使用,；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10,；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞,，僅用手指輕彈即可,；
4. 為確保高轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,，并且要盡量輕柔,。
Rosetta-gamim B (DE3)pLacl 感受態(tài)
