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上海語純生物科技有限公司
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產品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul/100×100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號 | CC96172 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥/生物制藥 |
產品貨號：CC96172
產品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul
本產品僅供科學研究或進一步生產使用，不可用于臨床診斷或治療,。
產品介紹
T7 Express lysY/Iq感受態(tài)
產品簡介
T7 Express LysY/Iq 菌株適合于高效轉化和蛋白表達的化學活性大腸桿菌細胞,。laclq 對表達的嚴格
控制允許克隆潛在毒性基因,，溶菌酶控制 T7 RNA 聚合酶可以表達毒性基因，LysY 是 T7 溶菌酶的
一個變體,，缺乏任何酰胺酶活性,，因此細胞在誘導過程中對裂解不太敏感。溶菌酶/lacIq 質粒的維
持不需要抗生素選擇,，缺乏蛋白酶 Lon 和 OmpT,。抗噬菌體 T1（fhuA2）,。不限制甲基化
DNA(McrA-,、McrBC-、EcoBr-m-,、Mrr-)。經 pUC18 質粒轉化檢測,，T7 Express LysY/Iq 感受態(tài)細
胞的轉化效率可達 108 cfu/μg DNA,。
產品組成
組分
T7 Express LysY/Iq
化學感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：MiniF lysY lacIq (CamR) / fhuA2 lacZ::T7 gene1 [lon] ompT gal sulA11 R(mcr-73::mini Tn10--TetS )2 [dcm] R(zgb-
210::Tn10--TetS) endA1 Δ(mcrC-mrr) 114::IS10
存儲條件
-80 ℃保存,；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
除 pRARE 外,，無外源質粒 DNA 殘留,；
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,，置于冰浴中融化,；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻,，冰上孵育 30 min,；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動,，熱激 90s 后,，立刻置于冰浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預熱）,，后置于 37 ℃搖床復壯 45 min,；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜,。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10,；
3. 加入待轉化 DNA 后,，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可,；
4. 為確保高轉化效率,，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔,。
T7 Express lysY/Iq感受態(tài)
