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初級(jí)會(huì)員·1年BH3434MN9D 小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞
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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- BH3434 產(chǎn)品型號(hào)
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10^6 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | BH3434 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號(hào)：BH3434
產(chǎn)品規(guī)格：1×10^6
N18TG2與來(lái)自14日齡C57BL / 6J小鼠胚胎的喙中腦神經(jīng)元融合而建立的細(xì)胞,。是一種永生化的含多巴胺的神經(jīng)元雜交細(xì)胞系。當(dāng)MN9D細(xì)胞與視頂（一個(gè)不接受多巴胺能神經(jīng)支配的大腦區(qū)域）的原代胚胎細(xì)胞共聚時(shí),，它們的多巴胺含量,，酪氨酸羥化酶免疫反應(yīng)性和酪氨酸羥化酶mRNA顯著降低。
產(chǎn)品介紹
MN9D 小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞
細(xì)胞介紹
N18TG2與來(lái)自14日齡C57BL / 6J小鼠胚胎的喙中腦神經(jīng)元融合而建立的細(xì)胞,。是一種永生化的含多巴胺的神經(jīng)元雜交細(xì)胞系,。當(dāng)MN9D細(xì)胞與視頂（一個(gè)不接受多巴胺能神經(jīng)支配的大腦區(qū)域）的原代胚胎細(xì)胞共聚時(shí)，它們的多巴胺含量,，酪氨酸羥化酶免疫反應(yīng)性和酪氨酸羥化酶mRNA顯著降低,。通過(guò)與胚胎丘腦的細(xì)胞共聚集產(chǎn)生了多巴胺含量的類似降低，胚胎丘腦是另一個(gè)沒(méi)有多巴胺能神經(jīng)支配的大腦區(qū)域,。MN9D細(xì)胞與來(lái)自紋狀體或皮層的多巴胺感受細(xì)胞的共聚集對(duì)MN9D細(xì)胞的多巴胺含量沒(méi)有明顯的刺激作用,。視頂細(xì)胞產(chǎn)生的MN9D多巴胺含量的降低并沒(méi)有通過(guò)添加紋狀體細(xì)胞來(lái)逆轉(zhuǎn),。因此，MN9D雜交細(xì)胞能夠?qū)?lái)自大腦區(qū)域的細(xì)胞的抑制因子做出反應(yīng),，這些細(xì)胞不是多巴胺能神經(jīng)元的靶標(biāo),。產(chǎn)生兒茶酚胺的PC12細(xì)胞沒(méi)有以類似的方式反應(yīng)，這表明MN9D細(xì)胞的反應(yīng)是其中腦起源的功能,。鑒于MN9D細(xì)胞對(duì)不同腦細(xì)胞群的選擇性反應(yīng),，這種雜交細(xì)胞系應(yīng)有助于研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的細(xì)胞 - 細(xì)胞相互作用，這些相互作用可能參與神經(jīng)遞質(zhì)表型的表達(dá)和特定神經(jīng)元連接的建立,。
1）形態(tài)：上皮細(xì)胞樣,，貼壁生長(zhǎng)
2） 含量：>1x10^6 細(xì)胞數(shù)
4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途：僅供科研使用。
運(yùn)輸和保存
干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞
（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,，收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細(xì)胞有污染,，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。
（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作,。
細(xì)胞接收后的處理
1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們,。
2）請(qǐng)?jiān)?/span>4或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù),。
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況,，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況,。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上,，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理,。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞,。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備
1）準(zhǔn)備1640培養(yǎng)基,，優(yōu)質(zhì)胎牛血清10%,；P/S 1%.
培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%。 溫度：37攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二．細(xì)胞處理：
1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心3-5min,，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間）,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化,。
3.輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行,。
3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用,。
MN9D 小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞
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