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上海語純生物科技有限公司
初級會員·1年BH3481A549/DDP 人肺癌順鉑耐藥株
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準- BH3481 產(chǎn)品型號
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：64更新時間：2025-03-11 09:43:59
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10^6 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BH3481 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號：BH3481
產(chǎn)品規(guī)格：1×10^6
該細胞系是 1972 年由 GiardDJ 通過肺癌組織移植培養(yǎng)建系的,，源自一位 58 歲的白人男性身上切除的肺腫瘤移植而來,；細胞在文獻中被描述為在 athmyic 小鼠中誘導(dǎo)腫瘤并合成卵磷脂。A549能通過胞苷二磷脂酰膽堿途徑合成富含不飽和脂肪酸的卵磷脂,；角蛋白陽性,。該細胞復(fù)蘇后不耐低溫和長時間運輸，復(fù)蘇后沿途最
產(chǎn)品介紹
A549/DDP 人肺癌順鉑耐藥株
細胞介紹
該細胞系是 1972 年由 GiardDJ 通過肺癌組織移植培養(yǎng)建系的,，源自一位 58 歲的白人男性身上切除的肺腫瘤移植而來,；細胞在文獻中被描述為在 athmyic 小鼠中誘導(dǎo)腫瘤并合成卵磷脂,。A549能通過胞苷二磷脂酰膽堿途徑合成富含不飽和脂肪酸的卵磷脂；角蛋白陽性,。該細胞復(fù)蘇后不耐低溫和長時間運輸,，復(fù)蘇后沿途低溫度需高于 10 攝氏度且運輸路途不可過長。冬天常溫郵寄A549 細胞時會有細胞脫落,、壞死等現(xiàn)象,，請盡量選用干冰冷鏈快遞。這是一種亞三倍體人類細胞系,，模態(tài)染色體數(shù)為 66,，存在于 24% 的細胞中。具有 64 (22%),、65 和 67 條染色體計數(shù)的細胞也以相對較高的頻率出現(xiàn),；具有較高倍性的比率低至 0.4%。在所有細胞中都有 6 個標記以單拷貝形式存在,。它們包括 der(6)t(1;6) (q11;q27); ?del(6) (p23); del(11) (q21),、del(2) (q11)、M4 和M5,。大多數(shù)細胞有兩條 X 和兩條 Y 染色體,。然而，在分析的 50 個細胞中有 40% 丟失了一條或兩條 Y 染色體,。N2 和 N6 染色體每個細胞有一個拷貝,；N12 和 N17 通常有 4 個副本
細胞特性
1） 來源：肺
2） 形態(tài)：上皮細胞樣；貼壁生長
3） 含量：>1x106細胞數(shù)
4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
5）用途：僅供科研使用,。
運輸和保存：干冰運輸及復(fù)蘇好存活細胞：（1）1mL凍存管包裝干冰運輸,，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈,、凍存管瓶蓋脫落,、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系,。（2）T25瓶復(fù)蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,，收到后按照細胞接收后的處理方法操作。
細胞接收后的處理：
1）收到細胞后,，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,，請拍照后及時聯(lián)系我們,。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù),。
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況,。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收,，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,，可以對細胞進行傳代處理,。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收,。
4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞,，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 ,。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備 F-12K培養(yǎng)基,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,；1%-alanyl-L-glutamine,；p/s
雙抗，1%,。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%。 溫度：37 攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為 70%-80%,。
細胞處理：
1） 凍存細胞的復(fù)蘇：：
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心3-5min,，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細胞,。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過夜,。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL,，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間）,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化,。
3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中,，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用,。下面T25瓶為例,；
1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數(shù)板計數(shù),，來決定細胞的凍存密度,。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.
2. 1000rpm離心3-5min，去掉上清,。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,，按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱,、代數(shù),、日期等信息。
3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,，-80度冰箱中過夜,，之后轉(zhuǎn)入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續(xù)查閱和使用,。
注意事項：
1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護,，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄,。
2. 建議在復(fù)蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩,。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏,，并會慢慢充滿液氮,。解凍時，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害,。細胞介紹
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