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上海語(yǔ)純生物科技有限公司
初級(jí)會(huì)員·1年BH3485人子宮內(nèi)膜異位癥上皮細(xì)胞-12Z
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- BH3485 產(chǎn)品型號(hào)
- 語(yǔ)純生物 品牌
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訪問次數(shù)：64更新時(shí)間：2025-03-11 09:25:00
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10^6 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | BH3485 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號(hào)：BH3485
產(chǎn)品規(guī)格：1×10^6
細(xì)胞名稱：人子宮內(nèi)膜異位癥上皮細(xì)胞-12Z
種屬來源：人
組織來源：子宮
細(xì)胞形態(tài)：上皮樣
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)基:：D/F12+10%FBS+PS
產(chǎn)品介紹
人子宮內(nèi)膜異位癥上皮細(xì)胞-12Z
產(chǎn)品基本信息
細(xì)胞名稱：人子宮內(nèi)膜異位癥上皮細(xì)胞-12Z
種屬來源：人
組織來源：子宮
細(xì)胞形態(tài)：上皮樣
生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)基:：D/F12+10%FBS+PS
生長(zhǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37 攝氏度,，培養(yǎng)箱濕度為 70%-80%。
細(xì)胞信息：永生化人類子宮內(nèi)膜異位細(xì)胞系 （12Z） 是通過感染一名接受腹腔鏡檢查的 37 歲女性的 SV40 病毒獲得的細(xì)
胞產(chǎn)生的,。該細(xì)胞系表現(xiàn)出體內(nèi)可見的子宮內(nèi)膜異位癥病變標(biāo)志物的表達(dá),。永生化人子宮內(nèi)膜異位細(xì)胞系 （12Z）
可用于表征和鑒定與子宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)的基因和/或標(biāo)志物。
細(xì)胞培養(yǎng)操作
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1 mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 4 mL 培養(yǎng)基混合均勻,。在 1000 rpm 條件下離心 3 min，棄去上清液,，加 1-2 mL 培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm 皿中，加入約4 mL
培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
a、棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
b,、加 1 mL 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2 min（視細(xì)胞情況而定）,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加 2-3ml 培養(yǎng)基終止消化,。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,，1000 rpm 離心 5 min，棄去上清液,，補(bǔ)加 1-2 mL 培養(yǎng)液后吹勻。
c,、將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8 mL 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面 T25 瓶為例；
a,、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,，裝入無菌離心管中，1000 rpm 條件下離心 4 min,，棄去上清液,，用PBS 清洗一遍，棄盡 PBS,，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù),。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,，使細(xì)胞密度 5×106~1×107/mL,，輕輕混勻，每支凍存管凍存 1mL 細(xì)胞懸液,，注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,，24 h 后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。
培養(yǎng)注意事項(xiàng)
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞si亡破碎形成碎片,，是正?，F(xiàn)象。.觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h,。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,，棄上清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,，，用新鮮的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng),。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流,。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,，告知細(xì)胞的具體情況,，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用,。
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 ,。
9. 注意： 1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿,。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。
人子宮內(nèi)膜異位癥上皮細(xì)胞-12Z
