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上海語純生物科技有限公司
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產品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10^6 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | BH3485 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥/生物制藥 |
產品貨號：BH3485
產品規(guī)格：1×10^6
細胞名稱：人子宮內膜異位癥上皮細胞-12Z
種屬來源：人
組織來源：子宮
細胞形態(tài)：上皮樣
生長特性：貼壁生長
培養(yǎng)基:：D/F12+10%FBS+PS
產品介紹
人子宮內膜異位癥上皮細胞-12Z
產品基本信息
細胞名稱：人子宮內膜異位癥上皮細胞-12Z
種屬來源：人
組織來源：子宮
細胞形態(tài)：上皮樣
生長特性：貼壁生長
培養(yǎng)基:：D/F12+10%FBS+PS
生長條件：氣相：空氣，95%,；二氧化碳,，5%,。 溫度：37 攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為 70%-80%,。
細胞信息：永生化人類子宮內膜異位細胞系 （12Z） 是通過感染一名接受腹腔鏡檢查的 37 歲女性的 SV40 病毒獲得的細
胞產生的,。該細胞系表現(xiàn)出體內可見的子宮內膜異位癥病變標志物的表達。永生化人子宮內膜異位細胞系 （12Z）
可用于表征和鑒定與子宮內膜異位癥相關的基因和/或標志物,。
細胞培養(yǎng)操作
1）復蘇細胞：將含有 1 mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加 4 mL 培養(yǎng)基混合均勻。在 1000 rpm 條件下離心 3 min,，棄去上清液,，加 1-2 mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6 cm 皿中，加入約4 mL
培養(yǎng)基,，培養(yǎng)過夜）,。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。
a、棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
b,、加 1 mL 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中消化 1-2 min（視細胞情況而定）,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加 2-3ml 培養(yǎng)基終止消化,。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm 離心 5 min,，棄去上清液,，補加 1-2 mL 培養(yǎng)液后吹勻。
c,、將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8 mL 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存,。下面 T25 瓶為例；
a,、收集細胞及細胞培養(yǎng)液,，裝入無菌離心管中，1000 rpm 條件下離心 4 min,，棄去上清液,，用PBS 清洗一遍，棄盡 PBS,，進行細胞計數(shù),。
b、根據細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液,，使細胞密度 5×106~1×107/mL,，輕輕混勻,，每支凍存管凍存 1mL 細胞懸液，注意凍存管做好標識,。
c、將凍存管放入-80℃冰箱,，24 h 后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。
培養(yǎng)注意事項
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系,。
2. 仔細閱讀細胞說明書,，了解細胞相關信息，如細胞形態(tài),、所用培養(yǎng)基,、血清比例、所需細胞因子等,，確保細胞培養(yǎng)條件一致,，若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔,。
3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰撞si亡破碎形成碎片,，是正常現(xiàn)象,。.觀察好細胞狀態(tài)后,，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化,，懸浮細胞直接混勻收集細胞,，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上清,。加 5 mL PBS 重懸細胞,，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，,，用新鮮的培養(yǎng)基重懸細胞,，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng),。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng),。
6. 建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術部溝通交流,。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系,，告知細胞的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用,。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞,，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 ,。
9. 注意： 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿,。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
人子宮內膜異位癥上皮細胞-12Z
