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靈活的規(guī)格,，只需更少的一抗用量,，重復性更好的結(jié)果

Invitrogen™ iBind™ Flex蛋白質(zhì)免疫印跡處理系統(tǒng)采用靈活的印跡處理方法，可助您顯著縮短操作時間,，檢測不同規(guī)格的印跡膜,，并輕松優(yōu)化抗體用量。該系統(tǒng)利用 順序側(cè)流技術, （毛細管作用的一種簡單形式）,，可自動化完成Western Blot實驗中所有的抗體孵育和洗滌步驟,，您只需將一抗、二抗溶液和洗滌緩沖液加入到設備中,，設備即可自動進行相關操作,。在3小時內(nèi)，就能得到可立即用于最終檢測的印跡膜,。iBind Flex蛋白質(zhì)免疫印跡處理系統(tǒng)在帶來靈活的解決方案的同時,，也兼顧了自動化的便捷性。

• 靈活性—可處理1張中型印跡膜,、2張微型印跡膜或6張垂直剪切膜條,，并可在一次實驗的不同膜上采用不同的抗體
• 兼容性—可使用硝酸纖維素膜或PVDF膜，可用直接標記的一抗或二抗進行檢測（AP、HRP或熒光標記）
• 節(jié)約成本—用于蛋白質(zhì)免疫印跡時,，比傳統(tǒng)孵育方式最多可節(jié)省80%的一抗

只需更少的一抗,，就能獲得更好的蛋白質(zhì)免疫印跡結(jié)果。對比手動處理（在孵育盒中進行孵育和洗滌步驟）和Invitrogen™ iBind™ Flex系統(tǒng)處理的蛋白質(zhì)免疫印跡,。使用Bolt™ 4-12%,、10孔凝膠和MES SDS電泳緩沖液分離樣本，隨后,，使用iBlot™ 2干轉(zhuǎn)系統(tǒng)轉(zhuǎn)印至硝酸纖維素膜上,。每塊凝膠具有10個泳道，樣本為2倍梯度稀釋的293細胞提取物（30 µg-0.06 µg）,。使用下述條件進行抗體孵育和洗滌后,，將印跡膜浸在Thermo Scientific™ SuperSignal™ West Dura底物中孵育5分鐘，并使用成像系統(tǒng)顯色,。

• MEK2 (45 kDa)——兔抗MEK2抗體,，按1:1000 稀釋（用于iBind系統(tǒng)：將2µL抗體溶于2mL iBind溶液中，用于手動孵育盒操作時,，將10µL抗體溶于10mL 緩沖液中）,。
• Securin(428 kDa)——兔抗Securin抗體，按1:1000 稀釋（用于iBind系統(tǒng)：將2µL抗體溶于2mL iBind溶液中,，用于手動孵育盒操作時,，將10µL抗體溶于10mL 緩沖液中）。
• 二抗：山羊抗兔IgG,，使用iBind系統(tǒng),，按1:600稀釋（3.33 µL抗體溶于2mL iBind溶液中），用于手動孵育盒操作時,，按1:1800稀釋（將5.55 µL抗體溶于10mL iBind溶液中）,。

使用垂直剪切膜條和熒光檢測都獲得了出眾的蛋白質(zhì)免疫印跡結(jié)果,。 對比手動處理（在孵育盒中進行孵育和洗滌步驟）和Invitrogen™ iBind™ Flex蛋白質(zhì)免疫印跡處理系統(tǒng)處理的印跡膜,。使用Bolt™ 4-12%、10孔凝膠和MES SDS電泳緩沖液分離樣本,，隨后,，使用iBlot™ 2干轉(zhuǎn)系統(tǒng)轉(zhuǎn)印至硝酸纖維素膜上，將每張印跡膜剪切成3泳道膜條,。最后,，使用成像儀進行成像。

樣本和泳道如下所示：

• 泳道 1:  Thermo Scientific™ PageRuler™預染NIR蛋白分子量標記(3 µL)
• 膜條 1:  磷酸化Akt提取物（15 µg,、7.5 µg,、3.75 µg）和Elk-1融合蛋白（150 ng、75 ng、37.5 ng）
• 膜條 2:  HeLa細胞提取物（30 µg,、15 µg,、7.5 µg）
• 膜條 3:  磷酸化Akt提取物（15 µg、7.5 µg,、3.75 µg）
• 膜條 4:  Elk-1融合蛋白（150 ng,、75 ng、37.5 ng）
• 膜條 5:  HeLa細胞提取物（30 µg,、15 µg,、7.5 µg）
• 膜條 6:  HeLa細胞提取物（30 µg、15 µg,、7.5 µg）