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實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀
| 參考價(jià): | ￥ 128000 |
| 訂貨量: | 1件 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 產(chǎn)品型號(hào)
- Thermofisher Scientific/賽默飛世爾 品牌
- 代理商 廠商性質(zhì)
- 杭州市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：407更新時(shí)間：2024-09-11 17:17:40
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 產(chǎn)地類別 | 進(jìn)口 | 價(jià)格區(qū)間 | 7萬(wàn)-10萬(wàn) |
|---|---|---|---|
| 儀器種類 | 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,生物產(chǎn)業(yè),石油,制藥,綜合 |
產(chǎn)品介紹
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Polymerase Chain Reaction,，聚合酶鏈反應(yīng)）儀是一種高度精確的實(shí)驗(yàn)設(shè)備，用于在PCR過(guò)程中實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和定量目標(biāo)DNA或RNA的濃度,。與傳統(tǒng)的PCR儀器不同,，實(shí)時(shí)熒光定量 PCR儀通過(guò)檢測(cè)PCR反應(yīng)中的熒光信號(hào)變化,，實(shí)現(xiàn)了對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物的動(dòng)態(tài)監(jiān)控，從而提供了高靈敏度,、高準(zhǔn)確度的定量分析能力,。這種技術(shù)廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)研究,、遺傳變異分析,、病原體檢測(cè)和許多其他生命科學(xué)領(lǐng)域。
一,、實(shí)時(shí)熒光定量PCR的基本原理
1.1 PCR技術(shù)概述
PCR技術(shù)是一種用于擴(kuò)增特定DNA序列的方法,。其基本過(guò)程包括三個(gè)主要步驟：變性（Denaturation）、退火（Annealing）和延伸（Extension）,。在這些步驟中,，目標(biāo)DNA被分解成單鏈，然后特異性引物與目標(biāo)序列結(jié)合,，再由DNA聚合酶延伸新的DNA鏈,，從而復(fù)制出大量的目標(biāo)DNA片段。
1.2 實(shí)時(shí)熒光定量的創(chuàng)新
傳統(tǒng)PCR技術(shù)只能在反應(yīng)結(jié)束后進(jìn)行產(chǎn)物分析,，而實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)則在PCR反應(yīng)的每一個(gè)周期中實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)的變化,。這是通過(guò)使用特定的熒光染料或探針實(shí)現(xiàn)的：
熒光染料（如SYBR® Green）：這些染料能夠結(jié)合雙鏈DNA，并在結(jié)合后發(fā)出熒光信號(hào),。熒光信號(hào)的強(qiáng)度與DNA的量成正比,，因此可以通過(guò)測(cè)量熒光強(qiáng)度來(lái)推算DNA的濃度。
探針技術(shù)（如TaqMan®探針）：這些探針是標(biāo)記了熒光染料的特異性探針,，它們?cè)赑CR反應(yīng)過(guò)程中與目標(biāo)DNA序列結(jié)合,，并在結(jié)合后釋放熒光信號(hào)。探針的使用提高了特異性和靈敏度,。
二,、實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀的核心組件
2.1 光學(xué)系統(tǒng)
實(shí)時(shí)熒光定量 PCR儀的核心組件之一是其光學(xué)系統(tǒng)。該系統(tǒng)包括光源,、濾光片和探測(cè)器,。光源用于激發(fā)熒光染料或探針，濾光片則選擇性地分離激發(fā)光和發(fā)射光,。探測(cè)器捕捉發(fā)射光并將其轉(zhuǎn)化為電子信號(hào),，從而測(cè)量熒光強(qiáng)度。這些組件的質(zhì)量和性能直接影響到熒光信號(hào)的靈敏度和準(zhǔn)確性,。
2.2 熱循環(huán)模塊
熱循環(huán)模塊負(fù)責(zé)控制PCR反應(yīng)中的溫度變化,。PCR過(guò)程通常包括變性、退火和延伸三個(gè)步驟,，每個(gè)步驟都有特定的溫度設(shè)置,。高效的熱循環(huán)模塊需要快速且均勻地加熱和冷卻,，以確保PCR反應(yīng)的準(zhǔn)確性和一致性。現(xiàn)代PCR儀通常具有快速升溫和降溫的能力,，以縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間并提高效率,。
2.3 軟件系統(tǒng)
實(shí)時(shí)熒光定量 PCR儀配備了功能強(qiáng)大的數(shù)據(jù)分析軟件。該軟件用于設(shè)置實(shí)驗(yàn)參數(shù),、監(jiān)控實(shí)時(shí)數(shù)據(jù),、分析結(jié)果和生成報(bào)告。軟件功能包括標(biāo)準(zhǔn)曲線生成,、數(shù)據(jù)歸一化,、相對(duì)定量和絕對(duì)定量分析等。直觀的用戶界面和高級(jí)的數(shù)據(jù)分析功能使得操作更加簡(jiǎn)便,，數(shù)據(jù)解釋更加精準(zhǔn),。
三、實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀的應(yīng)用領(lǐng)域
3.1 基因表達(dá)分析
實(shí)時(shí)熒光定量 PCR儀在基因表達(dá)分析中的應(yīng)用非常廣泛,。研究人員可以通過(guò)測(cè)量特定基因在不同樣品中的表達(dá)水平,，了解基因在不同生物學(xué)條件下的功能和調(diào)控機(jī)制。此技術(shù)能夠提供高靈敏度和高特異性的定量數(shù)據(jù),，有助于揭示基因在細(xì)胞生物學(xué),、發(fā)育生物學(xué)和疾病研究中的作用。
3.2 遺傳變異分析
在遺傳研究中,，實(shí)時(shí)熒光定量 PCR儀被用于檢測(cè)基因的變異,，如單核苷酸多態(tài)性（SNP）和拷貝數(shù)變異（CNV）。這些變異與許多遺傳疾病和個(gè)體差異相關(guān),。通過(guò)高通量的實(shí)時(shí)PCR分析,，研究人員能夠高效地進(jìn)行大規(guī)模的基因分型和遺傳篩查。
3.3 病原體檢測(cè)
實(shí)時(shí)熒光定量 PCR儀在病原體檢測(cè)中發(fā)揮了重要作用,。其高靈敏度和特異性使其能夠檢測(cè)和定量微量的病原體,，如病毒、細(xì)菌和真菌,。此技術(shù)廣泛應(yīng)用于臨床診斷,、食品安全監(jiān)測(cè)、環(huán)境檢測(cè)等領(lǐng)域,，有助于快速檢測(cè)感染源并實(shí)施控制措施,。
3.4 miRNA和非編碼RNA研究
miRNA和其他非編碼RNA的定量分析是現(xiàn)代分子生物學(xué)研究中的一個(gè)重要領(lǐng)域。實(shí)時(shí)熒光定量 PCR儀能夠精確檢測(cè)這些低豐度的RNA分子,，從而為了解RNA在基因調(diào)控,、細(xì)胞功能和疾病機(jī)制中的作用提供數(shù)據(jù)支持。這對(duì)于研究基因表達(dá)調(diào)控和發(fā)現(xiàn)潛在的生物標(biāo)志物具有重要意義。
四,、實(shí)驗(yàn)操作流程
4.1 樣品和試劑準(zhǔn)備
在進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)前,，需準(zhǔn)備PCR反應(yīng)混合物、引物,、探針（如適用）和樣品,。樣品的質(zhì)量和試劑的配置對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果至關(guān)重要，應(yīng)嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行,，以確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,。
4.2 反應(yīng)設(shè)置
將PCR反應(yīng)混合物和樣品添加到PCR板中。根據(jù)實(shí)驗(yàn)的需求選擇適當(dāng)?shù)姆磻?yīng)體積和板型（如96孔板或384孔板）,。將PCR板放入PCR儀的熱循環(huán)模塊中,，設(shè)置實(shí)驗(yàn)參數(shù)（如溫度、循環(huán)次數(shù)和熒光檢測(cè)通道）,，然后啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)。
4.3 實(shí)驗(yàn)運(yùn)行
在實(shí)驗(yàn)運(yùn)行過(guò)程中,，實(shí)時(shí)熒光定量 PCR儀會(huì)自動(dòng)執(zhí)行PCR反應(yīng),，包括溫度循環(huán)和熒光信號(hào)檢測(cè)。儀器會(huì)在每個(gè)反應(yīng)周期中實(shí)時(shí)監(jiān)控?zé)晒庑盘?hào)的變化,，并記錄數(shù)據(jù),。
4.4 數(shù)據(jù)分析
實(shí)驗(yàn)完成后，通過(guò)數(shù)據(jù)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,。軟件提供了多種分析選項(xiàng),，包括標(biāo)準(zhǔn)曲線生成、相對(duì)定量,、絕對(duì)定量等,。用戶可以根據(jù)需要生成實(shí)驗(yàn)報(bào)告，分析結(jié)果并進(jìn)行可視化展示,。
五,、技術(shù)規(guī)格與性能參數(shù)
5.1 反應(yīng)體積與板型
板型: 支持多種PCR板型，如96孔板,、384孔板,。
反應(yīng)體積: 適應(yīng)不同體積的PCR反應(yīng)，通常從5 µL到100 µL不等,。
5.2 溫控系統(tǒng)
溫度范圍: 從4°C至100°C,。
溫控精度: ±0.5°C。
升降溫速率: 快速升溫和降溫功能,，縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間,。
5.3 光學(xué)系統(tǒng)
檢測(cè)通道: 多通道熒光檢測(cè)，支持多種熒光染料和探針。
靈敏度: 高靈敏度的熒光信號(hào)檢測(cè)能力,，適用于低豐度樣品的分析,。
5.4 軟件功能
數(shù)據(jù)分析: 提供實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)監(jiān)控、標(biāo)準(zhǔn)曲線生成,、相對(duì)定量和絕對(duì)定量分析,。
用戶界面: 直觀的觸摸屏操作，簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)設(shè)置和數(shù)據(jù)分析,。
數(shù)據(jù)存儲(chǔ): 支持實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的存儲(chǔ),、管理和共享。
六,、結(jié)論
實(shí)時(shí)熒光定量 PCR儀是一種強(qiáng)大且靈活的實(shí)驗(yàn)工具,，廣泛應(yīng)用于基因表達(dá)分析、遺傳變異檢測(cè),、病原體識(shí)別和非編碼RNA研究等領(lǐng)域,。憑借其高靈敏度的光學(xué)系統(tǒng)、精確的溫控功能和強(qiáng)大的數(shù)據(jù)分析軟件,，實(shí)時(shí)熒光定量 PCR儀能夠提供高質(zhì)量的定量數(shù)據(jù),，為科學(xué)研究和臨床診斷提供了可靠的支持。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,，實(shí)時(shí)熒光定量 PCR儀將繼續(xù)在分子生物學(xué)研究中發(fā)揮重要作用,。
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