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花生四烯酸檢測的操作步驟
接下來喆圖小編就來給大家說說檢測需要提供的試劑和器材：
1,、37℃培養(yǎng)箱
2、 酶標(biāo)儀
3,、 移液器及一次性吸頭
4,、 蒸餾水
5,、 一次性試管
6、 吸水紙
1,、準(zhǔn)備：從冰箱取出試劑盒,，室溫復(fù)溫平衡30分鐘。
2,、配液：用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液,。
3、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本：取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,，固定于框架上,，分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣本孔和空白對(duì)照孔,，記錄各孔位置,，在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL；待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,，再加樣本稀釋液40μL,，空白對(duì)照孔不加。
4,、在37℃水浴鍋中溫育30min,。
5、洗板：棄去液體,，吸水紙上拍干,，每孔加滿洗滌液，靜置1min,，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次,。
6,、加酶標(biāo)工作液：每孔加入酶標(biāo)工作液50μL，空白對(duì)照孔不加,。
7,、溫育：在37℃水浴鍋中溫育30min。
8,、洗板：棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液,，靜置1min,，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板4次,。
9,、顯色：每孔先加入顯色劑A 液50μL，再加入顯色劑B液 50μL,，37℃避光顯色15min,。
10、終止：取出酶標(biāo)板,，每孔加終止液50μL,，終止反應(yīng)（顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11,、測定：以空白孔調(diào)零,，在終止后15分鐘內(nèi)，用450nm波長測量各孔的吸光值（OD值）,。
12,、計(jì)算：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值，計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,，再根據(jù)樣本的OD值,，在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度，也可以使用各種應(yīng)用軟件來計(jì)算,。MAX終濃度為實(shí)際測定濃度乘以稀釋倍數(shù),。