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在藥研分析中，液相色譜儀一些習(xí)慣性的錯(cuò)誤操作,，會(huì)導(dǎo)致昂貴的液相色譜儀沒用幾次就壞掉了,。液相色譜分析實(shí)驗(yàn)室中，哪些操作不能做,？

流動(dòng)相不過濾

因?yàn)閴m?；蚱渌魏坞s質(zhì)微粒都會(huì)磨損柱塞、密封環(huán),、缸體和單向閥,，因此應(yīng)預(yù)先除去流動(dòng)相中的任何固體微粒。流動(dòng)相最好在玻璃容器內(nèi)蒸餾,，而常用的方法是濾過,，可采用濾膜（0.2μm或0.45μm）等濾器。泵的入口都應(yīng)連接砂濾棒（或片）,。輸液泵的濾器應(yīng)經(jīng)常清洗或更換。

使用后不及時(shí)清洗泵

流動(dòng)相不應(yīng)含有任何腐蝕性物質(zhì),，含有緩沖液的流動(dòng)相不應(yīng)保留在泵內(nèi),，尤其是在停泵過夜或更長(zhǎng)時(shí)間的情況下。如果將含緩沖液的流動(dòng)相留在泵內(nèi),，由于蒸發(fā)或泄漏,，甚至只是由于溶液的靜置，就可能析出鹽的微細(xì)晶體,，這些晶體將和上述固體微粒一樣損壞密封環(huán)和柱塞等,。

因此，必須泵入純水將泵充分清洗后,，再換成適合于色譜柱保存和有利于泵維護(hù)的溶劑（對(duì)于反相鍵合硅膠固定相,，可以是甲醇或甲醇-水）。

流動(dòng)相走空

泵工作時(shí)要留心防止溶劑瓶?jī)?nèi)的流動(dòng)相被用完,，否則空泵運(yùn)轉(zhuǎn)也會(huì)磨損柱塞,、缸體或密封環(huán)，z終產(chǎn)生漏液,。

沒有流動(dòng)相流出,，又無(wú)壓力指示怎么辦？

可能是泵內(nèi)有大量氣體,，這時(shí)可打開泄壓閥,，使泵在較大流量（如5ml/min）下運(yùn)轉(zhuǎn)，將氣泡排盡,，也可用一個(gè)50ml針筒在泵出口處幫助抽出氣體,。另一個(gè)可能原因是密封環(huán)磨損，需更換。

壓力和流量不穩(wěn)了,？

原因可能是氣泡,，需要排除；或者是單向閥內(nèi)有異物,，可卸下單向閥,，浸入丙酮內(nèi)超聲清洗。有時(shí)可能是砂濾棒內(nèi)有氣泡,，或被鹽的微細(xì)晶?；蜃躺奈⑸锊糠侄氯@時(shí),，可卸下砂濾棒浸入流動(dòng)相內(nèi)超聲除氣泡,，或?qū)⑸盀V棒浸入稀酸（如4mol/L硝酸）內(nèi)迅速除去微生物，或?qū)Ⅺ}溶解,，再立即清洗

壓力為啥過高或過低,？

 可能是是管路被堵塞，需要清除和清洗,。壓力降低的原因則可能是管路有泄漏,。檢查堵塞或泄漏時(shí)應(yīng)逐段進(jìn)行。在進(jìn)行梯度洗脫時(shí),，由于多種溶劑混合,，而且組成不斷變化，因此帶來一些特殊問題,，必須充分重視：

PS：在液相色譜中對(duì)組分復(fù)雜的樣品采用梯度洗脫的方法,。在同一個(gè)分析周期中，按一定程序不斷改變流動(dòng)相的濃度配比,，稱為梯度洗脫,。從而可以使一個(gè)復(fù)雜樣品中的性質(zhì)差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k達(dá)到良好的分離目的。(梯度洗脫的優(yōu)點(diǎn)：1.縮短分析周期,；2.提高分離能力,；3.峰型得到改善，很少拖尾,；4.增加靈敏度,。但有時(shí)引起基線漂移。）

梯度洗脫的流動(dòng)相選擇不當(dāng)

要注意溶劑的互溶性,，不相混溶的溶劑不能用作梯度洗脫的流動(dòng)相,。有些溶劑在一定比例內(nèi)混溶，超出范圍后就不互溶,，使用時(shí)更要引起注意,。

當(dāng)有機(jī)溶劑和緩沖液混合時(shí),，還可能析出鹽的晶體，尤其使用磷酸鹽時(shí)需特別小心,。

忽略的空白梯度洗脫

梯度洗脫所用的溶劑純度要求更高,，以保證良好的重現(xiàn)性。進(jìn)行樣品分析前必須進(jìn)行空白梯度洗脫,，以辨認(rèn)溶劑雜質(zhì)峰,，因?yàn)槿跞軇┲械碾s質(zhì)富集在色譜柱頭后會(huì)被強(qiáng)溶劑洗脫下來。用于梯度洗脫的溶劑需脫氣,，以防止混合時(shí)產(chǎn)生氣泡,。

忽略了溶劑混合所帶來的粘度變化

混合溶劑的粘度常隨組成而變化，因而在梯度洗脫時(shí)常出現(xiàn)壓力的變化,。例如甲醇和水粘度都較小,，當(dāng)二者以相近比例混合時(shí)粘度增大很多，此時(shí)的柱壓大約是甲醇或水為流動(dòng)相時(shí)的兩倍,。因此要注意防止梯度洗脫過程中壓力超過輸液泵或色譜柱能承受的最大壓力,。

以上錯(cuò)誤操作僅做參照，具體操作要求液相色譜儀使用說明書或儀器廠家技術(shù)人員說明,。