土壤總磷/有機(jī)磷/無機(jī)磷含量測定試劑盒說明書
分光光度法 50 管/48 樣
正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義：
土壤總磷包括有機(jī)磷和無機(jī)磷,，其中無機(jī)磷能夠直接被植物利用。土壤有機(jī)磷經(jīng)過礦化分解而轉(zhuǎn)化為無機(jī)磷,。同時(shí)測定土壤總磷,、有機(jī)磷和無機(jī)磷，可以全面反映土壤磷營養(yǎng)狀況,。
測定原理：
利用鉬藍(lán)法定磷,。取一份土樣，通過浸提法測定土壤無機(jī)磷含量,；另外取一份土樣,，經(jīng)高溫灼燒后，土壤有機(jī)磷轉(zhuǎn)化為無機(jī)磷,，測得土壤總磷含量,；總磷含量減去無機(jī)磷含量，即可計(jì)算??有機(jī)磷含量,。
試劑組成和配制：
產(chǎn)品名稱 | BO6050-50T/48S | Storage |
試劑一：液體 | 1 瓶 | 4℃ |
試劑二：液體 | 1 瓶 | 4℃ |
試劑三：粉劑 | 1 瓶 | 4℃避光 |
標(biāo)準(zhǔn)品：液體 | 1 支 | 4℃ |
說明書 | 一份 |
試劑一：液體×1 瓶，4℃保存,。臨用前用蒸餾水稀釋 10 倍后再用,。
試劑三：粉劑×1 瓶，4℃避光保存,。臨用前配制,，加入 20 ml 蒸餾水，充分溶解后加入 10 ml 試劑二,，混勻,。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1 支，20 μ mol/L 無機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)品,，4℃保存,。
自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、臺式離心機(jī),、可調(diào)式水浴鍋,，分析天平、可調(diào)式移液器,、550℃高溫電爐,，1ml 玻璃比色皿、蒸餾水,、100 目篩子（可更?。?/span>
土壤不同形態(tài)磷提取：
1. 無機(jī)磷：稱取通過 100 目篩子的風(fēng)干土樣 0.1g,，轉(zhuǎn)移到 10 ml 離心管,，加入 10ml 試劑一，震蕩混勻,，然后置于 45℃水浴 1h,，8000g，25℃離心 10min,，取上清液一,，用于無機(jī)磷含量測定。
2. 總磷提?。喝⊥ㄟ^ 100 目篩子的風(fēng)干土樣,，550℃灼燒 1h，冷卻后稱取約 0.1g,，轉(zhuǎn)移到 10 ml 離心管,，加入 10ml 試劑一，震蕩混勻,，然后置于 45℃水浴 1h,，8000g，25℃,，離心 10min,，取上清液二，用于總磷含量測定,。
測定步驟：
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱 30 min,，調(diào)節(jié)波長到 660 nm，蒸餾水調(diào)零,。
2. 打開水浴鍋,，調(diào)節(jié)溫度到 40℃。
3. 空白管：取EP 管,，依次加入 500μl 蒸餾水,，500μl 試劑三，混勻后置于 40℃水浴保溫 10min,，室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度,，記為A 空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管：取EP 管,，依次加入 50μl 標(biāo)準(zhǔn)液,，450μl 蒸餾水，500μl 試劑三,，混勻后置于 40℃水浴保溫 10min,，室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度，記為A 標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 測定管：取 EP 管,，依次加入 50μl 上清液一或者上清液二,，450μl 蒸餾水，500μl 試劑三,，混勻后置于 40℃水浴保溫 10min,，室溫冷卻 10 min 后于 660 nm 測定吸光度，記為A 測定管,。
注意事項(xiàng):
1,、空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。
2,、試劑三配制過程中,，可能會產(chǎn)生黑色固體，其不影響結(jié)果,，注意吸取時(shí)不要將黑色固體吸入,。
土壤磷含量計(jì)算：
1. 土壤無機(jī)磷含量（μmol /g）=[C 標(biāo)準(zhǔn)液×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)]×V 總÷W=0.2×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)÷W
C 標(biāo)準(zhǔn)液：20 μmol/L； W：土壤樣品質(zhì)量,，g,； V 總：上清液一總體積，10 ml=0.01 L,。
2. 土壤總磷含量（μmol /g 干重）=[C 標(biāo)準(zhǔn)液×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)]×V 總
÷W=0.2×(A 測定管－A 空白管)÷(A 標(biāo)準(zhǔn)管－A 空白管)÷W
C 標(biāo)準(zhǔn)液：20 μmol/L,；V 標(biāo)準(zhǔn)液：50μl=0.05 ml；W：土壤樣品質(zhì)量,，g,；V 總：上清液二總體積,，10 ml=0.01 L,。
3. 土壤有機(jī)磷（μmol /g）=土壤總磷-土壤無機(jī)磷
