義翹神州  MCHOGSI-1L  SMM CHO-GSI CHO細(xì)胞無血清培養(yǎng)基 不含L-谷an酰an 用于CHO GS表達(dá)系統(tǒng)

義翹神州 SMM CHO-GSI CHO細(xì)胞無血清培養(yǎng)基-常備現(xiàn)貨

北京義翹神州科技股份有限公司是一家從事生物試劑研發(fā),、生產(chǎn),、銷售并提供技術(shù)服務(wù)的生物科技公司,。所有產(chǎn)品都是自主研發(fā)和生產(chǎn)的,，主要業(yè)務(wù)包括重組蛋白,、抗體,、基因和培養(yǎng)基等產(chǎn)品，以及重組蛋白,、抗體的開發(fā)和生物分析檢測等服務(wù),，同時也為制藥公司或生物技術(shù)公司提供單克隆抗體候選藥物的臨床前規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)。義翹神州的產(chǎn)品能夠覆蓋生命科學(xué)研究的多個領(lǐng)域,，為分子生物學(xué),、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué),、發(fā)育生物學(xué),、干細(xì)胞研究等基礎(chǔ)科研方向和創(chuàng)新藥物研發(fā)提供“一站式"生物試劑產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。

義翹神州  MCHOGSI-1L  SuperNuclease核酸酶殘留檢測試劑盒  SMM CHO-GSI CHO細(xì)胞無血清培養(yǎng)基 不含L-谷an酰an 用于CHO GS表達(dá)系統(tǒng)  1L,，產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品品牌：義翹神州

產(chǎn)品貨號：MCHOGSI-1L

產(chǎn)品名稱：SuperNuclease核酸酶殘留檢測試劑盒  SMM CHO-GSI CHO細(xì)胞無血清培養(yǎng)基 不含L-谷an酰an 用于CHO GS表達(dá)系統(tǒng)

產(chǎn)品規(guī)格：1L

義翹神州  MCHOGSI-1L  SuperNuclease核酸酶殘留檢測試劑盒  SMM CHO-GSI CHO細(xì)胞無血清培養(yǎng)基 不含L-谷an酰an 用于CHO GS表達(dá)系統(tǒng)  1L,，產(chǎn)品說明：

產(chǎn)品描述

SMM CHO-GSI 培養(yǎng)基主要是為提高CHO穩(wěn)定株的蛋白產(chǎn)量而開發(fā)的，無血清,，無動物源成分的培養(yǎng)基,。不含L-谷an酰an，使用時需加入4mM的L-谷an酰an,。不含HT,。推薦用于CHO GS表達(dá)系統(tǒng)。

產(chǎn)品特點

蛋白表達(dá)量高,，細(xì)胞生長好,，嚴(yán)格的質(zhì)控，批次穩(wěn)定性好,。

產(chǎn)品用途

僅用于科學(xué)研究,，不推薦用于人類或動物的診斷和治療。

儲存條件

2-8℃避光儲存12個月,。

培養(yǎng)方法

（一）細(xì)胞復(fù)蘇

1.取出凍存管,，迅速在37℃水浴鍋里融化，整個過程最好控制在1分鐘以內(nèi),。

2. 輕輕地混勻細(xì)胞并全部移到50ml的離心管中,，逐滴加入 5-8ml在37℃水浴鍋里預(yù)熱的新鮮培養(yǎng)基。 100g,，5min離心細(xì)胞,。

3. 倒掉上清,，用10-20mL在37℃水浴鍋里預(yù)熱好的新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，放到100mL培養(yǎng)瓶中,。 然后將細(xì)胞放到37℃,，5%的CO2恒溫?fù)u床中，110-175rpm培養(yǎng),。

4. 2-5天后取樣計數(shù)細(xì)胞密度和活率,，如果細(xì)胞密度達(dá)到1.0X106cells/ml，則24進行正常傳代培養(yǎng),； 如果細(xì)胞密度低于1.0X106cells/m,，則收集細(xì)胞進行離心處理，100g,，5min,。 然后重懸到20-30ml已經(jīng)在37℃水浴鍋里孵育好的新鮮培養(yǎng)基,，繼續(xù)培養(yǎng),。

5. 細(xì)胞生長正常后，傳代時起始密度控制在0.3X106cells/ml ,，3-4天傳一次代,。

注意事項：凍存管融化速度越快越好； 由于剛復(fù)蘇的細(xì)胞比較脆弱,，所以整個過程要輕以免損傷細(xì)胞,。

（二）細(xì)胞傳代

1. 取樣計數(shù)細(xì)胞，計算細(xì)胞密度,。

2. 按照起始細(xì)胞密度0.3-0.4X106cells/ml,，計算所需細(xì)胞懸液和培養(yǎng)基的用量傳代，100ml的培養(yǎng)瓶中放15-20ml培養(yǎng)（或250ml的培養(yǎng)瓶放50-60ml培養(yǎng)）,。 37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),，5%CO2，搖床轉(zhuǎn)速：110-175rpm,。

3. 每3-4天傳一次代,，起始細(xì)胞密度傳到0.2-0.3X106細(xì)胞/ml。

如何使 CHO 穩(wěn)定的應(yīng)變細(xì)胞適應(yīng) SMM CHO-SI 培養(yǎng)基：

通常情況下,，細(xì)胞不經(jīng)過馴化而能直接適應(yīng)SMM CHO-GSI培養(yǎng)基,，下面我們推薦2種方式來更換培養(yǎng)基：1）直接更換； 2）逐步更換,。 首先選用的細(xì)胞要在對數(shù)生長期,，同時細(xì)胞活率大于90%。

（三）直接更換

1. 細(xì)胞培養(yǎng)在加5-10%血清傳統(tǒng)的培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基里,，直接稀釋傳代到SMM CHO-GSI培養(yǎng)基,，細(xì)胞密度控制在0.3-0.4X106細(xì)胞/ml,。

2.然后放入5%CO2、37℃的恒溫培養(yǎng)箱中,，110-175rpm轉(zhuǎn)速條件下培養(yǎng),。

3. 3-5天后進行傳代或者換液

4. 繼續(xù)傳代培養(yǎng)，起始細(xì)胞密度控制在0.3-0.4X106cells/ml,，直到wan全適應(yīng)SMM CHO-GSI培養(yǎng)基,。

5. 經(jīng)過幾代在100%的 SMM CHO-GSI培養(yǎng)基中培養(yǎng)，傳代后4-6天細(xì)胞的密度可以達(dá)到2-3X106cells/ml,，細(xì)胞活率大于90%,。 這時說明細(xì)胞已經(jīng)wan全適應(yīng)SMM CHO-GSI培養(yǎng)基。 注意: 如果直接更換沒有成功,，則進行逐步更換的方法養(yǎng)基,。

注意: 如果直接更換沒有成功，則進行逐步更換的方法

（四）逐步更換

1.細(xì)胞培養(yǎng)在加5-10%血清傳統(tǒng)的培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基里,，稀釋傳代,，細(xì)胞密度控制在0.3-0.4X106cells/ml，原培養(yǎng)基與SMM CHO-GSI培養(yǎng)基的比例為75：25,。

2.然后放入5%CO2,、37℃的恒溫培養(yǎng)箱中，110-175rpm,。

3. 3-5天后進行傳代,，如果細(xì)胞生長正常，則傳代時原培養(yǎng)基與SMM CHO-GSI培養(yǎng)基的比例為50:50. 細(xì)胞密度仍控制在0.3-0.4X106細(xì)胞/ml,。

重復(fù)步驟3,，逐漸增加SMM CHO-GSI培養(yǎng)基的比例（25：75;原始培養(yǎng)基與SMM CHO-GSI培養(yǎng)基的比例為10：90），直到SMM CHO-GSI培養(yǎng)基的100%,。

5.在100%的SMM CHO-GSI培養(yǎng)基中,，傳代后4-6天細(xì)胞的密度可以達(dá)到2-3X106cells/ml，細(xì)胞活率大于90%,。這時說明細(xì)胞已經(jīng)wan全適應(yīng)SMM CHO-GSI培養(yǎng)基,。

（五）凍存細(xì)胞

凍存細(xì)胞時CHO cells 要處在對數(shù)生長期同時細(xì)胞活率在90%以上。

1.取樣計數(shù)細(xì)胞,，根據(jù)凍存管數(shù)計算所用細(xì)胞懸液體積和凍存液的體積,，比例如下：92.5%的培養(yǎng)基混合物（50% 的新鮮SMM CHO-GSI培養(yǎng)基+50% 條件SMM CHO-GSI培養(yǎng)基 ）+ 7.5% DMSO，最終的細(xì)胞數(shù)為 5 x 106cells/ 管,。

2.準(zhǔn)備相應(yīng)體積的凍存培養(yǎng)基：46.25% 的新鮮SMM CHO-GSI培養(yǎng)基 + 7.5% DMSO,，放在4°C 備用。 凍存培養(yǎng)基最好為當(dāng)天配制。

3.通過100g,，5-10min離心收集細(xì)胞,，留46.25%條件培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，然后逐滴加入事先準(zhǔn)備好的放4°C 的凍存培養(yǎng)基,。

4.混合均勻后分裝細(xì)胞到凍存管中,，一般2ml的凍存管放1-1.5ml，貼好標(biāo)簽,。

5.然后放到凍存盒中,，放入-80°C 冰箱(每分鐘下降1°C)。

6.80℃冰箱中過夜放置（至少放置24小時）,，轉(zhuǎn)移細(xì)胞到液氮罐中,，推薦儲存條件在-125°C to -200°C。

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產(chǎn)品訂購信息：

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