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細(xì)胞名稱：小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞CT-2A細(xì)胞ATCC

細(xì)胞代次：P4

細(xì)胞規(guī)格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運(yùn)輸費(fèi)）

細(xì)胞凍存：無血清凍存液

細(xì)胞傳代：第一次建議1:2

1,、您收到細(xì)胞后,，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作：

取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,，拆下封口膜,，放入37℃，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),，然后換用新鮮*培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代,。

2、細(xì)胞傳代：

1）細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,，用PBS清洗細(xì)胞一次；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,，倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,，1000rpm離心5min；

3）棄上清,，沉淀細(xì)胞用12ml*培養(yǎng)基重懸,，然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代，zui后放入37℃,，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

4）待細(xì)胞*貼壁后,，觀察培養(yǎng)結(jié)果，之后進(jìn)行換液培養(yǎng)或傳代,。

3,、細(xì)胞凍存：

1）細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,，用PBS清洗細(xì)胞一次,；

2）添加0.25%Y蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化,，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,，1000rpm離心5min,；

3）用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中,；

4）先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長期保存,。使用程序降溫盒可直接放入-80℃,。

4、細(xì)胞復(fù)蘇：

1）從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）,，快速將其置入37℃水浴中解凍,，直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁,；

2）將凍存管中的細(xì)胞移至含5ml*培養(yǎng)基的15ml離心管中,， 1000rpm離心5min；

3）棄上清,，沉淀用5ml*培養(yǎng)基重懸,，接種25cm2培養(yǎng)瓶，于37℃,，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

4）第二天，換用新鮮*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。

原代細(xì)胞與細(xì)胞系有什么區(qū)別,？細(xì)胞培養(yǎng)物來源于原代外植體或分散的細(xì)胞懸液。通常在這樣的培養(yǎng)物中細(xì)胞增殖形成匯合地單層細(xì)胞或密集地細(xì)胞懸液,。根據(jù)傳統(tǒng)定義,，*次收獲和接種的細(xì)胞被稱為原代細(xì)胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細(xì)胞生命周期有限，在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細(xì)胞zui大的生長空間，以保持細(xì)胞群中基因型和表型的*性,。細(xì)胞系是不斷生長,，分化的細(xì)胞群，因其經(jīng)過遺傳改造,，致使其具有無限增長的潛能,。體外生長的細(xì)胞系用于醫(yī)療或科研。實(shí)際上,，連續(xù)細(xì)胞系可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng),，隨著代數(shù)的增加細(xì)胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。需要指出的是,，在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會(huì)有所不同,。許多研究員不用細(xì)胞系這個(gè)詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。

1,、倍增和代數(shù)有什么區(qū)別,？倍增是培養(yǎng)物中細(xì)胞總數(shù)加倍，通常是指細(xì)胞指數(shù)或?qū)?shù)生長期,。代數(shù)是指細(xì)胞群從培養(yǎng)瓶中移出,，傳代培養(yǎng)過程的次數(shù)，傳代培養(yǎng)的目的是使細(xì)胞處于低密度以刺激其進(jìn)一步生長,。

2,、接收到的凍存細(xì)胞該如何處理？收到包裝箱后,，立即將凍存細(xì)胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快以避免升溫,。不要將細(xì)胞儲(chǔ)存在-80℃,，這樣會(huì)對(duì)細(xì)胞造成不可挽回的傷害。

3,、有多少經(jīng)驗(yàn)才能開始正常人類細(xì)胞培養(yǎng),？推薦有經(jīng)驗(yàn)者在無菌環(huán)境下用層流凈化罩工作，如果有經(jīng)驗(yàn)的話對(duì)其它細(xì)胞類型也是很有利的,。如果你是細(xì)胞培養(yǎng)的初學(xué)者或打算建立細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室,，我們會(huì)為你提供幫助。請(qǐng)的細(xì)胞培養(yǎng)專家,。

售后服務(wù)告知書

1）細(xì)胞出現(xiàn)問題,，可重發(fā)的情況有哪些？判定標(biāo)準(zhǔn)是什么,？

1. 細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,，細(xì)胞丟失、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,，重發(fā),；

2. 細(xì)胞污染問題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品48小時(shí)內(nèi),，給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,，核實(shí)后重發(fā)；

3. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,，干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后,，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，（需提供真實(shí)清晰的細(xì)胞狀態(tài)照片）,，重發(fā),；

4. 干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇后24小時(shí)后或常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置4小時(shí)候并且未開封，出現(xiàn)污染,，重發(fā),；

5. 細(xì)胞活性問題，請(qǐng)?jiān)谑盏疆a(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實(shí)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,，用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,，核實(shí)后予重發(fā)；

6. 細(xì)胞收到當(dāng)天以及第2,3天請(qǐng)拍照,，3天未告知的,，視為產(chǎn)品合格。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細(xì)胞前3天照片和細(xì)胞出現(xiàn)問題時(shí)照片以及細(xì)胞相關(guān)操作的詳細(xì)步驟的,，并跟技術(shù)人員溝通的,，由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的，重發(fā),。技術(shù)人員判定為雙方承擔(dān)責(zé)任的由雙方進(jìn)行協(xié)商處理或者按合同價(jià)的50%收費(fèi)重發(fā),。

二）細(xì)胞出現(xiàn)問題，不予以重發(fā)的情況有哪些,？

1. 客戶造成細(xì)胞污染,，不重發(fā)；

2. 客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,，不重發(fā),；

3. 非本庫推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā),；

4. 細(xì)胞狀態(tài)不好,，未提供細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā),；

5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,，不重發(fā)；

6. 細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知,，不重發(fā),；

7. 視具體情況而定。

YS1087P小鼠腎小球內(nèi)皮原代細(xì)胞

YS1088P小鼠前列腺上皮原代細(xì)胞

YS1089P小鼠腎皮質(zhì)上皮原代細(xì)胞

YS1090P小鼠膀胱成纖維原代細(xì)胞

YS1091P小鼠腎足突原代細(xì)胞

YS1092P小鼠腎成纖維原代細(xì)胞

YS1093P小鼠尿道上皮原代細(xì)胞

YS1094P小鼠輸尿管上皮原代細(xì)胞

YS1095P小鼠心肌原代細(xì)胞

YS1096P小鼠心肌成纖維原代細(xì)胞

YS1097P小鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮原代細(xì)胞

YS1098P小鼠主動(dòng)脈平滑肌原代細(xì)胞

YS1099P小鼠血管外膜成纖維原代細(xì)胞

YS1100P小鼠大隱靜脈平滑肌原代細(xì)胞

YS1101P小鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌原代細(xì)胞

YS1102P小鼠大隱靜脈內(nèi)皮原代細(xì)胞

YS1103P小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮原代細(xì)胞

YS1104P小鼠滑膜原代細(xì)胞

YS1105P小鼠骨骼肌原代細(xì)胞

YS1106P小鼠真皮成纖維原代細(xì)胞

YS1107P小鼠軟骨原代細(xì)胞

YS1108P小鼠破骨原代細(xì)胞

YS1109P小鼠前脂肪原代細(xì)胞

YS1110P小鼠成骨原代細(xì)胞

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YS1115P小鼠腦微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞

YS1116P小鼠腦成纖維原代細(xì)胞

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YS1118P小鼠小腦顆粒原代細(xì)胞

YS1119P小鼠嗅鞘原代細(xì)胞

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