目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>試劑盒>>檢測試劑盒>> TO1043氧化(GSSG)檢測試劑盒(DTNB速率比色法)
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | TO1043 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥,綜合 |
動物或植物細胞發(fā)生氧化應激(oxidative stress)時,，會發(fā)生脂質(zhì)氧化,。丙二醛(Malondialdehyde, MDA)是一種生物體脂質(zhì)氧化
的天然產(chǎn)物，一些脂肪酸氧化后逐漸分解為一系列包括MDA在內(nèi)的復雜化合物,，此時通過檢測MDA的水平即可檢測脂質(zhì)氧化的
水平,，因此MDA的測定被廣泛用作脂質(zhì)氧化的指標。生物體內(nèi)的一些其它生化反應也會產(chǎn)生MDA,，
例如thromboxane synthase也可以催化產(chǎn)生,，但只要在測定時設置適當對照即可觀察到脂質(zhì)氧化水平的變化。
氧化(GSSG)檢測試劑盒(DTNB速率比色法)(Plant MDA Assay Kit with TBA)又稱脂質(zhì)氧化(MDA)檢測試劑盒,，
是采用一種基于MDA和硫酸(thiobarbituric acid, TBA)反應產(chǎn)生紅色產(chǎn)物的顯色反應,，隨后通過比色法用于對植物組織
(根、莖,、葉,、種子等)MDA進行檢測，是專門用于植物脂質(zhì)氧化(lipid peroxidation)水平檢測的試劑盒,，不適用于動物組織
,、細胞、血液等,；丙二醛在較高溫度及酸性環(huán)境中可與TBA發(fā)生反應,，形成紅色的MDA-TBA加合物，MDA-TBA加合物在532nm處有最大吸收，該復合物的吸光系數(shù)為155mmol/(L.cm),，并且在600nm波長處有最小吸收,，植物組織中糖類物質(zhì)對
MDA-TBA反應有干擾，我們總結(jié)出經(jīng)驗公式,，以消除這一干擾,，亦可以通過比標準品進行比較，進行含量檢測,。
該試劑盒僅用于科研領域,，不適用于臨床診斷或其他用途。
操作步驟(僅供參考)：
自備材料：
1,、蒸餾水
2,、電子天平、研缽或勻漿器,、離心管或試管
3,、低溫離心機、恒溫箱或水浴鍋,、酶標儀,、酶標板
操作步驟(僅供參考)：
1、準備樣品∶
①植物樣品︰取1g植物組織或水果中層果肉,，加入2.5ml PAL Lysis Buffer,，冰浴情況下充分搗碎研磨或勻漿，4℃ 10000r/min
離心15~20min,，留取上清液,，-20℃凍存，用于苯丙氨解氨酶的檢測,。
②血漿,、血清和尿液樣品︰血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于該試劑盒的測定,，-20℃凍存,，用于苯丙解氨的檢測。
③細胞或組織樣品∶取恰當細胞或組織裂解液,，如果有必要需進行適當勻漿,，4℃ 10000r/min離心15~20min,，取上清液,，
-20℃凍存，用于苯丙酸解氨酶的檢測,。④高活性樣品︰如果樣品中含有較高活性的苯丙解氨酶,，可以使用蒸餾水或PAL
Lysis Buffer稀釋進行恰當?shù)南♂尅?/span>
2、PAL加樣∶
取96孔板，按照下表設置對照孔,、測定孔,，溶液應按照順序依次加入，并
注意避免產(chǎn)生氣泡,。如果樣品中的PAL活性過高,，可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定，樣品的檢測最好能設置2平行孔,，
求平均值,。
加入物（μl）對照孔測定孔
蒸餾水150100
待測樣本5050
PAL Assay Buffer-50
3、PAL檢測︰
以對照孔為對照(調(diào)零),，酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為 A測定0);40℃準確孵育1h,，立即加入10μl PAL終止
液終止反應(備選方案)，以對照孔為對照調(diào)零,，酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為A測定1),。
注意︰加入PAL終止液終止反應為非必須步驟，可37℃準確孵育1h后直接以對照孔為對照調(diào)零,，酶標儀立即測定290nm處測定
孔的吸光度,。
注意事項∶
1、待測樣品中不能含有酶抑制劑,，同時需避免反復凍融,。
2、獲得上清液為PAL酶液,，應盡快檢測,，亦可-20°℃保存。
3,、如果沒有可測定紫外區(qū)的酶標儀和酶標板,，也可以使用紫外分光光度計和石英比色皿，但應注意比色杯的最小檢測體積,。
4,、每次檢測指標不宜過多，否則操作時間不一,，有可能導致樣本間的差異,。5、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。
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52728P52728pLV3-U6-PGM5-AS1(human)-lncRNA-shRNA3-CopGFP-Puro
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52731P52731pLV3-U6-SLC1A3(human)-shRNA1-CopGFP-Puro
52732P52732pLV3-U6-DUOXA1(human)-shRNA3-CopGFP-Puro
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52734P52734pLV3-U6-BUD23(human)-shRNA1-CopGFP-Puro
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