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目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>試劑盒>>檢測試劑盒>> TE0403苯丙氨解氨酶(PAL)檢測試劑盒

苯丙氨解氨酶(PAL)檢測試劑盒
  • 苯丙氨解氨酶(PAL)檢測試劑盒
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  • 苯丙氨解氨酶(PAL)檢測試劑盒
參考價 490
訂貨量 ≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準
490
≥1
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 品牌 雅吉生物
  • 型號 TE0403
  • 廠商性質 生產(chǎn)商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時間:2024-11-01 10:52:09瀏覽次數(shù):215評價

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苯丙氨解氨酶(PAL)檢測試劑盒,,雅吉生物是一家生物企業(yè)主營ATCC細胞,,細胞系,,原代細胞和培養(yǎng)試劑,,重組蛋白,,ELISA試劑盒,、抗體,、熒光定量PCR檢測試劑盒

苯丙氨解氨酶( L-phenylalanine ammonia-lyase,,PAL)是催化直接脫掉L-苯丙上的氨而生成反式桂皮酸的酶,,

該酶多存在于高等植物,、酵母、菌類可溶性部分物質,,是1961年J.Koukol在大麥中發(fā)現(xiàn)的,,推測其分子量約為30萬,

這是一個可把苯丙氨用于酚類化合物合成的酶,。在組織中的活性可隨外界因素而發(fā)生顯著變化,,用光照、病傷害,、

植物激素處理等會使活性顯著增加,,在多數(shù)情況下在組織中活性增加時,酶發(fā)生失活作用,,這時組織中具有活性酶的

量很快就會減少,,據(jù)認為這種失活是與類蛋白質物質作用有關,測定細胞木質素合成途徑中間代謝物及關鍵酶活性,,

可以探討多種生物細胞發(fā)育過程中木質素沉積的代謝機理,,為減少水果石細胞含量提高其品質提供依據(jù)。


苯丙氨解氨酶(PAL)檢測試劑盒檢測原理是以苯丙氨作為底物,,在酶促反應的最適條件下采用每隔

一定時間測定產(chǎn)物生成量的方法,,于酶標儀290nm處檢測吸光度,以吸光度變化所需酶量進行計算,,主要用于植物組織的裂解

液或勻漿液,、血清等樣品中內(nèi)源性的苯丙氨解氨酶活性,尤其適用于檢測水果中苯丙氨解氨酶活性,。該試劑盒僅用于科研

領域,,不適用于臨床診斷或其他用途。


操作步驟(僅供參考)

自備材料:

1,、蒸餾水

2,、電子天平、研缽或勻漿器,、離心管或試管

3,、低溫離心機、恒溫箱或水浴鍋,、酶標儀、酶標板


操作步驟(僅供參考):

1,、準備樣品∶

①植物樣品︰取1g植物組織或水果中層果肉,,加入2.5ml PAL Lysis Buffer,冰浴情況下充分搗碎研磨或勻漿,,4℃ 10000r/min

離心15~20min,,留取上清液,,-20℃凍存,用于苯丙氨解氨酶的檢測,。

②血漿,、血清和尿液樣品︰血漿、血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于該試劑盒的測定,,-20℃凍存,,用于苯丙解氨的檢測。

③細胞或組織樣品∶取恰當細胞或組織裂解液,,如果有必要需進行適當勻漿,,4℃ 10000r/min離心15~20min,取上清液,,

-20℃凍存,,用于苯丙酸解氨酶的檢測。④高活性樣品︰如果樣品中含有較高活性的苯丙解氨酶,,可以使用蒸餾水或PAL

Lysis Buffer稀釋進行恰當?shù)南♂尅?/span>

2,、PAL加樣∶

取96孔板,按照下表設置對照孔,、測定孔,,溶液應按照順序依次加入,并

注意避免產(chǎn)生氣泡,。如果樣品中的PAL活性過高,,可以減少樣品用量或適當稀釋后再進行測定,樣品的檢測最好能設置2平行孔,,

求平均值,。

加入物(μl)對照孔測定孔

蒸餾水150100

待測樣本5050

PAL Assay Buffer-50

3、PAL檢測︰

以對照孔為對照(調(diào)零),,酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為   A測定0);40℃準確孵育1h,,立即加入10μl PAL終止

液終止反應(備選方案),以對照孔為對照調(diào)零,,酶標儀立即測定290nm處測定孔的吸光度(記為A測定1),。

注意︰加入PAL終止液終止反應為非必須步驟,可37℃準確孵育1h后直接以對照孔為對照調(diào)零,,酶標儀立即測定290nm處測定

孔的吸光度,。

注意事項∶

1、待測樣品中不能含有酶抑制劑,,同時需避免反復凍融,。

2、獲得上清液為PAL酶液,,應盡快檢測,,亦可-20°℃保存,。

3、如果沒有可測定紫外區(qū)的酶標儀和酶標板,,也可以使用紫外分光光度計和石英比色皿,,但應注意比色杯的最小檢測體積。

4,、每次檢測指標不宜過多,,否則操作時間不一,有可能導致樣本間的差異,。5,、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作,。




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