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堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase,，簡稱ALP或AKP)為一類磷酸酯酶,，廣泛分布于哺乳動(dòng)物組織內(nèi)，其活性所需最適pH 9.2~9

.8,。此酶主要存在于物質(zhì)交換活躍之處(細(xì)胞膜),，如腸上皮和腎近曲小管的刷狀緣、附睪上皮之靜纖毛,、肝的毛細(xì)膽管膜以及

微動(dòng)脈和毛細(xì)血管動(dòng)脈部之內(nèi)皮,，還見于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基復(fù)合體,、吞飲小泡,、腸上皮之溶酶體、中性粒細(xì)胞之中性顆粒以及

平滑肌的細(xì)胞膜,。

酸性磷酸酶(ACP)檢測試劑盒(Alkaline Phosphatase Colorimetric Assay Kit)采用PNP比色法,，其檢測原理是

Para-nitrophenyl phosphate (pNPP)為一種常用的磷酸酶顯色底物，在酸性條件下,，可在堿性磷酸酶的作用下生成

p-nitrophenol,；在堿性條件下p-nitrophenol轉(zhuǎn)變成醌式結(jié)構(gòu)，呈較深的黃色,，產(chǎn)物黃色越深說明堿性磷酸酶活性越高,，

反之則酶活性越低，通過比色法(酶標(biāo)儀)測定400～415nm處吸光度,，據(jù)此通過比色分析就可以計(jì)算出堿性磷酸酶活性水平

,，可用于檢測細(xì)胞或組織的裂解液或勻漿液、血漿,、血清,、尿液等樣品中內(nèi)源性的堿性磷酸酶活性。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域

,，不適用于臨床診斷或其他用途,。

計(jì)算：堿性磷酸酶金氏活性單位的定義：在 37℃條件下，100ml 待測樣品與顯色底物(即 ALP

顯色液所含物質(zhì))作用 15min，產(chǎn)生 1mg 酚為一個(gè)金氏單位,。

以系列 Phenol 標(biāo)準(zhǔn)(1～6 號(hào))對應(yīng)的金氏單位(5,、10、20,、30,、40、50U/L)為橫坐標(biāo),，以相應(yīng)

的 A 標(biāo)準(zhǔn)(1～6 號(hào))為縱坐標(biāo),，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。以 A 測定-A 對照的差值為實(shí)際的吸光度,，用

該差值與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行對比,，求出酶活力單位。

參考區(qū)間(37℃)：

健康成年人 3～13 金氏單位

健康兒童 5～28 金氏單位

注意事項(xiàng)：

1,、待測樣品中不能含有磷酸酶抑制劑,，同時(shí)需避免反復(fù)凍融。

2,、如果沒有酶標(biāo)儀,，也可以使用分光光度計(jì)測定，但應(yīng)注意 96 孔板最大檢測體積,。

3,、所測樣品的值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線的上限，應(yīng)稀釋樣品后重新測定,。

4,、空白孔如果顯紅色，說明 ALP 顯色液不可用,，應(yīng)丟棄。

5,、加入顯色基液時(shí)應(yīng)迅速,，并且及時(shí)混勻，否則顯色不充分,。

6,、如無法檢測 510nm，亦可檢測 500～530nm 范圍內(nèi)吸光度,。

7,、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

附錄：參考標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍：測定 Phenol 標(biāo)準(zhǔn)在 5~50U/L 金氏單位時(shí),，通過酶標(biāo)儀 505nm 測

定其吸光度多在 0.1~1.0 之間，標(biāo)準(zhǔn)曲線參考如下：

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