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(Proline,，Pro)是一種環(huán)狀的α-亞氨基酸，呈中性,，等電點(diǎn)為6.30,，水中溶解度比任何氨基酸都大，25℃時(shí)100g水中可溶162g

左右,，易潮解不易得結(jié)晶,，有甜味,。與茚三酮溶液共熱，生成黃色化合物,，一旦進(jìn)入肽鏈后,，可發(fā)生羥基化作用，從而形4-羥,，

是組成動(dòng)物膠原蛋白的重要成分,，羥也存在于多種植物蛋白質(zhì)中，尤其與細(xì)胞壁的形成有關(guān),，在正常情況下含量較低,，

但在逆境下(旱、熱,、冷,、凍、鹽堿等),，常有的明顯積累,，即積累指數(shù)與植物的抗逆性有關(guān)，在臨床,、生物材料,、

工業(yè)等方面均有廣泛應(yīng)用。

(PRO)檢測試劑盒(茚三酮微板法)檢測原理是游離于磺基水楊酸溶液中,，前者與酸性茚三酮共熱發(fā)生反應(yīng)

,，產(chǎn)生穩(wěn)定的紅色產(chǎn)物，以酶標(biāo)儀測定520nm處吸光度值,，在一定濃度范圍內(nèi)顏色深淺與濃度成正比,。該試劑盒主要用于測定

植物組織中的游離含量，僅用于科研領(lǐng)域,，不宜用于臨床診斷或其他用途,。

操作步驟(僅供參考)：

1、取內(nèi)徑為8mm的玻璃試管2支,，分別加入白陶土-腦磷脂混懸液0.2ml,。

2、靜脈采血1ml,，立即取下針頭,，沿管壁向各試管注入血液0.5ml，立即混勻并啟動(dòng)秒表計(jì)時(shí),，并置于37℃水浴中,。

3、每隔10s輕搖試管一次,，觀察管內(nèi)血液流動(dòng)情況,，直至血液凝固。記錄血液凝固所需時(shí)間,，即為ACT,。

4、取2支試管血液凝固時(shí)間的平均值作為ACT 值,。

計(jì)算：參考區(qū)間： (1.77±0.76)min

4,、配制標(biāo)準(zhǔn)品工作液︰如果檢測血清、尿液等樣品,，按取丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)(6mg/ml):蒸餾水=1：99的比例配制,，使?jié)舛冗_(dá)到60μg/ml，如果檢測組織樣品按丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制,，使?jié)舛冗_(dá)到60μg/ml,。

注意事項(xiàng):

1、實(shí)驗(yàn)材料應(yīng)盡量新鮮,，如取材后不立即使用,，應(yīng)存于-20°C.

2、實(shí)驗(yàn)用蒸餾水不能含有二氧化碳,，可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水,，并蓋緊口。

3,、TA滴定液為堿性溶液,，有腐蝕性，請小心操作,。

4,、TA標(biāo)定液容易長菌，宜4℃保存,，一旦發(fā)現(xiàn)有絮狀物請棄用,。

5、果實(shí)中含酸量較少時(shí)可將TA滴定液適當(dāng)稀釋后使用,，可考慮用0.01~0.05M  TA滴定液進(jìn)行滴定,。

6、TA滴定液含量計(jì)算公式中,，V0最好為3次空白測定的平均值,。

7、如果所測樣品的濃度過高,，應(yīng)用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測定,，并將稀釋倍數(shù)帶入公式。

8,、如果樣品顏色較深,，滴定終點(diǎn)不易觀察,，應(yīng)采用電位滴定法。

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