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天然果膠類物質(zhì)以原果膠,、果膠(Pectin)、果膠酸的形態(tài)廣泛存在于植物的果實(shí),、根,、莖、葉中,，是細(xì)胞壁的一種組成成分,，

它們伴隨纖維素而存在，構(gòu)成相鄰細(xì)胞中間層粘結(jié)物,，使植物組織細(xì)胞緊緊黏結(jié)在一起,。原果膠是不溶于水的物質(zhì)，但可在酸

,、堿,、鹽等化學(xué)試劑及酶的作用下，加水分解轉(zhuǎn)變成水溶性果膠,。果膠(Pectin)又稱多聚半乳糖醛酸,，是由D-半乳糖醛酸以α-1,4

糖苷鍵連接形成的直鏈狀聚合物，本質(zhì)上是一種線形的多糖聚合物,，含有數(shù)百至約1000個(gè)脫水半乳糖醛酸殘基,，

其相應(yīng)的平均相對分子質(zhì)量為50000~150000。

可溶性果膠(SP)檢測試劑盒(咔唑比色法)檢測原理是果膠物質(zhì)水解生成半乳糖醛酸,，后者在硫酸溶液中與咔唑進(jìn)行縮合

反應(yīng)形成紫紅色的化合物,，該化合物呈色強(qiáng)度與半乳糖醛酸濃度成正比，該化合物顏色在反應(yīng)1~2h內(nèi)呈色最深,，當(dāng)反應(yīng)液顏色

最深時(shí)在波長530nm處測定吸光度,，通過與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，計(jì)算出樣品中可溶性果膠含量,。該試劑盒主要用于定量檢測植物組織

或果實(shí)中可溶性果膠含量,，該50T試劑盒可以檢測50~60個(gè)樣品。該產(chǎn)品僅用于科研領(lǐng)域,，不宜用于臨床診斷或其他用途,。

操作步驟(僅供參考)：

1、取內(nèi)徑為8mm的玻璃試管2支,，分別加入白陶土-腦磷脂混懸液0.2ml,。

2,、靜脈采血1ml,，立即取下針頭,，沿管壁向各試管注入血液0.5ml，立即混勻并啟動(dòng)秒表計(jì)時(shí),，并置于37℃水浴中,。

3、每隔10s輕搖試管一次,，觀察管內(nèi)血液流動(dòng)情況,，直至血液凝固。記錄血液凝固所需時(shí)間,，即為ACT,。

4、取2支試管血液凝固時(shí)間的平均值作為ACT 值,。

計(jì)算：參考區(qū)間： (1.77±0.76)min

4,、配制標(biāo)準(zhǔn)品工作液︰如果檢測血清、尿液等樣品,，按取丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)(6mg/ml):蒸餾水=1：99的比例配制,，使?jié)舛冗_(dá)到60μg/ml，如果檢測組織樣品按丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制,，使?jié)舛冗_(dá)到60μg/ml,。

注意事項(xiàng):

1、實(shí)驗(yàn)材料應(yīng)盡量新鮮,，如取材后不立即使用,，應(yīng)存于-20°C.

2、實(shí)驗(yàn)用蒸餾水不能含有二氧化碳,，可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水,，并蓋緊口。

3,、TA滴定液為堿性溶液,，有腐蝕性，請小心操作,。

4,、TA標(biāo)定液容易長菌，宜4℃保存,，一旦發(fā)現(xiàn)有絮狀物請棄用,。

5、果實(shí)中含酸量較少時(shí)可將TA滴定液適當(dāng)稀釋后使用,，可考慮用0.01~0.05M  TA滴定液進(jìn)行滴定,。

6,、TA滴定液含量計(jì)算公式中，V0最好為3次空白測定的平均值,。

7,、如果所測樣品的濃度過高，應(yīng)用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測定,，并將稀釋倍數(shù)帶入公式,。

8、如果樣品顏色較深,，滴定終點(diǎn)不易觀察,，應(yīng)采用電位滴定法。

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