目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>試劑盒>>檢測試劑盒>> YS0259酸溶血定性檢測試劑盒
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
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貨號 | YS0259 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥,綜合 |
酸溶血定性檢測試劑盒,,是血液中數(shù)量最多的一種血細胞,脊椎動物體內通過RBC運送氧氣,,
RBC同時還具有免疫功能,,在貧血檢查中可通過蔗糖水溶血試驗來檢測紅細胞膜的缺陷,尤其適用于檢測陣發(fā)性睡眠性血
紅蛋白尿癥(paroxysmal nocturnal hemoglobinuria, PNH),,該癥為獲得性紅細胞膜缺陷引起的慢性血管內溶血,,常在
睡眠時加重,,可伴發(fā)性血紅蛋白尿和全血細胞減少。
采用光電比色法,,是利用含蔗糖溶液的低離子強度孵育紅細胞,,可大大促進補體與
紅細胞膜的結合,使對補體敏感的紅細胞膜上形成小孔,,蔗糖水進入紅細胞內引起紅細胞膜破裂,,使PNH對補體敏感的紅
細胞溶血,主要用于檢測人、動物血液的紅細胞膜的缺陷,,尤其用于鑒定陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥,,用光電比色法求出溶
血百分比。該試劑盒僅用于科研領域,,不適用于臨床診斷或其他用途,。
三、自備材料:
1,、離心管或小試管
2,、蒸餾水
3、酶標儀,、96孔板
四,、操作步驟(僅供參考):
1、配制組織勻漿液(1×)∶取10ml組織勻漿液(3×)加入20ml蒸餾水即成,。
2,、配制PA Assay Buffer (1x)∶取10ml PA Assay Buffer (1.5×)加入5ml蒸餾水即成。
3,、準備樣品︰
①血清,、尿液及其他體液樣品:血清按照常規(guī)方法制備后可以直接用于本試劑盒的測定,尿液通常也可以直接用于測定,,-20°C凍存,。
②組織樣品︰稱取1g組織樣品置于勻漿器中,再加入1ml組織勻漿液(1x)仔細研磨,,振搖提取靜置30min ,取上清液4000rpm離心10min ,取上清液,用組織勻漿液(1×)定容至2ml , -20℃凍存,,用于PA的檢測。
③植物材料︰稱取1g植物材料置于勻漿器中,,再加入1ml組織勻漿液(1×)仔細研磨,,振搖提取,靜置30min ,取上清液4000rpm離心10min ,取上清液,用組織勻漿液(1×)定容至2ml , -20℃凍存,用于PA的檢測,。
④高濃度樣品:如果樣品中含有較高濃度的PA,,可以使用原有的裂解液或PBS等進行稀釋,如雞血清可稀釋5~10倍后檢測,。
4,、配制標準品工作液︰如果檢測血清,、尿液等樣品,按取丙酮酸標準(6mg/ml):蒸餾水=1:99的比例配制,,使?jié)舛冗_到60μg/ml,,如果檢測組織樣品按丙酮酸標準(6mg/ml) :組織勻漿液(1×)=1:99的比例配制,使?jié)舛冗_到60μg/ml,。
注意事項:
1,、實驗材料應盡量新鮮,如取材后不立即使用,,應存于-20°C.
2,、實驗用蒸餾水不能含有二氧化碳,可用新煮沸且冷卻后的蒸餾水,,并蓋緊口,。
3、TA滴定液為堿性溶液,,有腐蝕性,,請小心操作。
4,、TA標定液容易長菌,,宜4℃保存,一旦發(fā)現(xiàn)有絮狀物請棄用,。
5,、果實中含酸量較少時可將TA滴定液適當稀釋后使用,可考慮用0.01~0.05M TA滴定液進行滴定,。
6,、TA滴定液含量計算公式中,V0最好為3次空白測定的平均值,。
7,、如果所測樣品的濃度過高,應用TA Lysis Buffer工作液稀釋樣品后重新測定,,并將稀釋倍數(shù)帶入公式,。
8,、如果樣品顏色較深,,滴定終點不易觀察,應采用電位滴定法,。
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