目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>ATCC細(xì)胞>>ATCC原裝細(xì)胞系>> YS1237COUMS-27人骨肉瘤細(xì)胞ATCC
供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | T25瓶/2冷凍管 |
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貨號 | YS1237C | 主要用途 | 科研實驗 |
細(xì)胞名稱:OUMS-27人骨肉瘤細(xì)胞ATCC
細(xì)胞代次:P4
細(xì)胞規(guī)格:T25瓶(包郵)/2冷凍管(需加干冰運輸費)
細(xì)胞凍存:無血清凍存液
細(xì)胞傳代:第一次建議1:2
細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細(xì)胞的最好辦法,。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個細(xì)胞瓶,消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴(yán)格無菌操作,,將細(xì)胞瓶放入37℃,、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),,前三天照片是重要售后依據(jù),不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好,。(注意密封培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱時要將蓋子擰松,,傳代后建議一瓶用原瓶的培養(yǎng)基,,另外一瓶用自己配的培養(yǎng)基,,以便進(jìn)行對比培養(yǎng))
培養(yǎng)條件:
RPMI-1640+10% FBS+0.05mM β-巰基乙醇+1% 雙抗
到貨處理
用75%酒精棉球擦拭 T25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部,,觀察細(xì)胞生長情況,。
1.不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞放入 37℃培養(yǎng)箱中靜置 3-4 小時后再做處理,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
2.通過離心的方式收集細(xì)胞,,然后將細(xì)胞沉淀加入5-8ml的培養(yǎng)基輕輕吹打均勻后移入新的T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),。
培養(yǎng)時的注意技巧
1.換液前將培養(yǎng)瓶豎在培養(yǎng)箱靜置1小時左右,,輕輕吸掉3ml左右培養(yǎng)基,,然后加入3ml的新鮮培養(yǎng)基,,混勻后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
2.如果細(xì)胞密度比較稀,培養(yǎng)基沒有明顯變化,,可以加入500ul的FBS混勻后,,豎著培養(yǎng)。
3.傳代時,,先按照換液步驟處理,,吸掉3ml左右培養(yǎng)基后,加入10ml的新鮮培養(yǎng)基,混勻后分2個T25培養(yǎng)瓶培養(yǎng),。
4.培養(yǎng)一周左右可以離心一次,,以去除一些死細(xì)胞,。
5.該細(xì)胞比較脆弱,培養(yǎng)過程中不要頻繁拿出來觀察,,以免影響細(xì)胞的生長,。
6.該細(xì)胞的生長環(huán)境比較敏感,,需使用較好的血清培養(yǎng)。
7.建議使用未TC處理的瓶或者皿培養(yǎng),。
訂購建議:
為避免收到細(xì)胞后離心處理,,推薦使用15ml離心管發(fā)貨,,
到貨后直接分裝到2個T25培養(yǎng)瓶即可,。
注意事項:有些細(xì)胞比較特殊,,如貼壁不牢,在運輸過程中發(fā)生容易細(xì)胞脫落,,這是正?,F(xiàn)象。請將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,,1000rpm離心5min,,收集上清作過渡培養(yǎng)(后期對比培養(yǎng)),沉淀加入消化液1-2ml,,輕輕吹打,,重懸,消化1-2分鐘后,,加5ml培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,棄上清,,加1-2ml培養(yǎng)基重懸,。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個T25),補(bǔ)充新的培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,,最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。
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