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細胞名稱：PANC-28人胰腺癌細胞ATCC

細胞代次：P4

細胞規(guī)格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運輸費）

細胞凍存：無血清凍存液

細胞傳代：第一次建議1:2

細胞收到后處理

培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細胞的最好辦法,。收到細胞用75%酒精噴灑整個細胞瓶，消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴格無菌操作,，將細胞瓶放入37℃,、5%CO₂的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細胞生長情況,，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（最好40x,100x,200x各一張）,，前三天照片是重要售后依據(jù)，不提供照片默認收到狀態(tài)良好,。（注意密封培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱時要將蓋子擰松,，傳代后建議一瓶用原瓶的培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的培養(yǎng)基,，以便進行對比培養(yǎng)）

培養(yǎng)前的工作準備充分

包括耗材的處理,、試劑的配置，無菌檢驗等等,。

玻璃器皿的清洗,。對于玻璃器皿（細胞瓶、裝營養(yǎng)液的瓶子,、小青m素瓶等）要先用洗衣粉刷干凈（注意死角）,，然后沖干凈。用酸液浸泡 24 h 以上,，之后用清水沖洗 10 遍,，除去殘留酸液。瓶子之類,，沖洗過程要使勁搖晃,。然后在雙蒸水浸泡 24 h。晾干后包扎,，160℃ 干烤 2 h 待用,。

試劑配置,。細胞培養(yǎng)用的液體一般使用雙蒸以上的水即可。并注意 pH 值的調(diào)節(jié),。

無菌檢驗,。主要采用過濾除菌：如抗生素、G-418 溶液,、各類培養(yǎng)基,、丙酮酸鈉等。有些可以采用高壓滅菌,，如 PBS,、D-Hank's等。

試劑分裝保存

包括營養(yǎng)液,、血清等,。

血清特別重要。血清必須貯存于 –20℃,，如果一次無法用完一瓶,，可將 40～50ml 分裝于無菌酸處理瓶中，甚至置青m素瓶保存,。一般廠商提供的血清為無菌,，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,，勿直接過濾血清。（一般情況下不影響細胞培養(yǎng)）

瓶裝血清一定要逐步解凍: 4℃ 冰箱全溶后再分裝,，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生,。勿直接由 –20℃ 直接至 37℃ 解凍,，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結而發(fā)生沉淀,。

熱滅活是指 56℃,，30 分鐘加熱已解凍之血清。水浴鍋升到 56℃后,，將血清放入,，待溫度升高到 56℃ 后計時，一般 5 分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次,。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化,。除非必須，一般不要作此熱處理,，因為會造成沉淀物之顯著增多,，且會影響血清之品質(zhì),。注意更換新血清（包括不同批次）對細胞的影響。

注意事項：有些細胞比較特殊,，如貼壁不牢，在運輸過程中發(fā)生容易細胞脫落,，這是正?，F(xiàn)象。請將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,，1000rpm離心5min,，收集上清作過渡培養(yǎng)（后期對比培養(yǎng)），沉淀加入消化液1-2ml,，輕輕吹打,，重懸，消化1-2分鐘后,，加5ml培養(yǎng)基終止反應,。再離心，棄上清,，加1-2ml培養(yǎng)基重懸,。然后按1:2比例進行分瓶傳代（兩個T25），補充新的培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,，最后放入37℃,5%CO₂細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

YS1199CHOK人正常口腔角質(zhì)細胞

YS1200CYES2人食管鱗癌細胞

YS1201CHCC4006人肺腺癌細胞

YS1202CA1847人卵巢癌細胞

YS1203CSW1088人腦星形膠質(zhì)瘤細胞

YS1204CHGSMC人胃平滑肌細胞

YS1205CNUGC-4人胃癌細胞

YS1206CJB6人彌漫大細胞淋巴瘤細胞

YS1207COVCAR8人卵巢癌細胞

YS1208CNCI-H498人結直腸腺癌細胞

YS1209CCL1-0人肺腺癌細胞

YS1210CNCI-H165人非小細胞肺癌細胞

YS1211CIAR-20大鼠肝細胞

YS1212COV90人卵巢癌細胞

YS1213CLPC-H12小鼠肝癌細胞

YS1214CHBdSMC人膀胱平滑肌細胞

YS1215CTE-11人口腔鱗癌細胞

YS1216CIM9人外周血B淋巴細胞

YS1217CTca-83人口腔鱗癌細胞

YS1218CCMT-64小鼠肺腺癌細胞

YS1219CNCI-H1573人非小細胞肺癌細胞

YS1220CJC小鼠乳腺癌細胞

YS1221CNCI-H841人小細胞肺癌細胞

YS1222CUM-RC-2人腎透明細胞癌細胞

YS1223CMCMEC小鼠心臟微血管內(nèi)皮細胞

YS1224COCI-LY8人彌漫大B淋巴瘤細胞

YS1225CLN382人腦膠質(zhì)瘤細胞

YS1226CMPASMC小鼠肺動脈平滑肌細胞

YS1227CSK-N-BE(2)-C人神經(jīng)母細胞瘤細胞

YS1228CNCI-H2107人小細胞肺癌細胞

YS1229CN1S1大鼠肝癌細胞

YS1230CRIN-14B大鼠胰島素瘤細胞

YS1231CFHL124人晶狀體上皮細胞

YS1232COLN-93大鼠膠質(zhì)細胞

YS1233CTGW人神經(jīng)母細胞瘤細胞

YS1234CPLMVEC豬肺微血管內(nèi)皮細胞

YS1235CCAMA-1人乳腺癌細胞

YS1236CHCC1599人乳腺管癌細胞

YS1237COUMS-27人骨肉瘤細胞

YS1238CB6Tert-1人滋養(yǎng)層細胞

YS1239CSN12C人腎癌細胞

YS1240CNCI-H378人小細胞肺癌細胞

YS1241CSHIN-3人卵巢漿液性囊腺癌細胞

YS1242CDaoy人髓母細胞瘤細胞

YS1243CHFB人皮膚成纖維細胞

YS1244CLAC人肺癌細胞

YS1245CCZ-1人多發(fā)性骨髓瘤細胞

YS1246CLTEP-a2人肺腺癌細胞

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