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供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | T25瓶/2冷凍管 |
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貨號 | YS1182C | 主要用途 | 科研實驗 |
細胞名稱:SCC7小鼠鱗狀細胞癌細胞ATCC
細胞代次:P4
細胞規(guī)格:T25瓶(包郵)/2冷凍管(需加干冰運輸費)
細胞凍存:無血清凍存液
細胞傳代:第一次建議1:2
細胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細胞的最好辦法。收到細胞用75%酒精噴灑整個細胞瓶,,消毒后放到超凈臺內嚴格無菌操作,,將細胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài)后再做處理,。顯微鏡觀察細胞生長情況,,并對細胞進行不同倍數拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),前三天照片是重要售后依據,,不提供照片默認收到狀態(tài)良好,。(注意密封培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱時要將蓋子擰松,傳代后建議一瓶用原瓶的培養(yǎng)基,,另外一瓶用自己配的培養(yǎng)基,,以便進行對比培養(yǎng))
培養(yǎng)前的工作準備充分
包括耗材的處理、試劑的配置,,無菌檢驗等等,。
玻璃器皿的清洗,。對于玻璃器皿(細胞瓶、裝營養(yǎng)液的瓶子,、小青m素瓶等)要先用洗衣粉刷干凈(注意死角),,然后沖干凈。用酸液浸泡 24 h 以上,,之后用清水沖洗 10 遍,,除去殘留酸液。瓶子之類,,沖洗過程要使勁搖晃,。然后在雙蒸水浸泡 24 h。晾干后包扎,,160℃ 干烤 2 h 待用,。
試劑配置。細胞培養(yǎng)用的液體一般使用雙蒸以上的水即可,。并注意 pH 值的調節(jié),。
無菌檢驗。主要采用過濾除菌:如抗生素,、G-418 溶液,、各類培養(yǎng)基、丙酮酸鈉等,。有些可以采用高壓滅菌,,如 PBS、D-Hank's等,。
試劑分裝保存
包括營養(yǎng)液,、血清等。
血清特別重要,。血清必須貯存于 –20℃,,如果一次無法用完一瓶,可將 40~50ml 分裝于無菌酸處理瓶中,,甚至置青m素瓶保存。一般廠商提供的血清為無菌,,不需再無菌過濾,。若發(fā)現血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內一起過濾,,勿直接過濾血清,。(一般情況下不影響細胞培養(yǎng))
瓶裝血清一定要逐步解凍: 4℃ 冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),,使溫度與成分均一,,減少沉淀的發(fā)生,。勿直接由 –20℃ 直接至 37℃ 解凍,因溫度改變太大,,容易造成蛋白質凝結而發(fā)生沉淀,。
熱滅活是指 56℃,30 分鐘加熱已解凍之血清,。水浴鍋升到 56℃后,,將血清放入,待溫度升高到 56℃ 后計時,,一般 5 分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次,。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化。除非必須,,一般不要作此熱處理,,因為會造成沉淀物之顯著增多,且會影響血清之品質,。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響,。
注意事項:有些細胞比較特殊,如貼壁不牢,,在運輸過程中發(fā)生容易細胞脫落,,這是正常現象,。請將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,,1000rpm離心5min,收集上清作過渡培養(yǎng)(后期對比培養(yǎng)),,沉淀加入消化液1-2ml,,輕輕吹打,重懸,,消化1-2分鐘后,,加5ml培養(yǎng)基終止反應。再離心,,棄上清,,加1-2ml培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代(兩個T25),,補充新的培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,,最后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
YS1172CNOK人正常鱗狀上皮細胞
YS1173CKU812F人外周血嗜堿性白血病細胞
YS1174CMH-22A小鼠肝癌細胞
YS1175CCEM-T4人急性T淋巴細胞白血病細胞
YS1176CINS-1E大鼠胰島素瘤細胞
YS1177CRCF大鼠心肌成纖維細胞
YS1178CRWPE-2人前列腺上皮細胞
YS1179CSUM102PT人乳腺癌細胞
YS1180CL78人肺腺鱗癌細胞
YS1181COSC-19人舌鱗癌細胞
YS1182CSCC7小鼠鱗狀細胞癌細胞
YS1183CHCC38人乳腺管癌細胞
YS1184CKM932人B淋巴細胞
YS1185CEU-4人急性髓系白血病細胞
YS1186CEU-2人急性髓系白血病細胞
YS1187CLL/2(LLC1)小鼠肺癌細胞
YS1188CNCI-H2141人小細胞肺癌細胞
YS1189CMOLM-16人急性髓系白血病細胞
YS1190CMB39小鼠腦瘤細胞
YS1191CHN6人舌鱗癌細胞
YS1192CEFM-19人乳腺管癌細胞
YS1193COVTOKO人卵巢透明細胞癌細胞
YS1194CHFSF人胚胎眼鞏膜成纖維細胞
YS1195CHeyA8人卵巢癌細胞
YS1196CPANC-28人胰腺癌細胞
YS1197CSK-RC-20人腎癌細胞
YS1198CTU177人喉鱗癌細胞
YS1199CHOK人正??谇唤琴|細胞
YS1200CYES2人食管鱗癌細胞
YS1201CHCC4006人肺腺癌細胞
YS1202CA1847人卵巢癌細胞
YS1203CSW1088人腦星形膠質瘤細胞
YS1204CHGSMC人胃平滑肌細胞
YS1205CNUGC-4人胃癌細胞
YS1206CJB6人彌漫大細胞淋巴瘤細胞
YS1207COVCAR8人卵巢癌細胞
YS1208CNCI-H498人結直腸腺癌細胞
YS1209CCL1-0人肺腺癌細胞
YS1210CNCI-H165人非小細胞肺癌細胞
YS1211CIAR-20大鼠肝細胞
YS1212COV90人卵巢癌細胞
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