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細(xì)胞名稱(chēng)：GL261小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞ATCC

細(xì)胞代次：P4

細(xì)胞規(guī)格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運(yùn)輸費(fèi)）

細(xì)胞凍存：無(wú)血清凍存液

細(xì)胞傳代：第一次建議1:2

細(xì)胞收到后處理

培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿(mǎn)培養(yǎng)液并封好瓶口是運(yùn)輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個(gè)細(xì)胞瓶,，消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)嚴(yán)格無(wú)菌操作,，將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO₂的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理,。顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（最好40x,100x,200x各一張），前三天照片是重要售后依據(jù),，不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好,。（注意密封培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱時(shí)要將蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶的培養(yǎng)基,，另外一瓶用自己配的培養(yǎng)基,，以便進(jìn)行對(duì)比培養(yǎng)）

培養(yǎng)前的工作準(zhǔn)備充分

包括耗材的處理、試劑的配置,，無(wú)菌檢驗(yàn)等等,。

玻璃器皿的清洗。對(duì)于玻璃器皿（細(xì)胞瓶,、裝營(yíng)養(yǎng)液的瓶子,、小青m素瓶等）要先用洗衣粉刷干凈（注意死角）,，然后沖干凈。用酸液浸泡 24 h 以上,，之后用清水沖洗 10 遍,，除去殘留酸液。瓶子之類(lèi),，沖洗過(guò)程要使勁搖晃,。然后在雙蒸水浸泡 24 h。晾干后包扎,，160℃ 干烤 2 h 待用,。

試劑配置,。細(xì)胞培養(yǎng)用的液體一般使用雙蒸以上的水即可,。并注意 pH 值的調(diào)節(jié)。

無(wú)菌檢驗(yàn),。主要采用過(guò)濾除菌：如抗生素,、G-418 溶液、各類(lèi)培養(yǎng)基,、丙酮酸鈉等,。有些可以采用高壓滅菌，如 PBS,、D-Hank's等,。

試劑分裝保存

包括營(yíng)養(yǎng)液、血清等,。

血清特別重要,。血清必須貯存于 –20℃，如果一次無(wú)法用完一瓶,，可將 40～50ml 分裝于無(wú)菌酸處理瓶中,，甚至置青m素瓶保存。一般廠(chǎng)商提供的血清為無(wú)菌,，不需再無(wú)菌過(guò)濾,。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾,，勿直接過(guò)濾血清,。（一般情況下不影響細(xì)胞培養(yǎng)）

瓶裝血清一定要逐步解凍: 4℃ 冰箱全溶后再分裝，在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),，使溫度與成分均一,，減少沉淀的發(fā)生。勿直接由 –20℃ 直接至 37℃ 解凍,，因溫度改變太大,，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀,。

熱滅活是指 56℃，30 分鐘加熱已解凍之血清,。水浴鍋升到 56℃后,，將血清放入，待溫度升高到 56℃ 后計(jì)時(shí),，一般 5 分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次,。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化。除非必須,，一般不要作此熱處理,，因?yàn)闀?huì)造成沉淀物之顯著增多，且會(huì)影響血清之品質(zhì),。注意更換新血清（包括不同批次）對(duì)細(xì)胞的影響,。

注意事項(xiàng)：有些細(xì)胞比較特殊，如貼壁不牢,，在運(yùn)輸過(guò)程中發(fā)生容易細(xì)胞脫落,，這是正常現(xiàn)象,。請(qǐng)將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,，1000rpm離心5min，收集上清作過(guò)渡培養(yǎng)（后期對(duì)比培養(yǎng)）,，沉淀加入消化液1-2ml,，輕輕吹打，重懸,，消化1-2分鐘后,，加5ml培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,，棄上清,，加1-2ml培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個(gè)T25）,，補(bǔ)充新的培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,，最后放入37℃,5%CO₂細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

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YS1187P大鼠支氣管成纖維原代細(xì)胞

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YS1189P大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮原代細(xì)胞

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YS1196P大鼠食管上皮原代細(xì)胞

YS1197P大鼠食管平滑肌原代細(xì)胞

YS1198P大鼠腸平滑肌原代細(xì)胞

YS1199P大鼠腸黏膜上皮原代細(xì)胞

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YS1203P大鼠胃黏膜上皮原代細(xì)胞

YS1204P大鼠肝竇內(nèi)皮原代細(xì)胞

YS1205P大鼠肝星狀原代細(xì)胞

YS1206P大鼠直腸平滑肌原代細(xì)胞

YS1207P大鼠小腸平滑肌原代細(xì)胞

YS1208P大鼠結(jié)腸平滑肌原代細(xì)胞

YS1209P大鼠小腸黏膜上皮原代細(xì)胞

YS1210P大鼠子宮內(nèi)膜上皮原代細(xì)胞

YS1211P大鼠卵巢顆粒原代細(xì)胞

YS1212P大鼠子宮頸上皮原代細(xì)胞

輔酶ⅠNAD(H)含量測(cè)試盒微量法100管/48樣

輔酶ⅠNAD(H)含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/24樣

NAD激酶（NADK）測(cè)試盒微量法100管/48樣

NAD激酶（NADK）測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/24樣

乳酸脫氫酶（LDH）測(cè)試盒微量法100管/48樣

乳酸脫氫酶（LDH）測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/24樣

乳酸脫氫酶（LDH）測(cè)試盒微量法100管/48樣

乳酸脫氫酶（LDH）測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/24樣

NAD-蘋(píng)果酸脫氫酶（NAD-MDH）測(cè)試盒微量法100管/96樣

NAD-蘋(píng)果酸脫氫酶（NAD-MDH）測(cè)試盒紫外分光光度法50管/48樣

NADP-蘋(píng)果酸脫氫酶（NADP-MDH）測(cè)試盒微量法100管/96樣

NADP-蘋(píng)果酸脫氫酶（NADP-MDH）測(cè)試盒紫外分光光度法50管/48樣

線(xiàn)粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH-輔酶Q還原酶測(cè)試盒微量法100管/96樣

線(xiàn)粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH-輔酶Q還原酶測(cè)試盒紫外分光光度法25管/24樣

NADH氧化酶（NOX）測(cè)試盒微量法100管/96樣

NADH氧化酶（NOX）測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/48樣

檸檬酸合酶(CS）測(cè)試盒微量法100管/48樣

檸檬酸合酶(CS）測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/24樣

檸檬酸合酶(CS）測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法25管/12樣

丙酮酸脫羧酶（PDC）測(cè)試盒微量法100管/96樣

丙酮酸脫羧酶（PDC）測(cè)試盒紫外分光光度法50管/48樣

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