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細(xì)胞名稱：MPASMC小鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞ATCC

細(xì)胞代次：P4

細(xì)胞規(guī)格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運(yùn)輸費(fèi)）

細(xì)胞凍存：無血清凍存液

細(xì)胞傳代：第一次建議1:2

培養(yǎng)條件：

RPMI-1640＋10% FBS＋0.05mM β-巰基乙醇＋1% 雙抗

到貨處理

用75%酒精棉球擦拭 T25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部,，觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

1.不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞放入 37℃培養(yǎng)箱中靜置 3-4 小時(shí)后再做處理,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2.通過離心的方式收集細(xì)胞,，然后將細(xì)胞沉淀加入5-8ml的培養(yǎng)基輕輕吹打均勻后移入新的T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),。

培養(yǎng)時(shí)的注意技巧

1.換液前將培養(yǎng)瓶豎在培養(yǎng)箱靜置1小時(shí)左右，輕輕吸掉3ml左右培養(yǎng)基,，然后加入3ml的新鮮培養(yǎng)基,，混勻后放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

2.如果細(xì)胞密度比較稀,，培養(yǎng)基沒有明顯變化,，可以加入500ul的FBS混勻后，豎著培養(yǎng),。

3.傳代時(shí),，先按照換液步驟處理，吸掉3ml左右培養(yǎng)基后,，加入10ml的新鮮培養(yǎng)基,，混勻后分2個(gè)T25培養(yǎng)瓶培養(yǎng),。

4.培養(yǎng)一周左右可以離心一次，以去除一些死細(xì)胞,。

5.該細(xì)胞比較脆弱，培養(yǎng)過程中不要頻繁拿出來觀察,，以免影響細(xì)胞的生長(zhǎng),。

6.該細(xì)胞的生長(zhǎng)環(huán)境比較敏感，需使用較好的血清培養(yǎng),。

7.建議使用未TC處理的瓶或者皿培養(yǎng),。

注意事項(xiàng)：有些細(xì)胞比較特殊，如貼壁不牢,，在運(yùn)輸過程中發(fā)生容易細(xì)胞脫落,，這是正常現(xiàn)象,。請(qǐng)將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,，1000rpm離心5min，收集上清作過渡培養(yǎng)（后期對(duì)比培養(yǎng)）,，沉淀加入消化液1-2ml,，輕輕吹打，重懸,，消化1-2分鐘后,，加5ml培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,，棄上清,，加1-2ml培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個(gè)T25）,，補(bǔ)充新的培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,，最后放入37℃,5%CO₂細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

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YS1188P大鼠肺大動(dòng)脈平滑肌原代細(xì)胞

YS1189P大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮原代細(xì)胞

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YS1206P大鼠直腸平滑肌原代細(xì)胞

YS1207P大鼠小腸平滑肌原代細(xì)胞

YS1208P大鼠結(jié)腸平滑肌原代細(xì)胞

YS1209P大鼠小腸黏膜上皮原代細(xì)胞

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