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供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | T25瓶/2冷凍管 |
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貨號 | YS1008C | 主要用途 | 科研實驗 |
細胞名稱:HBZY-1大鼠腎小球系膜細胞ATCC
細胞代次:P4
細胞規(guī)格:T25瓶(包郵)/2冷凍管(需加干冰運輸費)
細胞凍存:無血清凍存液
細胞傳代:第一次建議1:2
細胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細胞的最好辦法,。收到細胞用75%酒精噴灑整個細胞瓶,,消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴格無菌操作,將細胞瓶放入37℃,、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細胞狀態(tài)后再做處理,。顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),,前三天照片是重要售后依據(jù),,不提供照片默認收到狀態(tài)良好。(注意密封培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱時要將蓋子擰松,,傳代后建議一瓶用原瓶的培養(yǎng)基,,另外一瓶用自己配的培養(yǎng)基,以便進行對比培養(yǎng))
培養(yǎng)前的工作準備充分
包括耗材的處理,、試劑的配置,,無菌檢驗等等。
玻璃器皿的清洗,。對于玻璃器皿(細胞瓶,、裝營養(yǎng)液的瓶子、小青m素瓶等)要先用洗衣粉刷干凈(注意死角),,然后沖干凈,。用酸液浸泡 24 h 以上,之后用清水沖洗 10 遍,,除去殘留酸液,。瓶子之類,沖洗過程要使勁搖晃,。然后在雙蒸水浸泡 24 h,。晾干后包扎,,160℃ 干烤 2 h 待用,。
試劑配置。細胞培養(yǎng)用的液體一般使用雙蒸以上的水即可,。并注意 pH 值的調(diào)節(jié),。
無菌檢驗。主要采用過濾除菌:如抗生素,、G-418 溶液,、各類培養(yǎng)基、丙酮酸鈉等,。有些可以采用高壓滅菌,,如 PBS、D-Hank's等,。
試劑分裝保存
包括營養(yǎng)液,、血清等,。
血清特別重要。血清必須貯存于 –20℃,,如果一次無法用完一瓶,,可將 40~50ml 分裝于無菌酸處理瓶中,甚至置青m素瓶保存,。一般廠商提供的血清為無菌,,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,,勿直接過濾血清。(一般情況下不影響細胞培養(yǎng))
瓶裝血清一定要逐步解凍: 4℃ 冰箱全溶后再分裝,,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),,使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生,。勿直接由 –20℃ 直接至 37℃ 解凍,,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀,。
熱滅活是指 56℃,,30 分鐘加熱已解凍之血清。水浴鍋升到 56℃后,,將血清放入,,待溫度升高到 56℃ 后計時,一般 5 分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次,。此熱處理之目的是使血清中之補體成份去活化,。除非必須,一般不要作此熱處理,,因為會造成沉淀物之顯著增多,,且會影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清(包括不同批次)對細胞的影響,。
售后條款:
1.細胞出現(xiàn)問題,可重發(fā)的情況有哪些?判定標準是什么?
1. 細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失,、瓶身破損、培養(yǎng)液嚴重漏液等,重發(fā);
2. 細胞污染問題,請在收到產(chǎn)品48小時內(nèi),給我們提出真實的實驗結(jié)果,核實后重發(fā);
3. 常溫發(fā)貨的細胞靜置24小時后,干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇后24小時后,絕大多數(shù)細胞未存活,(需提供真實清晰的細胞狀態(tài)照片),重發(fā);
4. 干冰凍存發(fā)貨的細胞復(fù)蘇后24小時后或常溫發(fā)貨的細胞靜置4小時候并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
5. 活率問題,請在收到產(chǎn)品7天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果,用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,核實后予重發(fā);
6. 細胞收到當天以及第2,3天請拍照,3天未告知的,視為產(chǎn)品合格,。4-7天內(nèi)出現(xiàn)問題有提供收到細胞前3天照片和細胞出現(xiàn)問題時照片以及細胞相關(guān)操作的詳細步驟的,并跟技術(shù)人員溝通的,由技術(shù)人員判定為我方責(zé)任的,重發(fā),。技術(shù)人員判定為雙方承擔責(zé)任的由雙方進行協(xié)商處理或者按合同價的50%收費重發(fā)。
2.細胞出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
1. 客戶造成細胞污染,不重發(fā);
2. 客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
3. 非本庫推薦細胞培養(yǎng)體系致的細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
4. 細胞狀態(tài)不好,未提供細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
5. 細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
6. 細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
7. 視具體情況而定,。
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YS1207P大鼠小腸平滑肌原代細胞
YS1208P大鼠結(jié)腸平滑肌原代細胞
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YS1211P大鼠卵巢顆粒原代細胞
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