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細(xì)胞名稱：瘤T98G人膠質(zhì)母細(xì)胞ATCC

細(xì)胞代次：P4

細(xì)胞規(guī)格：T25瓶（包郵）/2冷凍管（需加干冰運(yùn)輸費(fèi)）

細(xì)胞凍存：無血清凍存液

細(xì)胞傳代：第一次建議1:2

細(xì)胞收到后處理

培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿培養(yǎng)液并封好瓶口是運(yùn)輸細(xì)胞的最好辦法,。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個(gè)細(xì)胞瓶，消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)嚴(yán)格無菌操作,，將細(xì)胞瓶放入37℃,、5%CO₂的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理。顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（最好40x,100x,200x各一張）,，前三天照片是重要售后依據(jù)，不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好,。（注意密封培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱時(shí)要將蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶的培養(yǎng)基,，另外一瓶用自己配的培養(yǎng)基,，以便進(jìn)行對(duì)比培養(yǎng)）

培養(yǎng)前的工作準(zhǔn)備充分

包括耗材的處理,、試劑的配置，無菌檢驗(yàn)等等,。

玻璃器皿的清洗,。對(duì)于玻璃器皿（細(xì)胞瓶、裝營(yíng)養(yǎng)液的瓶子,、小青m素瓶等）要先用洗衣粉刷干凈（注意死角）,，然后沖干凈。用酸液浸泡 24 h 以上,，之后用清水沖洗 10 遍,，除去殘留酸液。瓶子之類,，沖洗過程要使勁搖晃,。然后在雙蒸水浸泡 24 h。晾干后包扎,，160℃ 干烤 2 h 待用,。

試劑配置。細(xì)胞培養(yǎng)用的液體一般使用雙蒸以上的水即可,。并注意 pH 值的調(diào)節(jié),。

無菌檢驗(yàn)。主要采用過濾除菌：如抗生素,、G-418 溶液,、各類培養(yǎng)基、丙酮酸鈉等,。有些可以采用高壓滅菌,，如 PBS、D-Hank's等,。

試劑分裝保存

包括營(yíng)養(yǎng)液,、血清等。

血清特別重要,。血清必須貯存于 –20℃,，如果一次無法用完一瓶，可將 40～50ml 分裝于無菌酸處理瓶中,，甚至置青m素瓶保存,。一般廠商提供的血清為無菌，不需再無菌過濾,。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。（一般情況下不影響細(xì)胞培養(yǎng)）

瓶裝血清一定要逐步解凍: 4℃ 冰箱全溶后再分裝,，在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),，使溫度與成分均一，減少沉淀的發(fā)生,。勿直接由 –20℃ 直接至 37℃ 解凍,，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀,。

熱滅活是指 56℃,，30 分鐘加熱已解凍之血清。水浴鍋升到 56℃后,，將血清放入,，待溫度升高到 56℃ 后計(jì)時(shí)，一般 5 分鐘左右規(guī)則搖晃均勻一次,。此熱處理之目的是使血清中之補(bǔ)體成份去活化,。除非必須，一般不要作此熱處理,，因?yàn)闀?huì)造成沉淀物之顯著增多,，且會(huì)影響血清之品質(zhì)。注意更換新血清（包括不同批次）對(duì)細(xì)胞的影響,。

注意事項(xiàng)：有些細(xì)胞比較特殊,，如貼壁不牢，在運(yùn)輸過程中發(fā)生容易細(xì)胞脫落,，這是正?，F(xiàn)象。請(qǐng)將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,，1000rpm離心5min,，收集上清作過渡培養(yǎng)（后期對(duì)比培養(yǎng)），沉淀加入消化液1-2ml,，輕輕吹打,，重懸，消化1-2分鐘后,，加5ml培養(yǎng)基終止反應(yīng),。再離心，棄上清,，加1-2ml培養(yǎng)基重懸,。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代（兩個(gè)T25），補(bǔ)充新的培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,，最后放入37℃,5%CO₂細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

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YS934CNCI-H661[h661]肺癌細(xì)胞人大細(xì)胞

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YS936COV-90人卵巢癌細(xì)胞

YS937COVCAR-3人卵巢腺癌細(xì)胞

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YS940CPANC10.05人胰腺癌細(xì)胞

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YS943CPL45人胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞

YS944CProPakA.6人胚腎細(xì)胞

YS945CQSG-7701人正常肝細(xì)胞

YS946CRaji人淋巴瘤細(xì)胞

YS947CRD人橫紋肌肉瘤細(xì)胞

YS948CREH白血病細(xì)胞人急性非B非T淋巴細(xì)胞

YS949CRWPE-2人前列腺正常細(xì)胞

YS950C肺癌SBC-2人小細(xì)胞

YS951C熒光標(biāo)記SK-MEL-2+LUC人皮膚黑色素瘤細(xì)胞

YS952CSK-N-MC人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞

YS953C人腦膠質(zhì)瘤SNB-19

YS954CSV-HUC-1人膀胱上皮細(xì)胞

YS955CSW982[SW-982人滑膜肉瘤細(xì)胞

YS956CSW579人甲狀腺癌細(xì)胞

YS957CSW620人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

YS958C瘤T98G人膠質(zhì)母細(xì)胞

YS959CTF-1人紅白血病細(xì)胞

YS960CTT人甲狀腺癌細(xì)胞

YS961CTU686人喉癌細(xì)胞

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