目錄:上海雅吉生物科技有限公司>>ATCC細(xì)胞>>ATCC原裝細(xì)胞系>> YS662CM-NFS-60小鼠髓性白血病淋巴細(xì)胞ATCC
供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | T25瓶/2冷凍管 |
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貨號 | YS662C | 主要用途 | 科研實驗 |
細(xì)胞名稱:M-NFS-60小鼠髓性白血病淋巴細(xì)胞ATCC
細(xì)胞代次:P4
細(xì)胞規(guī)格:T25瓶(包郵)/2冷凍管(需加干冰運輸費)
細(xì)胞凍存:無血清凍存液
細(xì)胞傳代:第一次建議1:2
細(xì)胞收到后處理
培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿培養(yǎng)液并封好瓶口是運輸細(xì)胞的最好辦法。收到細(xì)胞用75%酒精噴灑整個細(xì)胞瓶,,消毒后放到超凈臺內(nèi)嚴(yán)格無菌操作,,將細(xì)胞瓶放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再做處理,。顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存(最好40x,100x,200x各一張),前三天照片是重要售后依據(jù),,不提供照片默認(rèn)收到狀態(tài)良好,。(注意密封培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱時要將蓋子擰松,傳代后建議一瓶用原瓶的培養(yǎng)基,,另外一瓶用自己配的培養(yǎng)基,,以便進(jìn)行對比培養(yǎng))
培養(yǎng)前的工作準(zhǔn)備充分
包括耗材的處理、試劑的配置,,無菌檢驗等等,。
玻璃器皿的清洗。對于玻璃器皿(細(xì)胞瓶,、裝營養(yǎng)液的瓶子,、小青m素瓶等)要先用洗衣粉刷干凈(注意死角),然后沖干凈,。用酸液浸泡 24 h 以上,,之后用清水沖洗 10 遍,除去殘留酸液。瓶子之類,,沖洗過程要使勁搖晃,。然后在雙蒸水浸泡 24 h。晾干后包扎,,160℃ 干烤 2 h 待用,。
試劑配置。細(xì)胞培養(yǎng)用的液體一般使用雙蒸以上的水即可,。并注意 pH 值的調(diào)節(jié),。
無菌檢驗。主要采用過濾除菌:如抗生素,、G-418 溶液,、各類培養(yǎng)基、丙酮酸鈉等,。有些可以采用高壓滅菌,,如 PBS、D-Hank's等,。
試劑分裝保存包括營養(yǎng)液,、血清等。
血清特別重要,。血清必須貯存于 –20℃,,如果一次無法用完一瓶,可將 40~50ml 分裝于無菌酸處理瓶中,,甚至置青m素瓶保存。一般廠商提供的血清為無菌,,不需再無菌過濾,。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,,勿直接過濾血清,。(一般情況下不影響細(xì)胞培養(yǎng))
瓶裝血清一定要逐步解凍: 4℃ 冰箱全溶后再分裝,在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),,使溫度與成分均一,,減少沉淀的發(fā)生。勿直接由 –20℃ 直接至 37℃ 解凍,,因溫度改變太大,,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
注意事項:有些細(xì)胞比較特殊,,如貼壁不牢,,在運輸過程中發(fā)生容易細(xì)胞脫落,這是正?,F(xiàn)象,。請將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,,1000rpm離心5min,收集上清作過渡培養(yǎng)(后期對比培養(yǎng)),,沉淀加入消化液1-2ml,,輕輕吹打,重懸,,消化1-2分鐘后,,加5ml培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,,棄上清,,加1-2ml培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進(jìn)行分瓶傳代(兩個T25),,補(bǔ)充新的培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,,最后放入37℃,5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
YS1099P小鼠血管外膜成纖維原代細(xì)胞
YS1100P小鼠大隱靜脈平滑肌原代細(xì)胞
YS1101P小鼠冠狀動脈平滑肌原代細(xì)胞
YS1102P小鼠大隱靜脈內(nèi)皮原代細(xì)胞
YS1103P小鼠冠狀動脈內(nèi)皮原代細(xì)胞
YS1104P小鼠滑膜原代細(xì)胞
YS1105P小鼠骨骼肌原代細(xì)胞
YS1106P小鼠真皮成纖維原代細(xì)胞
YS1107P小鼠軟骨原代細(xì)胞
YS1108P小鼠破骨原代細(xì)胞
YS1109P小鼠前脂肪原代細(xì)胞
YS1110P小鼠成骨原代細(xì)胞
YS1111P小鼠關(guān)節(jié)軟骨原代細(xì)胞
YS1112P小鼠表皮角質(zhì)形成原代細(xì)胞
YS1113P小鼠腦膜原代細(xì)胞
YS1114P小鼠海馬神經(jīng)元原代細(xì)胞
YS1115P小鼠腦微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞
YS1116P小鼠腦成纖維原代細(xì)胞
YS1117P小鼠神經(jīng)小膠質(zhì)原代細(xì)胞
YS1118P小鼠小腦顆粒原代細(xì)胞
YS1119P小鼠嗅鞘原代細(xì)胞
YS1120P小鼠視網(wǎng)膜Muller原代細(xì)胞
YS1121P小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)原代細(xì)胞
YS1122P小鼠角膜成纖維原代細(xì)胞
YS1123P小鼠睪丸支持原代細(xì)胞
YS1124P小鼠腹腔巨噬原代細(xì)胞
YS1125P小鼠心臟微血管內(nèi)皮原代細(xì)胞
YS1126P小鼠肝外膽管上皮原代細(xì)胞
YS1127P小鼠骨髓間充質(zhì)干原代細(xì)胞
YS1128P小鼠肝枯否原代細(xì)胞
YS1129P小鼠胚胎成纖維原代細(xì)胞
YS1130P小鼠脂肪間充質(zhì)干原代細(xì)胞
YS1131P小鼠神經(jīng)干原代細(xì)胞
YS1132P小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖原代細(xì)胞
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