細(xì)胞質(zhì)量決定實驗的進(jìn)程與結(jié)果,，相信很多小伙伴在細(xì)胞培養(yǎng)上走了不少彎路，事實上因為細(xì)胞污染而耽誤了實驗進(jìn)度,，影響畢業(yè)和發(fā)文章的進(jìn)程的事件時常發(fā)生,。
所以今天小編整理了一下細(xì)胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的一些現(xiàn)象與處理方法，希望可以幫到大家,。
一,、細(xì)菌污染
細(xì)菌污染最為常見，一旦操作稍有不當(dāng),，就會引起細(xì)胞污染,，細(xì)菌污染后顯微鏡下觀察呈現(xiàn)有黑色細(xì)條沙狀,，當(dāng)然,，根據(jù)感染的細(xì)菌不同，所呈現(xiàn)的狀態(tài)也不盡相同,，有球形,、桿狀等,，其次,，培養(yǎng)液發(fā)黃,，變渾濁,，可明顯看見培養(yǎng)皿中有細(xì)沙狀的沉淀物,，時不時還有異樣氣味發(fā)出,，如下圖所示：
處理方法：
在培養(yǎng)基中加入抗生素處理,，可以用四環(huán)素，慶大霉素,，或者鏈霉素,，前兩者的工作濃度是50 μg/mL;鏈霉素的工作濃度是100 μg/mL。但是，細(xì)胞本身也有影響,，狀態(tài)大不如從前,，所以,，防范于未然，正確操作,、嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作規(guī)范,，定期清理消毒培養(yǎng)設(shè)施才是關(guān)鍵!
二、真菌污染
真菌污染培養(yǎng)液清亮透明,，不會像細(xì)菌感染大爆發(fā),，所以很難早期發(fā)現(xiàn),，鏡下有時候象絲狀，有時候象珊瑚狀,，慢慢地會長出很細(xì)的黑色絲狀物,，這個時候，已經(jīng)晚了，細(xì)胞很難救活了,。
處理方法：趕緊扔掉，不要再想挽救,，即使再珍貴。然后消毒滅菌培養(yǎng)間,，CO2孵箱,，器皿和培養(yǎng)液。
三,、霉菌污染
同真菌感染一致,，因為培養(yǎng)液是清亮的，所以霉菌污染早期難以發(fā)現(xiàn),，等發(fā)現(xiàn)時往往已經(jīng)為時過晚了,。培養(yǎng)液中慢慢地出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物,，如同風(fēng)中柳絮,，一般不仔細(xì)看發(fā)覺不出來。細(xì)胞仍可生長,，但時間一長，細(xì)胞的狀態(tài)就變差,，不再增長,。見下圖。
處理方法：建議果斷舍棄該污染細(xì)胞,，將環(huán)境消毒,，因為霉菌的頑固可能會導(dǎo)致下幾批細(xì)胞都會污染，所以,，采用酒精底地擦洗一遍CO2孵箱,。然后再用新潔爾滅擦洗一遍，把水盤里加上飽和量的硫酸銅,。千萬不可大意!
四,、支原體感染
培養(yǎng)液變渾濁，支原體感染細(xì)胞以后,，細(xì)胞病變不很明顯,，只是細(xì)胞狀態(tài)變差、生長變慢,，在顯微鏡下觀察可能會有小黑點,，但培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁。細(xì)胞傳代以后就出現(xiàn)細(xì)胞間黑點,，細(xì)胞空泡化,，很多類似凋亡、壞死的細(xì)胞，最終細(xì)胞漂浮,，死亡,。
處理方法：
如果不是很珍貴的細(xì)胞的話，建議直接扔了吧,。還是那句話,，預(yù)防為主，如果是珍貴的細(xì)胞的話,，建議使用——支原體清除培養(yǎng)基,。
好物推薦——支原體清除培養(yǎng)基
此款支原體清除培養(yǎng)基是在市面上已有的支原體清除培養(yǎng)基基礎(chǔ)上開發(fā)的新一代產(chǎn)品，含有清除支原體的特殊成分(一種混合制劑,，可通過抑制DNA和支原體生長所必須的相關(guān)蛋白合成來取得良好的支原體清除效果,，挽救珍貴的細(xì)胞，減少因支原體污染帶來的損失),。
此產(chǎn)品經(jīng)過了數(shù)十種細(xì)胞的測試和長期的實驗驗證,，對細(xì)胞無害，對清除支原體污染效果好,，能夠很好的抑制和殺滅支原體,。并且安全可靠，工作濃度低,，無細(xì)胞毒性,。
使用支原體清除培養(yǎng)基處理污染細(xì)胞前后對比圖：
五、黑膠蟲污染
開始污染時對細(xì)胞無影響,，當(dāng)數(shù)量達(dá)到一定程度時就會對細(xì)胞產(chǎn)生影響,。400倍顯微鏡下可見點狀或片狀游動小體，培養(yǎng)液也是不渾的,，一般不會太影響,，細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長狀態(tài)良好,，且觀測到的運動物無明顯增多,，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化,，對細(xì)胞生長狀態(tài)不會有明顯影響,，在細(xì)胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理,。
處理方法：可以增加細(xì)胞的種板密度,，以提高細(xì)胞的生存率，盡早處理細(xì)胞,，越快越好。如果實在來不及了，推薦使用——黑膠蟲清除培養(yǎng)基
好物推薦——黑膠蟲清除培養(yǎng)基
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使用黑膠蟲清除培養(yǎng)基理污染細(xì)胞前后對比圖：
溫馨提醒：
學(xué)會對各種污染情況的辨別和處理是一項的實驗技能，希望大家在看完我們的文章后結(jié)合你的實驗操作,，學(xué)會如何應(yīng)對細(xì)胞污染,。
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