細胞質量決定實驗的進程與結果,，相信很多小伙伴在細胞培養(yǎng)上走了不少彎路,，事實上因為細胞污染而耽誤了實驗進度，影響畢業(yè)和發(fā)文章的進程的事件時常發(fā)生,。
所以今天小編整理了一下細胞培養(yǎng)過程中出現的一些現象與處理方法,，希望可以幫到大家。
一,、細菌污染
細菌污染最為常見,，一旦操作稍有不當，就會引起細胞污染,，細菌污染后顯微鏡下觀察呈現有黑色細條沙狀,，當然，根據感染的細菌不同,，所呈現的狀態(tài)也不盡相同，有球形,、桿狀等,，其次，培養(yǎng)液發(fā)黃,，變渾濁,，可明顯看見培養(yǎng)皿中有細沙狀的沉淀物，時不時還有異樣氣味發(fā)出,，如下圖所示：
處理方法：
在培養(yǎng)基中加入抗生素處理,，可以用四環(huán)素，慶大霉素,，或者鏈霉素,，前兩者的工作濃度是50 μg/mL;鏈霉素的工作濃度是100 μg/mL。但是,，細胞本身也有影響,，狀態(tài)大不如從前，所以,，防范于未然,，正確操作、嚴格執(zhí)行無菌操作規(guī)范，定期清理消毒培養(yǎng)設施才是關鍵!
二,、真菌污染
真菌污染培養(yǎng)液清亮透明,，不會像細菌感染大爆發(fā)，所以很難早期發(fā)現,，鏡下有時候象絲狀,，有時候象珊瑚狀，慢慢地會長出很細的黑色絲狀物,，這個時候,，已經晚了，細胞很難救活了,。
處理方法：趕緊扔掉,，不要再想挽救，即使再珍貴,。然后消毒滅菌培養(yǎng)間,，CO2孵箱，器皿和培養(yǎng)液,。
三,、霉菌污染
同真菌感染一致，因為培養(yǎng)液是清亮的,，所以霉菌污染早期難以發(fā)現,，等發(fā)現時往往已經為時過晚了。培養(yǎng)液中慢慢地出現絮狀雜質,，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,，如同風中柳絮，一般不仔細看發(fā)覺不出來,。細胞仍可生長,，但時間一長，細胞的狀態(tài)就變差,，不再增長,。見下圖。
處理方法：建議果斷舍棄該污染細胞,，將環(huán)境消毒,，因為霉菌的頑固可能會導致下幾批細胞都會污染，所以,，采用酒精底地擦洗一遍CO2孵箱,。然后再用新潔爾滅擦洗一遍，把水盤里加上飽和量的硫酸銅,。千萬不可大意!
四,、支原體感染
培養(yǎng)液變渾濁,，支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯,，只是細胞狀態(tài)變差,、生長變慢，在顯微鏡下觀察可能會有小黑點,，但培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁,。細胞傳代以后就出現細胞間黑點，細胞空泡化,，很多類似凋亡,、壞死的細胞，最終細胞漂浮,，死亡,。
處理方法：
如果不是很珍貴的細胞的話，建議直接扔了吧,。還是那句話,，預防為主，如果是珍貴的細胞的話,，建議使用——支原體清除培養(yǎng)基,。
好物推薦——支原體清除培養(yǎng)基
此款支原體清除培養(yǎng)基是在市面上已有的支原體清除培養(yǎng)基基礎上開發(fā)的新一代產品，含有清除支原體的特殊成分(一種混合制劑,，可通過抑制DNA和支原體生長所必須的相關蛋白合成來取得良好的支原體清除效果,，挽救珍貴的細胞，減少因支原體污染帶來的損失),。
此產品經過了數十種細胞的測試和長期的實驗驗證,，對細胞無害，對清除支原體污染效果好,，能夠很好的抑制和殺滅支原體。并且安全可靠,，工作濃度低,，無細胞毒性。
使用支原體清除培養(yǎng)基處理污染細胞前后對比圖：
五,、黑膠蟲污染
開始污染時對細胞無影響,，當數量達到一定程度時就會對細胞產生影響。400倍顯微鏡下可見點狀或片狀游動小體,，培養(yǎng)液也是不渾的,，一般不會太影響，細胞還是可以用的,。常常是細胞生長狀態(tài)良好,，且觀測到的運動物無明顯增多,，且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化,，對細胞生長狀態(tài)不會有明顯影響,，在細胞增殖旺盛之后會自然消失，除更換血清外無須特殊處理,。
處理方法：可以增加細胞的種板密度,，以提高細胞的生存率，盡早處理細胞,，越快越好,。如果實在來不及了，推薦使用——黑膠蟲清除培養(yǎng)基
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黑膠蟲清除培養(yǎng)基經過了上百種細胞的測試和長期的實驗驗證,，對細胞無害,，對清除“黑膠蟲"污染效果好，能夠很好的殺滅和抑制“黑膠蟲",，其它品牌的支原體培養(yǎng)基,。
使用黑膠蟲清除培養(yǎng)基理污染細胞前后對比圖：
溫馨提醒：
學會對各種污染情況的辨別和處理是一項的實驗技能，希望大家在看完我們的文章后結合你的實驗操作,，學會如何應對細胞污染,。
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