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銅檢測試劑盒(Cuprizone比色法)

產(chǎn)品簡介：

銅是人體重要的微量元素,，是酶的重要組成部分如銅藍蛋白(亞鐵氧化酶),、超氧化物歧化酶、細胞色素氧化酶等,，總含量約為90mg,，有90~95%的銅與球蛋白結(jié)合，形成銅藍蛋白,，5~10%的銅與清蛋白結(jié)合,，清蛋白可作為血漿銅的載體，銅的檢測方法有分光光度計,、原子吸收光譜法,、中子活化分析法等。

雅吉生物銅檢測試劑盒(Cuprizone微板法)檢測原理是在酸性介質(zhì)中與白蛋白結(jié)合的銅從白蛋白中解離出來,，經(jīng)沉淀蛋白質(zhì)后銅離子與Cuprizone絡(luò)合,，形成穩(wěn)定的藍色絡(luò)合物，通過酶標(biāo)儀測定620nm處吸光度,，形成的藍色與血清,、血漿銅成線性關(guān)系，與標(biāo)準品比較,，根據(jù)公式計算出銅含量,，該檢測試劑盒在62.8μmol/L以下線性關(guān)系良好，特異性高,，較為靈敏,。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途,。

該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,，不適用于臨床診斷或其他用途。

產(chǎn)品組成：

自備材料：

1,、分光光度計,、比色杯

2、1.5ml離心管或試管

3,、離心機

操作步驟(僅供參考)：

1,、制備樣品∶血漿、血清按照常規(guī)方法制備,，可以直接用于該試劑盒的測定,，-20℃凍存,，用于Cu的檢測。

2,、配制銅標(biāo)準工作液︰取適量的銅標(biāo)準(100μg/ml),，按銅標(biāo)準(100μg/ml)∶銅標(biāo)準稀釋液=1:24的比例配制銅標(biāo)準(4μg/ml)，即為銅標(biāo)準工作液;4℃避光保存,，3個月有效,。

3、Cu加樣∶最好選用經(jīng)稀鹽酸處理及去離子水清潔的干燥試管或者一次性無菌聚乙烯1.5ml離心管,，以及潔凈96孔板,，如果無法達到上述要求，應(yīng)盡量避免使用銅污染的器皿,，按下表操作,。

4,、Cu測定∶混勻，室溫靜置20min,，以空白調(diào)零,，酶標(biāo)儀620nm處測定標(biāo)準孔和測定孔的吸光度(即為A_{標(biāo)準}和A_測定)。

計算:

血漿,、血清銅(μmol/L)=(A_測定/A_{標(biāo)準}）×62.8

式中∶A_測定=測定管的吸光度

A_{標(biāo)準}=標(biāo)準管的吸光度

銅標(biāo)準(4μg/ml)=銅標(biāo)準(62.8μmol/L)

μg/dl=μmol/L/0.157

參考區(qū)間∶

成年健康人血清銅︰

男性∶10.99~21.98μmol/L(70~140μg/dl)

女性∶12.56~23.55μmol/L(80~150μg/dl)

注意事項∶

1,、如果樣品濃度過高，應(yīng)用去離子水稀釋后重測,，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù),。

2、實驗過程中用到的水,，不可用普通的蒸餾水,，盡量采用高純度的去離子水。

3,、玻璃器材盡量用10%的鹽酸浸泡24h,，取出后用去離子水沖洗后才可以使用。

4,、試驗中儀器、試管,、注射器等盡量避免銅污染,。

5,、測定波長可選600~640nm，檢測結(jié)果差異不大,。

6,、該試劑盒呈色穩(wěn)定，顯色后在4~20℃可穩(wěn)定1h,。

7,、隨著時間的延長，顏色會變淺或消失,，應(yīng)在1h內(nèi)檢測完畢,。

8、Cu Assay Buffer應(yīng)密閉保存,，用完立即蓋緊蓋子,，防止有效成分揮發(fā)。

9,、經(jīng)典標(biāo)準品采用銅標(biāo)準(2μg/ml),，如儀器精密干擾小，可以采用銅標(biāo)準(2μg/ml),，其計算公式為︰血漿,、血清銅(μmol/L)=(A_測定/A_{標(biāo)準})×31.4。

有效期∶12個月有效﹔常溫運輸,，4C保存

注意∶由于檢測儀器和操作手法等條件的不同,，參考值范圍會有波動，該值僅供參考,，對于要求精確計算銅含量的,，可以采用標(biāo)準曲線進行多點測定;根據(jù)雅吉生物測定經(jīng)驗顯示，標(biāo)準品濃度在0.5μg/ml 以下,，50μg/ml 以上,，標(biāo)準曲線會有偏差。