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一、產(chǎn)品描述

本慢病毒濃縮試劑為5×濃縮液,，可以對(duì)慢病毒顆粒進(jìn)行簡單快速的濃縮,。該試劑操作簡單，僅需將5×濃縮液與慢病毒上清按比例混合并孵育一段時(shí)間,，正常轉(zhuǎn)速離心,，即可得到濃縮的慢病毒顆粒，回收率高達(dá)90%以上,，可提高100倍病毒滴度,。

二、慢病毒濃縮試劑操作步驟

1.收集細(xì)胞培養(yǎng)上清液,，0.45μm濾膜過濾,，去除細(xì)胞和碎片。

【注】：濾膜過濾需使用低蛋白吸附的纖維素醋酸酯或聚醚砜（PES）膜,。切忌用硝酸纖維素膜（NC）,。

2.將慢病毒上清液與試劑盒中的濃縮液按照體積比4:1的體積混合（上清液4份,，濃縮液1份），混勻后4℃靜置,，每隔30min混勻一次,，混勻共進(jìn)行3次。4℃孵育2h或過夜,。

【注】：延長孵育時(shí)間可以提高回收率,。慢病毒顆粒在4℃可以穩(wěn)定保存數(shù)天。

3.4℃,，4000g離心30min,。

4.小心去除上清，不要?jiǎng)×一蝿?dòng)管子,，一般可見白色沉淀（有時(shí)沉淀不可見）,。

5.用初始體積（原上清液體積）1/10 - 1/100的DMEM或PBS重懸病毒顆粒，小心吹打均勻,，重懸沉淀物,。

6.重懸后的病毒以50µl/管分裝，-80℃冰箱保存,。

【注】：慢病毒凍存液避免反復(fù)凍融,，否則會(huì)降低病毒滴度。