目錄:柏萊源（天津）生物科技有限公司>>生物試劑>>染料>> GL802GS-GelRed 核酸凝膠染料（10,000×）
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 500 μL |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GL802 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產業(yè) |
產品特點
? 安全無毒：GS-GelRed的油性和大分子量特點使其不能穿透細胞膜進入細胞內,；
? 靈敏度高：適用于各種分子量DNA電泳，對于微量的DNA具有更高的檢測靈敏度,；
? 信噪比高：樣品熒光信號強,，背景信號低；
? 適用范圍廣：膠染法（電泳前染色）和泡染法（電泳后染色）均可,；適用于瓊脂糖凝膠或聚丙烯酰胺凝膠電泳,；可用于dsDNA、ssDNA和RNA染色,。
產品簡介
GS-GelRed 核酸凝膠染料（10,000×）是一種安全,、靈敏、穩(wěn)定的熒光核酸凝膠染色試劑,，適用于瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠上的dsDNA、ssDNA和RNA染色,，經過本產品染色的DNA條帶在紫外光投射下呈現(xiàn)紅色熒光,，可以替代溴化乙錠（EtBr）。艾姆斯氏試驗結果也表明,，該染料的誘變性遠遠小于溴化乙錠（EtBr）,，使用更加安全。
GS-GelRed和EB具有相同的光譜特性,，不需要更換成像系統(tǒng),，使用與觀察EB相同的普通紫外凝膠透射儀觀察即可，在300 nm紫外光附近可得到最佳激發(fā),。注意GS-GelRed不能被488 nm氬離子激光器（如藍光透射儀）或相似波長的可見光wan全激發(fā),，因此不推薦使用此類激發(fā)裝置的成像系統(tǒng)。
適用范圍
適用于瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠上的 dsDNA,、ssDNA 和 RNA 染色,。
注意事項
1. 染料無需低溫冷藏,，請于室溫下避光儲存，避免沉淀,。若出現(xiàn)沉淀,，請將染料置于 45~50℃ 2 min，振蕩使充分溶解后再使用,；
2. 由于 GS-GelRed 的高靈敏性,，建議減少 DNA 樣品上樣量，推薦已知濃度樣品的上樣量為50~200 ng/泳道,；
3. 聚丙烯酰胺凝膠電泳請使用泡染法,。
使用方法
一、膠染法（電泳前染色,，用法同 EB）
1. 配制合適濃度的瓊脂糖凝膠,；
2. 用微波爐加熱使瓊脂糖wan全融化；
3. 加入 GS-GelRed 使其終濃度為 1× （即 100 mL 凝膠中加入 10 μL GS-GelRed 10,000×水溶液）,，此時溶液呈淡粉色,；
4. 將含有 1×GS-GelRed 染液的瓊脂糖溶液倒入膠槽中，插入齒梳,，室溫凝固,；
5. 按照常規(guī)方法進行電泳；
6. 用 302 nm 激發(fā)的 UV 凝膠成像系統(tǒng)觀察結果,。
二．泡染法 （電泳后染色）
1. 按照常規(guī)方法進行電泳,；
2. 使用 0.1 M NaCl 溶液稀釋 GS-GelRed 染液至 3×染色液（例如將 15 μL GS-GelRed 10,000×水溶液加入 50 mL 0.1 M NaCl 溶液中）；
3. 將凝膠小心地放入合適的容器中,，緩慢加入足量的 3×染色液浸沒凝膠,，室溫搖床孵育 30 min（對于含 3.5~10%丙烯酰胺的聚丙烯酰胺凝膠，需孵育 30 min~1 h,，時間隨著丙烯酰胺含量增加而延長,。單次使用的 3×染色液可重復使用 3 次左右，室溫避光保存）,；
4. 用 302 nm 激發(fā)的 UV 凝膠成像系統(tǒng)觀察結果,。
GS-GelRed 核酸凝膠染料（10,000×）常見問題與解決辦法
Q1：使用膠染法，出現(xiàn) DNA 條帶彌散,、拖尾或彎曲等現(xiàn)象,？
A1：
1) 確保使用的染料終濃度為 1×；
2) DNA 上樣量過多,。將 DNA 樣品上樣量減少至 1/3 或 1/5,；
3) 凝膠濃度不合適。檢測大片段 DNA 建議使用低濃度瓊脂糖凝膠,；
4) 樣品中 loading buffer 過量,。loading buffer 中的 SDS 可能會影響電泳效果,，建議減少 loadingbuffer 用量；
5) 使用合適的電壓,，建議 5~10 V/cm,；
6) 使用新鮮的電泳緩沖液。
Q2：使用膠染法發(fā)現(xiàn) DNA 遷移率存在差異,？
A2：
1) 將 DNA 樣品上樣量減少至 1/3 或 1/5,；
2) GS-GelRed 分子量較大，大分子量導致 DNA 的遷移速率可能受到染料與 DNA 比率的影響,。因此不建議將 GS-GelRed 直接添加到 loading buffer 中使用,，這會導致條帶遷移不準確；
3) 可使用泡染法準確確定 DNA 條帶大小,。
Q3：ssDNA 和 RNA 染色效果不如 dsDNA,？
A3：GS-GelRed 對于 dsDNA 的靈敏度是 ssDNA 或 RNA 的 5 倍，可適當提高 ssDNA 或 RNA 上樣量,。
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