脂質(zhì)體和非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑是常用的基因遞送技術(shù)，它們能把DNA,、siRNA,、mRNA等分子送到真核細(xì)胞中，用于各種研究和藥物開發(fā),。今天我們來談?wù)?/span>脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑的配方,。
脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑主要由脂質(zhì)體、DNA,、緩沖液和穩(wěn)定劑組成,。脂質(zhì)體是一種包裹DNA的物質(zhì)，能把它送進(jìn)細(xì)胞,。它的配方包括正電荷脂質(zhì),、中性脂質(zhì)、膽固醇和PEG,。緩沖液負(fù)責(zé)調(diào)整pH值和離子強(qiáng)度,，有助于提高轉(zhuǎn)染效率,。穩(wěn)定劑則保護(hù)所有這些東西，防止在制備過程中降解,。
常見的一種脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑配方如下：
* 1,2-二棕櫚酸-3-辛?；?甘油（DOTAP）50μg + 膽固醇10μg + 磷酸二氫鈉2.5μg + 氯化鈉150mM + 無菌水10ml。
制作方法：
1. 把DOTAP和膽固醇溶于氯仿中,，制成脂質(zhì)體溶液,。
2. 把緩沖液的無菌水和氯化鈉溶液混合。
3. 把脂質(zhì)體溶液和DNA混合,，再加入緩沖液中,，輕輕攪勻。
4. 靜置15-30分鐘,，讓脂質(zhì)體和DNA充分結(jié)合,。
5. 將混合物滴入細(xì)胞培養(yǎng)皿，進(jìn)行轉(zhuǎn)染,。
不同的細(xì)胞系和DNA片段可能需要不同的轉(zhuǎn)染試劑配方和條件,。所以在開始實(shí)驗(yàn)前，最好先優(yōu)化轉(zhuǎn)染試劑的配方和條件,。
總的來說,，了解脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑的配方和制備方法對(duì)更好地開展研究十分有幫助。
本期內(nèi)容：脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑的配方
下期內(nèi)容：脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑與非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑的區(qū)別
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